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中华结核和呼吸杂志 2025年第5期48卷 448-455页

作者：马璟玥朱翠明田畦张天援刘全忠钟光明刘原君天津医科大学总医院皮肤性病科天津性传播疾病研究所天津南华大学衡阳医学院病原生物学研究所衡阳湖南省妇幼保健院妇产科长沙上海交通大学医学院上海市病毒研究院上海美国德州大学圣安东尼奥健康医学中心微生物免疫教研室德克萨斯州TX

目的初步探索抗生素对小鼠肺等多器官鼠衣原体感染的变化、免疫反应及肠道细菌的影响。方法将C57BL/6J小鼠按照随机数字表法分为抗生素组和对照组, 对照组给予饮用水, 抗生素组给予灌胃2次并饮用含万古霉素和庆大霉素水溶液2周。两组小... 详细信息

目的初步探索抗生素对小鼠肺等多器官鼠衣原体感染的变化、免疫反应及肠道细菌的影响。方法将C57BL/6J小鼠按照随机数字表法分为抗生素组和对照组, 对照组给予饮用水, 抗生素组给予灌胃2次并饮用含万古霉素和庆大霉素水溶液2周。两组小鼠均鼻内感染鼠衣原体, 并持续监测其体重变化。在感染后的第10天, 对小鼠实施安乐死, 随后检测多个器官中的鼠衣原体载量, 并对肺组织进行免疫荧光染色及病理损伤评分。酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血清中鼠衣原体特异性IgG及其分型, 流式细胞术分析脾脏细胞因子肿瘤坏死因子(TNF)-α、干扰素(IFN)-γ、IL-5、IL-13水平。留取小鼠粪便样本qPCR检测肠道细菌组成。应用SPSS26.0软件进行数据统计, 组间比较采用方差分析。结果鼻内感染鼠衣原体后两组小鼠体重从第2天开始下降, 对照组下降迅速并于第6天开始恢复, 抗生素组下降稍慢并于第8天开始恢复。抗生素组小鼠肺、心、肝、脾、肾中鼠衣原体载量高于对照组(均P<0.05), 而下消化道(空肠、回肠、盲肠、结肠、直肠)鼠衣原体载量低于对照组(均P<0.01)。肺组织免疫荧光染色抗生素组鼠衣原体数为(8.94±4.13)IFU/低倍镜视野, 高于对照组的(3.73±1.49)IFU/低倍镜视野(F=7.06, P<0.05);炎症细胞浸润且病理损伤评分为(3.12±0.59)分, 也高于对照组的(1.80±0.69)分(F=10.47, P<0.05)。抗生素组血清鼠衣原体特异性IgG抗体水平低于对照组(F=5.95, P<0.05), 脾脏CD4+和CD8+T细胞的细胞因子TNF-α水平高于对照组(均P<0.05), 而IL-13水平低于对照组(均P<0.05)。抗生素处理后小鼠肠道细菌中拟杆菌比例显著降低(F=97.57, P<0.01), 而厚壁菌比例升高(F=154.51, P<0.01)。鼠衣原体感染后对照组拟杆菌、α-变形菌和产气荚膜梭菌比例降低(均P<0.05), 阿克曼菌比例升高(F=9.58, P<0.01);抗生素组拟杆菌和厚壁菌比例降低(F=4.85, P<0.05;F=25.35, P<0.01), 疣微菌和阿克曼菌比例升高(F=11.44、F=15.46, P<0.01)。结论抗生素导致小鼠肺等实质脏器鼠衣原体感染和肺组织病理损伤加重, 血清IgG减少、脾脏TNF-α增加和IL-13减少, 并引发肠道细菌组成变化。

关键词：抗生素肺炎鼠衣原体免疫反应肠道细菌

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沙眼衣原体pORF5质粒蛋白诱发小鼠生殖道免疫损伤初步研究

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中华微生物学和免疫学杂志 2013年第2期33卷 107-111页

作者：邓红玉李忠玉吴移谋周辉马康康陆春雪钟光明南华大学医学院微生物学与免疫学教研室衡阳421001 美国德州大学圣安东尼奥健康科学中心

目的研究沙眼衣原体（Ch／amyd／atrachomatis，ct）pORt5质粒蛋白对小鼠生殖道组织的免疫损伤作用，并初步探讨其损伤机制。方法表达纯化GST-pORF5融合蛋白，融合蛋白经PreScissionProtease酶切和去内毒素处理后分别在第1、3、6天接种... 详细信息

目的研究沙眼衣原体（Ch／amyd／atrachomatis，ct）pORt5质粒蛋白对小鼠生殖道组织的免疫损伤作用，并初步探讨其损伤机制。方法表达纯化GST-pORF5融合蛋白，融合蛋白经PreScissionProtease酶切和去内毒素处理后分别在第1、3、6天接种于BALB／c小鼠阴道后穹窿，第7天处死小鼠，分离小鼠生殖道组织，肉眼大体观察并进行炎症病理评分；ELISA方法检测血清、阴道灌洗液和小鼠脾细胞培养上清中的TNF-a、IL-1β和IL石细胞因子水平。结果pORF5蛋白接种组小鼠输卵管壶腹部与峡部出现不同程度的肿胀，周围结缔组织发生黏连，并出现了不同程度的扭曲与积水，而PBS和csr（谷胱甘肽S-转移酶）蛋白对照组输卵管组织未出现明显改变；同时生殖道组织炎症病理积分明显高于PBS对照组（P〈0．01）和GST对照组（P〈0．01）；pOaF5蛋白接种组小鼠脾细胞培养上清、阴道分泌物中TNF-a、IL-IB、Ib6水平均显著高于PBS和GST蛋白对照组（P〈0．05）；血清中TNF-a、IL-1B水平显著高于PBS和GST蛋白对照组（P〈0．01）。结论pOaF5蛋白能引起BAIB/c小鼠生殖道组织免疫损伤，该损伤机制可能与TNF-a、IL-115、IL石等炎症因子水平升高有关。

关键词：沙眼衣原体 pORF5质粒蛋白免疫损伤细胞因子

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Melatonin及其衍生物作为急性严重呼吸系统综合征急救用药的理论基础和临床应用的可行性

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中国药理学通报 2003年第7期19卷 721-722页

作者：谭敦宪霍玉书杜冠华张均田美国德克萨斯州立大学圣安东尼奥健康科学中心分子与细胞结构教研室美国德克萨斯州立大学圣安东尼奥健康科学中心微生物与免疫教研室中国医学科学院药物研究所北京100050

已有研究资料表明 ,Melatonin作为一种维生素样内源物质 ,具有多方面的生理作用和极强的抗炎、抗自由基作用 ,在组织损伤方面可以发挥保护作用。近来实验研究证明 ,Melatonin对急性呼吸综合征具有改善症状作用 ,在Melatonin基础上新合... 详细信息

已有研究资料表明 ,Melatonin作为一种维生素样内源物质 ,具有多方面的生理作用和极强的抗炎、抗自由基作用 ,在组织损伤方面可以发挥保护作用。近来实验研究证明 ,Melatonin对急性呼吸综合征具有改善症状作用 ,在Melatonin基础上新合成的具有强大抗氧化作用的衍生物也表现良好的作用。

关键词： melatonin 急性严重呼吸系统综合征抗氧化作用

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沙眼衣原体质粒蛋白pORF5生物学特性初步研究

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中华微生物学和免疫学杂志 2011年第2期31卷 124-128页

作者：李忠玉吴移谋黄秋林钟光明南华大学医学院微生物学与免疫学教研室衡阳421001 南华大学第一附属医院普外科美国德州大学圣安东尼奥医学研究中心

目的分析沙眼衣原体（Chlamydia trachomatis,Ct）隐蔽性质粒编码的质粒蛋白pORF5在感染细胞中的定位并初步探讨其生物学特征.方法 PCR扩增pORF5质粒蛋白编码基因,构建pORF5原核表达重组体并诱导表达融合蛋白融合蛋白经Glutathione S... 详细信息

目的分析沙眼衣原体（Chlamydia trachomatis,Ct）隐蔽性质粒编码的质粒蛋白pORF5在感染细胞中的定位并初步探讨其生物学特征.方法 PCR扩增pORF5质粒蛋白编码基因,构建pORF5原核表达重组体并诱导表达融合蛋白融合蛋白经Glutathione Sepharose亲和层析纯化后免疫小鼠,制备单克隆抗体和多克隆抗体,间接免疫荧光技术及免疫印迹鉴定抗体的特异性分析pORF5质粒蛋白在感染细胞中的分布及表达模式特征.采用ELISA分析pORF5质粒蛋白在自然感染状态下的表达情况及免疫原性.结果 pORF5主要分布于宿主细胞质,但也少量分布在原体（EB）和网状体（RB）上,在细胞质中的分布模式与衣原体分泌蛋白酶样活性因子（CPAF）基本相似,激光共聚焦结果显示两者并不重叠 pORF5能与Ct生殖道感染患者血清发生强烈的免疫应答.结论 pORF5为衣原体分泌蛋白,并具有很强的免疫原性在自然感染状态下,pORF5质粒蛋白基因被激活产生内源性靶蛋白.

关键词：沙眼衣原体质粒分泌蛋白 pORF5

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肠道代谢组学与代谢性疾病

肠道代谢组学与代谢性疾病

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中国中西医结合学会微循环2009学术大会

作者：霍玉书美国德州大学圣安东尼奥医学中心微生物与免疫教研室

2003年美国华盛顿大学分子生物学与药理学Jeffrey ***课题组在SCIENCE 8 MARCH2003VOL299发表论文;从基因组学角度看人类与多型拟杆菌(Bacteroides thetaiotaomicron)的共生关系。将肠道微生态学纳入基因组学研究。其后不断有食物-肠道... 详细信息

2003年美国华盛顿大学分子生物学与药理学Jeffrey ***课题组在SCIENCE 8 MARCH2003VOL299发表论文;从基因组学角度看人类与多型拟杆菌(Bacteroides thetaiotaomicron)的共生关系。将肠道微生态学纳入基因组学研究。其后不断有食物-肠道菌代谢动力学-肠道吸收与体内代谢组学的研究报导。逐步认识到人类代谢性疾病是环境因素-通过肠道菌群与人体基因组学的整合过程中的肠道-代谢组学的失常。对肥胖、代谢综合症、糖尿病的病因学增加一个研究热点。

关键词：代谢性疾病代谢组学肠道菌群

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沙眼衣原体蛋白水解酶CT841在感染细胞中的定位及抗原性研究

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免疫学杂志 2012年第3期28卷 203-207页

作者：陆春雪曾浩吴移谋彭波胡四海蔡恒玲李忠玉钟光明南华大学微生物与免疫学教研室衡阳421001 第三军医大学临床微生物学及免疫学教研室重庆400038 美国德克萨斯大学圣安东尼奥健康科学中心微生物学与免疫学系德州78229

目的分析沙眼衣原体蛋白水解酶CT841在感染细胞中的定位并探讨其抗原性。方法利用PCR技术获得衣原体CT841基因,将基因序列克隆到载体pGEX6p,转化大肠杆菌XL1-blue,IPTG诱导表达融合蛋白GST-CT841。融合蛋白经纯化后免疫小鼠制备特异性抗... 详细信息

目的分析沙眼衣原体蛋白水解酶CT841在感染细胞中的定位并探讨其抗原性。方法利用PCR技术获得衣原体CT841基因,将基因序列克隆到载体pGEX6p,转化大肠杆菌XL1-blue,IPTG诱导表达融合蛋白GST-CT841。融合蛋白经纯化后免疫小鼠制备特异性抗体,间接免疫荧光法分析CT841在感染细胞中的分布特征;ELISA法分析CT841的抗原性。结果CT841原核表达重组体成功构建;CT841在感染细胞的表达模式与主要外膜蛋白MOMP相似,而与衣原体蛋白酶样活性因子CPAF及包涵体膜蛋白IncA的分布模式不同;CT841与衣原体感染患者、猴、鼠血清均发生强烈的免疫反应。结论沙眼衣原体蛋白酶CT841是定位于衣原体菌体上的免疫优势抗原。

关键词：沙眼衣原体 CT841 细胞定位抗原性

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TLR2信号在沙眼衣原体生殖道感染中介导了早期炎症细胞因子的产生

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免疫学杂志 2015年第6期31卷 496-500页

作者：王振辉常晓彤郝敏宋桂芹侯丽娟张颖骞解放军第251医院核医学科张家口075000 河北北方学院生物化学教研室张家口075000 德克萨斯大学圣安东尼奥健康科学中心微生物学与免疫学系美国德克萨斯州圣安东尼奥78229

目的探讨TLR2和TLR4在小鼠沙眼衣原体生殖道感染免疫应答中的作用。方法用沙眼衣原体小鼠肺炎株(Mo Pn,1×104IFUs)经生殖道感染野生型小鼠(WT,11只)、TLR2基因缺陷小鼠(TLR2 KO,14只)和TLR4基因缺陷小鼠(TLR4 KO,11只),复制生殖道... 详细信息

目的探讨TLR2和TLR4在小鼠沙眼衣原体生殖道感染免疫应答中的作用。方法用沙眼衣原体小鼠肺炎株(Mo Pn,1×104IFUs)经生殖道感染野生型小鼠(WT,11只)、TLR2基因缺陷小鼠(TLR2 KO,14只)和TLR4基因缺陷小鼠(TLR4 KO,11只),复制生殖道沙眼衣原体感染模型。于感染后不同时间点取生殖道分泌物,部分用于免疫荧光法检测衣原体包涵体数量,部分用于炎症细胞因子IL-1α、IL-6和MIP-2水平检测。在感染后第70天,处死小鼠,无菌分离腹腔巨噬细胞,于体外衣原体Mo Pn感染,培养24 h后,测定上清液中IL-1α、IL-6和MIP-2含量。细胞因子含量测定均采用ELISA法。结果 TLR2 KO或TLR4 KO小鼠与WT小鼠在每一个检测时间点下生殖道带菌量无差异,且带菌持续时间相同,截止到感染后第38天,3种基因型所有小鼠均清除了下生殖道感染的衣原体。TLR2基因缺失小鼠巨噬细胞产生的炎症细胞因子IL-1α、IL-6和MIP-2水平均明显低于野生型WT小鼠(P<0.01),而TLR4基因缺失小鼠巨噬细胞产生的3种炎症细胞因子水平均与野生型WT小鼠无差异(P>0.05);TLR2基因缺失小鼠棉拭子标本同样具有较低水平的炎症细胞因子(P<0.05)。结论在沙眼衣原体生殖道感染中,TLR2介导了早期炎症细胞因子的产生。沙眼衣原体诱导的早期免疫应答部分依赖于TLR2,而不依赖TLR4。

关键词：沙眼衣原体 Toll样受体2 Toll样受体4 生殖道感染免疫应答

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衣原体质粒编码蛋白对衣原体在消化道定植及其耐受胃酸杀伤的作用

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中华传染病杂志 2023年第11期41卷 726-733页

作者：马璟玥刘全忠钟光明刘原君天津医科大学总医院皮肤性病科/天津性传播疾病研究所天津300052 美国得克萨斯大学圣安东尼奥健康医学中心微生物免疫教研室美国得克萨斯州TX78229

目的初步探索鼠衣原体质粒编码蛋白(pGP)维持鼠衣原体定植在消化道的作用,并分析具体参与鼠衣原体在消化道抵制胃酸杀伤作用的pGP种类。方法选取6周龄雌性健康C57BL/6J小鼠进行灌胃感染不同剂量的鼠衣原体,包括质粒完整衣原体、质粒缺... 详细信息

目的初步探索鼠衣原体质粒编码蛋白(pGP)维持鼠衣原体定植在消化道的作用,并分析具体参与鼠衣原体在消化道抵制胃酸杀伤作用的pGP种类。方法选取6周龄雌性健康C57BL/6J小鼠进行灌胃感染不同剂量的鼠衣原体,包括质粒完整衣原体、质粒缺乏衣原体、质粒缺陷衣原体(pGP3S-CM、pGP4S-CM、pGP5S-CM、pGP6S-CM、pGP7S-CM、pGP8d-CM)。于感染后第3、7、14、21、28、35、42、49、56、63天采集直肠拭子,感染后第3、7、14、21、28天取小鼠消化道不同部位组织(胃、十二指肠、空肠、回肠、结肠、盲肠),离心取上清液,将上清液接种于海拉细胞进行间接免疫荧光染色,荧光显微镜下计数衣原体包涵体,计算组织中鼠衣原体的感染数量。将pH值为1.0、2.0、2.5、3.0、3.5、4.0、4.5、5.0、5.5、6.0、6.5、7.0的模拟胃酸分别与质粒完整衣原体、pGP3S-CM和pGP4S-CM共同孵育10 min,计算经过不同pH值模拟胃酸杀伤后存活鼠衣原体的数量。统计学比较采用两独立样本t检验。结果采用剂量分别为1×103衣原体包涵体形成单位(IFUs)、1×10^(4) IFUs、1×10^(5) IFUs、1×10^(6) IFUs质粒完整衣原体灌胃小鼠后,感染第7至56天小鼠直肠拭子均可检测到质粒完整衣原体,而质粒缺乏衣原体仅在高剂量1×10^(5) IFUs和1×10^(6) IFUs灌胃小鼠感染后第14天、第7天的直肠拭子中分别被检测到,较质粒完整衣原体在消化道被检出时间明显延迟。采用1×10^(5) IFUs质粒完整衣原体灌胃小鼠感染后第3至21天的胃、十二指肠、空肠、回肠、盲肠、结肠、直肠组织中均可检测出衣原体,第28天后局限在盲肠、结肠、直肠,而质粒缺乏衣原体以相同剂量灌胃感染后仅在第14、21、28天的盲肠、结肠、直肠中被检出。pGP3S-CM与pH值为3.0、3.5、4.0、4.5模拟胃酸共同孵育后存活的鼠衣原体数量均低于质粒完整衣原体组,差异均有统计学意义(t=-0.79、-6.44、-6.99、-6.96,均P<0.05),而pGP3S-CM与pH值为5.0~7.0的模拟胃酸共同孵育后存活鼠衣原体数量与质粒完整衣原体组差异无统计学意义(均P>0.05)。结论鼠衣原体质粒可以促进鼠衣原体在消化道内不同部位组织相互作用,使衣原体存活并长期定植,质粒缺乏使鼠衣原体无法在胃和小肠中定植。其中pGP3、pGP4对于鼠衣原体在消化道定植起主要影响,pGP3参与鼠衣原体耐受胃酸杀伤保证鼠衣原体定植于消化道起关键作用。

关键词：胃酸衣原体消化道质粒编码蛋白

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