检索结果-内蒙古大学图书馆

中国农业科学 2021年第10期54卷 2154-2166页

作者：李杰罗江宏杨萍红河学院生命科学与技术学院/云南省高校滇南特色生物资源研究与利用重点实验室

近年来,病毒诱导的基因沉默(virus-induced gene silencing,VIGS)技术作为一种研究植物基因功能的反向遗传学手段,因其构建简易、成本低、周期短等优势在功能基因组领域的研究更为广泛和深入。在蔬菜作物生长发育、逆境胁迫、物质合成... 详细信息

近年来,病毒诱导的基因沉默(virus-induced gene silencing,VIGS)技术作为一种研究植物基因功能的反向遗传学手段,因其构建简易、成本低、周期短等优势在功能基因组领域的研究更为广泛和深入。在蔬菜作物生长发育、逆境胁迫、物质合成和代谢调控等相关基因功能的研究中,VIGS作为一种快速、高效、高通量的基因沉默新技术发挥了重要作用。因此,利用VIGS技术开展蔬菜作物新基因的挖掘、抗病抗逆基因功能鉴定、作物改良、分子育种等相关研究的意义重大。目前,在蔬菜作物中已经成功建立了多种以病毒为载体的VIGS体系,但该体系仍然存在一些不足。随着研究者对VIGS作用机制的深入探究和病毒载体的不断开发,VIGS在蔬菜作物上的应用范围越来越广阔。本文通过梳理近年来国内外基于VIGS技术研究茄果类、瓜类和叶菜类等蔬菜基因功能的研究报道和发展趋势,对VIGS技术机制、病毒载体的应用以及VIGS技术进展做了简要解析,同时对比分析了VIGS技术与RNA干扰技术(RNA interference,RNAi)以及当前较为流行的CRISP/CAS9技术的优缺点。重点介绍VIGS技术在蔬菜果实发育和抗病中的应用,对该技术在蔬菜作物物质代谢、激素调控、生物与非生物胁迫应答方面的最新进展进行了综述,并列举了利用VIGS技术研究茄果类、瓜类、叶菜类和豆类蔬菜靶基因功能和沉默表型的案例,总结了VIGS技术在研究蔬菜作物基因功能时缺乏适合的VIGS载体,缺乏有效的病毒载体侵染方法,在某些组织中难以系统性沉默,沉默效率低,VIGS固有的局限性等方面存在的问题和不足。同时提出了未来VIGS技术在开发特异性与稳定性更高的病毒载体,选择高效的基因片段,建立适合更多寄主范围的病毒载体等方面的研究方向。对VIGS技术用于蔬菜基因功能分析、蔬菜作物改良、分子育种以及生产不携带外源基因的蔬菜品种育成等方面的应用前景进行了展望,以期为开展蔬菜作物生长发育、次生代谢、逆境胁迫等相关基因功能研究以及突破制约VIGS技术的关键因素研究提供思路与参考。

关键词：基因沉默 VIGS技术蔬菜基因功能

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抗菌肽Omiganan的克隆、表达和抑菌活性

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华北农学报 2021年第2期36卷 62-67页

作者：谢昆李密杰蒋成砚鲁海菊孔琼何超沈登荣红河学院生命科学与技术学院云南蒙自661199 云南省高校滇南特色生物资源研究与利用重点实验室云南蒙自661199

为获得Omiganan抗菌肽并研究其抑菌活性,根据Omiganan抗菌肽的一级结构(NH2-ILRWPWWPWRRK-COOH),通过基因工程技术,参考大肠杆菌和毕赤酵母偏爱密码子原则,分别获得Omiganan核苷酸序列,再以Omiganan核苷酸序列为模板,设计特异性引物,通... 详细信息

为获得Omiganan抗菌肽并研究其抑菌活性,根据Omiganan抗菌肽的一级结构(NH2-ILRWPWWPWRRK-COOH),通过基因工程技术,参考大肠杆菌和毕赤酵母偏爱密码子原则,分别获得Omiganan核苷酸序列,再以Omiganan核苷酸序列为模板,设计特异性引物,通过PCR技术扩增Omiganan基因,分别与pET32a表达载体和pPIC9K连接构建pET32a-Omiganan原核表达载体和pPIC9K-Omiganan毕赤酵母表达载体,对含pET32a-Omiganan重组质粒的菌株分别采用IPTG 25℃,IPTG 37℃2种温度和自诱导方式表达获得Omiganan重组蛋白,对含pPIC9K-Omiganan毕赤酵母菌株采用1%甲醇诱导获得Omiganan抗菌肽。结果表明,自诱导14 h后Omiganan重组蛋白的表达量最高,IPTG 25℃,IPTG 37℃2种温度皆能诱导Omiganan重组蛋白的表达,但两者之间无显著差异。通过毕赤酵母表达的Omiganan抗菌肽对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌均具有很强的抑菌活性。

关键词： Omiganan 抗菌肽克隆表达抑菌活性

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沉默辣椒Lcyb和BZR1基因对其叶片类胡萝卜素积累的影响

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农业生物技术学报 2021年第1期29卷 47-57页

作者：李杰罗江宏杨萍红河学院生命科学与技术学院/云南省高校滇南特色生物资源研究与利用重点实验室

类胡萝卜素作为光合系统和抗氧化系统的重要成员,在植物的生长发育和抗逆过程中起着重要作用。为了研究辣椒番茄红素β-环化酶(lycopeneβ-cyclase, Lcyb)和芸薹素唑耐受因子1(brassinazole-resistant 1, BZR1)基因在其胡萝卜素合成中... 详细信息

类胡萝卜素作为光合系统和抗氧化系统的重要成员,在植物的生长发育和抗逆过程中起着重要作用。为了研究辣椒番茄红素β-环化酶(lycopeneβ-cyclase, Lcyb)和芸薹素唑耐受因子1(brassinazole-resistant 1, BZR1)基因在其胡萝卜素合成中的作用,本研究以辣椒(Capsicum annuum)’陕早红’为材料,采用病毒诱导的基因沉默(virus-induced gene silencing, VIGS)技术构建以烟草脆裂病毒(Tobacco rattle virus, TRV)介导的Lcyb和BZR1基因TRV-VIGS瞬时沉默体系,采用叶脉注射法获得辣椒Lcyb、BZR1基因表达和RNAi株系幼苗,以未侵染辣椒植株为正常对照,TRV2-八氢番茄红素脱氢酶(phytoene desaturase, PDS)基因侵染植株为阳性对照,TRV2空载体侵染植株为阴性对照,通过q RT-PCR检测沉默辣椒中Lcyb和BZR1基因表达,并测定沉默株系叶片类胡萝卜素的积累。结果表明,病毒侵染21 d后,TRV2-PDS侵染的辣椒植株叶片出现白化现象,经qRT-PCR检测发现,Lcyb和BZR1基因表达量均显著降低,且两种沉默株系辣椒叶片类胡萝卜素含量显著低于正常对照植株(P<0.05),说明Lcyb和BZR1基因参与辣椒叶片类胡萝卜素的合成。本研究对TRV介导的基因沉默在辣椒基因功能分析的研究提供了参考依据。

关键词：辣椒病毒诱导基因沉默类胡萝卜素 Lcyb基因 BZR1基因

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阳春砂叶绿体全基因组解析及系统发育研究

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西北植物学报 2020年第6期40卷 978-986页

作者：马孟莉孟衡玲张薇雷恩卢丙越云南省高校滇南特色生物资源研究与利用重点实验室云南蒙自661100 红河学院生命科学与技术学院云南蒙自661100

以姜科(Zingiberaceae)豆蔻属(Amomum Roxb.)阳春砂(Amomum villosum)为试材,利用Illumina Hiseq 4000测序平台对阳春砂叶绿体基因组进行测序,通过生物信息学分析方法进行序列组装、注释和特征分析,以揭示阳春砂与其他姜科植物的进化关... 详细信息

以姜科(Zingiberaceae)豆蔻属(Amomum Roxb.)阳春砂(Amomum villosum)为试材,利用Illumina Hiseq 4000测序平台对阳春砂叶绿体基因组进行测序,通过生物信息学分析方法进行序列组装、注释和特征分析,以揭示阳春砂与其他姜科植物的进化关系及其在系统发育中的地位,为豆蔻属植物的物种鉴定提供理论依据。结果表明:(1)阳春砂叶绿体基因组全长164069 bp,GC含量为36.1%,包括1对29959 bp的反向重复区(IR)、一个大单拷贝区(LSC;88798 bp)和一个小单拷贝区(SSC;15353 bp);共注释得到133个基因,包括8个rRNA基因、38个tRNA基因和87个蛋白编码基因。(2)在阳春砂基因组中共检测到157个SSR位点,大部分SSR均由A和T组成;豆蔻属物种在基因组大小、IR边界区高度保守,核酸变异主要发生在LSC和SSC区。(3)最大似然法(Maximum Likelihood,ML)聚类分析显示,阳春砂与同属的爪哇白豆蔻(Amomum compactum)和白豆蔻(Amomum kravanh)亲缘关系最近,并且与山姜属(Alpinia Roxb.)也有较近的亲缘关系。

关键词：姜科阳春砂叶绿体基因组系统发育

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石榴YABBY基因家族的生物信息学分析

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分子植物育种 2021年第13期19卷 4302-4310页

作者：李圣龙李晓静红河学院生命科学与技术学院云南省高校滇南特色生物资源研究与利用重点实验室蒙自661100

YABBY基因家族是种子植物特有的转录因子,该家族具有N-末端锌指结构域和C-末端螺旋-环-螺旋保守结构域;在植物的生长发育,特别是叶片的生长、果实的发育、花器官的形成和植物次生代谢物质的代谢中起重要作用。本研究从石榴基因组中鉴定... 详细信息

YABBY基因家族是种子植物特有的转录因子,该家族具有N-末端锌指结构域和C-末端螺旋-环-螺旋保守结构域;在植物的生长发育,特别是叶片的生长、果实的发育、花器官的形成和植物次生代谢物质的代谢中起重要作用。本研究从石榴基因组中鉴定到6个YABBY基因,并将其划分为5个亚族。不同器官和品种的表达分析表明:Pg YABBY基因家族在石榴的生长发育和生理过程中起重要作用。转录组分析表明:PgYAB2可能负调控石榴果皮和种子的发育。PgINO有可能负调控外种皮的发育。PgFILb基因有可能通过调控木质素或半纤维素等次生代谢物质的生物合成相关基因的表达进而调控石榴籽粒的硬度。本研究结果为石榴YABBY家族基因功能研究、探索YABBY调控石榴果实发育及品质形成提供参考,为石榴的分子育种提供科学依据。

关键词：石榴(Punica granatum L.) YABBY基因家族果实发育

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异迟眼蕈蚊幼虫饲养密度对生长发育和繁殖的影响

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河南农业大学学报 2020年第5期54卷 810-814,822页

作者：沈登荣李河何超张睿袁盛勇田学军红河学院生命科学与技术学院/云南省高校滇南特色生物资源研究与利用重点实验室云南蒙自661199

为探讨异迟眼蕈蚊不同幼虫饲养密度对其生长发育和种群繁殖的影响,设置5个幼虫饲养密度(10、40、70、100、130头·瓶-1)处理,观察分析了异迟眼蕈蚊的发育历期、存活率、单雌产卵量等。结果表明,异迟眼蕈蚊幼虫密度对幼虫历期、化蛹... 详细信息

为探讨异迟眼蕈蚊不同幼虫饲养密度对其生长发育和种群繁殖的影响,设置5个幼虫饲养密度(10、40、70、100、130头·瓶-1)处理,观察分析了异迟眼蕈蚊的发育历期、存活率、单雌产卵量等。结果表明,异迟眼蕈蚊幼虫密度对幼虫历期、化蛹率和羽化率均有显著影响(P<0.05),其中幼虫密度为70头·瓶-1和100头·瓶-1时,可显著缩短幼虫发育历期;幼虫密度为70头·瓶-1时,化蛹率和羽化率最高,分别达79.95%和85.68%。幼虫密度对成虫寿命、产卵期、单雌产卵量也有显著影响(P<0.05),均以70头·瓶-1幼虫密度处理影响最大,其中雌虫寿命为3.58 d,雄虫寿命为3.45 d,产卵期为2.83 d,单雌产卵量为80.58粒。种群生命表分析说明,幼虫密度为70头·瓶-1的种群增长指数最大,繁殖一代后种群数量可增加24.2倍。表明幼虫密度是影响异迟眼蕈蚊种群增长的重要因子之一,可作为种群调查重要指标之一。

关键词：异迟眼蕈蚊幼虫密度生长发育种群增长指数

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野蚕豆根根腐病原菌、生物学特性及其有效杀菌剂研究

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西南农业学报 2020年第7期33卷 1480-1485页

作者：孔琼袁盛勇郭建伟周银丽薛春丽李珣罗武华红河学院生命科学与技术学院/云南省高校滇南特色生物资源研究与利用重点实验室云南蒙自661199

【目的】本文研究了野蚕豆根的一种根部病害,明确了引起该病病原菌的种类和生物学特性,并筛选出防治该病的有效药剂。【方法】运用形态学对引起该病的病原进行鉴定,采用菌丝生长速率、产孢量大小和孢子萌发率测定了该病菌的生物学特性,... 详细信息

【目的】本文研究了野蚕豆根的一种根部病害,明确了引起该病病原菌的种类和生物学特性,并筛选出防治该病的有效药剂。【方法】运用形态学对引起该病的病原进行鉴定,采用菌丝生长速率、产孢量大小和孢子萌发率测定了该病菌的生物学特性,采用平皿测定了10种杀菌剂对该病原菌的室内抑菌效果。【结果】野蚕豆根的根腐病病原菌为茄病镰孢蓝色变种[Fusarium solani ***(Sacc.)Booth];适合病菌生长的培养基为PSA;菌丝生长和产孢最适温度25℃;湿度对孢子萌发率具有较大影响,湿度越高,萌发率越高;菌丝生长和产孢的pH为7~8;菌落生长和产孢的最适碳源为可溶性淀粉,菌落扩展的最适氮源是硝酸钾,产孢最适氮源为硫酸铵;连续光照有利菌丝生长和产孢;病原菌分生孢子致死温度为55℃、10 min;10种杀菌剂对野蚕豆根根腐病原的毒力从大到小为尚果>应得>扑海因>灰灭>甲基托布津>灵动>黑白立消>保丽丹>保亮>翠贝,其中尚果(三唑类)、应得(三唑类)和扑海因(二甲酰亚胺类)3种杀菌剂的抑菌活性较强。【结论】首次确定了引起野蚕豆根根腐病的病原为茄病镰孢蓝色变种Fusarium solani ***,获得了影响该菌生长的营养物质种类和环境因素,并筛选出抑菌效果较好的杀菌剂分别为400 g/L氟硅唑、24%腈苯唑和50%异菌脲。

关键词：野蚕豆根根腐病鉴定生物学特性杀菌剂

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吡虫啉对异迟眼蕈蚊抗性筛选及其对解毒酶活性的影响

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河南农业科学 2021年第7期50卷 110-116页

作者：张睿何超李河沈登荣袁盛勇李珣红河学院生命科学与技术学院/云南省高校滇南特色生物资源研究与利用重点实验室云南蒙自661199

异迟眼蕈蚊是一种食用菌的主要害虫。为探讨该虫对吡虫啉的抗性风险及生化机制,在室内采用吡虫啉对异迟眼蕈蚊进行抗性筛选并进行抗性现实遗传力(h2)分析,测定吡虫啉亚致死剂量(LC10、LC20和LC40)处理下异迟眼蕈蚊解毒酶活性。结果表明... 详细信息

异迟眼蕈蚊是一种食用菌的主要害虫。为探讨该虫对吡虫啉的抗性风险及生化机制,在室内采用吡虫啉对异迟眼蕈蚊进行抗性筛选并进行抗性现实遗传力(h2)分析,测定吡虫啉亚致死剂量(LC10、LC20和LC40)处理下异迟眼蕈蚊解毒酶活性。结果表明,抗性筛选21代后异迟眼蕈蚊抗性倍数为4.09倍,该虫对吡虫啉处于敏感性下降水平。异迟眼蕈蚊对吡虫啉的抗性现实遗传力(h2)为0.0913,当选择压力在80%~90%时,预测异迟眼蕈蚊抗性增长10倍需要15.9~20.1代。随着吡虫啉亚致死剂量的增加,敏感品系和抗性品系异迟眼蕈蚊的多功能氧化酶O-脱甲基和羧酸酯酶活性逐渐上升,均在LC40处理48 h达到峰值,此时多功能氧化酶O-脱甲基活性分别较空白对照上升了63.81%和119.42%,羧酸酯酶活性分别较空白对照上升了18.40%和48.13%。综上,异迟眼蕈蚊对吡虫啉产生抗性的风险较低,多功能氧化酶和羧酸酯酶活性的增强与异迟眼蕈蚊对吡虫啉产生代谢抗性有密切关系。

关键词：异迟眼蕈蚊吡虫啉抗性筛选抗性现实遗传力亚致死剂量多功能氧化酶羧酸酯酶

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利用SRAP标记分析草果遗传多样性

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分子植物育种 2020年第16期18卷 5428-5435页

作者：马孟莉张婷婷朱玉逍齐国芳雷程亮王田涛卢丙越红河学院生命科学与技术学院云南省高校滇南特色生物资源研究与利用重点实验室蒙自661199

为明确云南草果遗传多样性水平,本研究以草果主产地红河州4个居群48份草果为实验材料,利用SRAP分子标记分析草果遗传多样性。结果表明:12对SRAP引物共扩增181个条带,多态性条带比率(PPB)为99.45%,平均多态信息含量(PIC)为0.276。在群体... 详细信息

为明确云南草果遗传多样性水平,本研究以草果主产地红河州4个居群48份草果为实验材料,利用SRAP分子标记分析草果遗传多样性。结果表明:12对SRAP引物共扩增181个条带,多态性条带比率(PPB)为99.45%,平均多态信息含量(PIC)为0.276。在群体水平上,PPB从72.93%到77.35%,平均为75.55%;Nei's基因多样性指数(H)从0.197到0.234,平均为0.216;Shannon信息指数(I)为0.312到0.357,平均值为0.334。草果总遗传多样性的92.49%(Hs=0.215 5)来自于居群内部,居群间遗传变异只占7.51%(Gst=0.075 1),AMOVA分析进一步证明草果的遗传变异主要存在居群内部。4个草果居群遗传一致度分析显示各居群的遗传一致度较高(0.958 2~0.983 3),其中元阳居群和绿春居群的遗传关系相对较近,金平居群和屏边居群的遗传关系相对较远,居群间遗传变异较小。本研究可为草果资源的保护及利用提供重要的理论依据。

关键词：草果(Amomum tsao-ko) 遗传多样性 SRAP标记遗传分化

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基于表型和SSR标记的金平草果遗传多样性分析

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作物杂志 2020年第2期 54-59页

作者：马孟莉王田涛雷恩孟衡玲张薇张婷婷卢丙越红河学院生命科学与技术学院/云南省高校滇南特色生物资源研究与利用重点实验室云南蒙自661100

草果是常见中药材和调味料,主产于云南。以主产地云南省红河州金平县的草果为研究对象,利用表型和SSR标记分析草果遗传多样性。结果表明:13个数量性状的变异系数为7.64%~50.00%,Shannon-Weaver多样性指数为1.74~2.16,其中挂果率的变异... 详细信息

草果是常见中药材和调味料,主产于云南。以主产地云南省红河州金平县的草果为研究对象,利用表型和SSR标记分析草果遗传多样性。结果表明:13个数量性状的变异系数为7.64%~50.00%,Shannon-Weaver多样性指数为1.74~2.16,其中挂果率的变异系数最大,鲜果长的多样性水平最高;提取的前4个主成分可解释81.615%的变异,第1主成分可解释37.369%的表型变异,与产量密切相关的干果重、鲜果重、干果皮重和单果种子数等指标荷载量较高。5对SSR标记在44份草果样本中共扩增出23个条带,平均每对引物可检测到4.6个多态性位点,多态位点百分率为100%,Shannon’s信息指数和平均多态信息含量分别为1.266和0.672;聚类分析可将44个样本分为2大类,第1类包含34个样本,第2类由10个样本构成。本研究表明金平草果具有丰富的表型变异和较高的分子遗传多样性。

关键词：草果遗传多样性表型 SSR

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