检索结果-内蒙古大学图书馆

复旦学报（医学版） 2007年第4期34卷 482-485页

作者：程钢陈永井马震宇费敏孙中文徐耀瑜胡玲玲邱玉华苏州大学医学生物技术研究所苏州215007 苏州大学生化工程研究所苏州215007

目的构建及瞬时表达抗人CD28鼠-人嵌合抗体。方法采用基因工程技术,从分泌鼠抗人CD28单克隆抗体的杂交瘤细胞株(克隆号:2F5)中克隆出抗体重链和轻链可变区基因及相应信号肽编码序列。分别与人免疫球蛋白IgG1恒定区重、轻链基因拼接,构... 详细信息

目的构建及瞬时表达抗人CD28鼠-人嵌合抗体。方法采用基因工程技术,从分泌鼠抗人CD28单克隆抗体的杂交瘤细胞株(克隆号:2F5)中克隆出抗体重链和轻链可变区基因及相应信号肽编码序列。分别与人免疫球蛋白IgG1恒定区重、轻链基因拼接,构建含有重组基因的pIRES表达质粒pIRES/h2F5。转染293T细胞并用抗性药物G418选择培养。采用流式细胞术,检测瞬时转染细胞后嵌合抗体的表达情况。结果抗人CD28鼠人嵌合抗体得到表达并能与CD28分子特异性结合。结论抗人CD28鼠-人嵌合抗体的构建和瞬时表达是成功的,为后续构建稳定分泌抗人CD28鼠-人嵌合抗体的CHO基因转染细胞株奠定了基础。

关键词： CD28 单克隆抗体嵌合抗体瞬时表达

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分批操作条件下超滤过程膜面积的确定与放大

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高校化学工程学报 1997年第2期11卷 131-135页

作者：刘昌胜邬行彦华东理工大学生化工程研究所

推导了在分批操作条件下确定膜面积的计算公式，利用小试实验结果，即可确定放大到中试以及生产规模所需膜面积。以红霉素发酵滤液为例，利用外压式中空纤维膜和内压式中空纤维膜进行超滤。在１０～２０Ｌ规模取得实验数据，拟合出通量... 详细信息

推导了在分批操作条件下确定膜面积的计算公式，利用小试实验结果，即可确定放大到中试以及生产规模所需膜面积。以红霉素发酵滤液为例，利用外压式中空纤维膜和内压式中空纤维膜进行超滤。在１０～２０Ｌ规模取得实验数据，拟合出通量预测模型参数，然后计算出日处理８０吨发酵滤液时在不同情况下所需的膜面积。本文还讨论了影响膜面积的因素，并在１００Ｌ规模实验验证了计算结果是正确的。

关键词：超滤分批操作膜面积放大中空纤维膜膜分离

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人4IgB7-H3-Fc融合蛋白的表达及其生物学活性的研究

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现代免疫学 2007年第2期27卷 109-114页

作者：马震宇周迎会陈永井费敏马珍妮王勤王雪峰马泓冰谢芳张学光苏州大学生化工程研究所苏州215007 苏州大学医学生物技术研究所

为获得人4IgB7-H3-Fc融合蛋白,研究其对T细胞的共刺激作用,采用PCR技术分别从pMD18-T/4IgB7-H3和pMD18-T/hIgG1(Fc)重组载体中扩增出人4IgB7-H3胞外段基因和人IgG1重链Fc恒定区基因,通过RT-PCR技术插入逆转录病毒载体pGEZ-Term,重组逆... 详细信息

为获得人4IgB7-H3-Fc融合蛋白,研究其对T细胞的共刺激作用,采用PCR技术分别从pMD18-T/4IgB7-H3和pMD18-T/hIgG1(Fc)重组载体中扩增出人4IgB7-H3胞外段基因和人IgG1重链Fc恒定区基因,通过RT-PCR技术插入逆转录病毒载体pGEZ-Term,重组逆转录病毒载体与两个辅助病毒载体经脂质体法共转染包装细胞293T,收集含有完整病毒颗粒的293T细胞的培养上清反复感染L929细胞,利用Zeocin筛选获得能稳定分泌4IgB7-H3-Fc融合蛋白的基因转染细胞。基因转染细胞经无血清培养后,收集的上清用Dot blot检测,超滤浓缩并经Protein G柱纯化,再用SDS-PAGE、Western blot鉴定。以4IgB7-H3-Fc蛋白检测活化T细胞表面未知受体的表达,通过MTT方法分析4IgB7-H3-Fc融合蛋白对T细胞的共刺激作用。结果显示,成功地构建了pEGZ-Term/4IgB7-H3-Fc重组逆转录病毒载体,经转染包装细胞293T后,筛选获得能稳定分泌4IgB7-H3-Fc蛋白的L929基因转染细胞株;纯化后的4IgB7-H3-Fc蛋白能够与活化T细胞表面结合,并对T细胞有显著的促增殖作用。为探讨人4IgB7-H3-Fc融合蛋白对T细胞的共刺激作用和寻找其未知受体奠定良好的物质基础。

关键词： 4IgB7-H3 RT-PCR基因转染融合蛋白共刺激

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应用大肠杆菌的核苷磷酸化酶合成胸苷

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华东理工大学学报（自然科学版） 1996年第6期22卷 701-706页

作者：沈荣坤邱蔚然孙南翔华东理工大学生化工程研究所

通过大肠杆菌（Ｅ．ｃｏｌｉ）核苷磷酸化酶的转脱氧核糖基作用，从胸腺嘧啶和２＇－脱氧核苷合成胸苷。优化了以ｄＵ为底物合成胸苷的反应条件。以３０ｍｍｏｌ／Ｌ　ｄＵ为底物其合成胸苷的转化率可达５５．３％；以ｄＡ、ｄＣ、ｄＵ... 详细信息

通过大肠杆菌（Ｅ．ｃｏｌｉ）核苷磷酸化酶的转脱氧核糖基作用，从胸腺嘧啶和２＇－脱氧核苷合成胸苷。优化了以ｄＵ为底物合成胸苷的反应条件。以３０ｍｍｏｌ／Ｌ　ｄＵ为底物其合成胸苷的转化率可达５５．３％；以ｄＡ、ｄＣ、ｄＵ、ｄＧ的混合物为底物转化率为５２．６％；以ＤＮＡ降解后的２＇－脱氧核苷混合液作底物，反应液中胸苷浓度从９．２ｍｍｏｌ／Ｌ提高到１７．９ｍｍｏｌ／Ｌ。

关键词：胸苷胸腺嘧啶核苷大肠杆菌核苷磷酸化酶酶法

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酸性水溶液中硫氰酸钼(V)配合物的研究

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光谱学与光谱分析 2003年第2期23卷 337-339页

作者：杨冬包永明安利佳大连理工大学生化工程研究所辽宁大连116012

研究了酸性水溶液中硫氰酸钼配合物(V)的吸收光谱，发现在460nm处有最大吸收，最大平均摩尔吸光系数为1．02×10^4。用平衡移动法确定其生成机理为一种三级分级配合反应，并用Ялимирский法确定了各级配合物的稳定常数分... 详细信息

研究了酸性水溶液中硫氰酸钼配合物(V)的吸收光谱，发现在460nm处有最大吸收，最大平均摩尔吸光系数为1．02×10^4。用平衡移动法确定其生成机理为一种三级分级配合反应，并用Ялимирский法确定了各级配合物的稳定常数分别为β1＝15．63，β2=174．4和β3＝1502，相应的摩尔吸光系数是Δεl＝8957，Δε2＝9347和Δε3＝10610。

关键词：酸性水溶液硫氰酸钼(V)配合物分级配位平衡移动法摩尔吸光系数稳定常数

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人类新型β3半乳糖基转移酶基因β3GalT7的克隆和鉴定

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生物化学与生物物理进展 2005年第2期32卷 140-146页

作者：周嘉梁黄超群吴士良孙其昌雷伟金美芳姜智沈宏杰苏州大学医学院基础医学系生物化学与分子生物学教研室苏州215007 苏州大学生化工程研究所苏州215007

从人肺cDNA文库中克隆到人类β3-半乳糖基转移酶家族中的一个新成员β3GalT7(AY277592,EC2.4.1.-),并对其进行了鉴定. 该基因定位在人类染色体19q13.2. 它包含一个1 191 bp的开放阅读框(ORF). 编码的蛋白质包括一个信号肽和一个半乳糖... 详细信息

从人肺cDNA文库中克隆到人类β3-半乳糖基转移酶家族中的一个新成员β3GalT7(AY277592,EC2.4.1.-),并对其进行了鉴定. 该基因定位在人类染色体19q13.2. 它包含一个1 191 bp的开放阅读框(ORF). 编码的蛋白质包括一个信号肽和一个半乳糖基转移酶结构域,分子质量和等电点分别为43.3 ku和8.37. 从原核表达中获得的融合蛋白的分子质量和预测相符. RNA印迹杂交显示β3GalT7在肺、喉和回肠组织中高表达,而在舌、乳房、子宫、睾丸等组织中表达较低. 此外半定量RT-PCR显示β3GalT7在人类不同的肿瘤细胞中转录水平有明显差异.

关键词： β3GalT7 克隆 RNA印迹肿瘤细胞株

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固定化青霉素酶反应器流动注射碘量法快速测定青霉素

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中国抗生素杂志 1994年第5期19卷 340-343页

作者：李青山岑军辉张嗣良李凡超俞俊棠华东理工大学生化工程研究所

整个测量系统由沈阳电影反光镜广制造的ＬＺ－１０００型组合式流动注射分析（ＦＩＡ）仪与固定化青霉素酶反应器组成。测定原理同碘量滴定测量青霉素，实验表明：线性范围在０．０６～０．７５ｍｍｏｌ／Ｌ（取样４０μｌ），线性相关... 详细信息

整个测量系统由沈阳电影反光镜广制造的ＬＺ－１０００型组合式流动注射分析（ＦＩＡ）仪与固定化青霉素酶反应器组成。测定原理同碘量滴定测量青霉素，实验表明：线性范围在０．０６～０．７５ｍｍｏｌ／Ｌ（取样４０μｌ），线性相关系数０．９９８。重现性：对０．１２、０．７５ｍｍｏｌ／Ｌ浓度的青霉素反复测定８次，平均值分别为０．６９０ｍｖ、３．８３８ｍｖ，标准差分别为０．００６６ｍｖ、０．０１６４ｍｖ，精密度分别０．８２％、０．３４％。测定条件影响：在青霉素浓度低于２·５ｍｍｏｌ／Ｌ时，磷酸盐浓度在０．０５～０．２５ｍｏｌ／Ｌ，ｐＨ在６．０～７．５，测定温度在８℃～３０℃对测定结果几乎没有影响。测定速率可达每小时１２０样。在室温（８～２０℃）下使用，每天测定４００样，使用３０天未见活力下降。４℃下保存近半年未见酶反应器活力下降。

关键词：流动注射分析青霉素青霉素酶碘量法

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链霉菌种间融合重组子产生的抗生素的分离和化学结构的确认

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中国抗生素杂志 1996年第1期21卷 1-4页

作者：徐京宁潘铁英王伟唐孝宣华东理工大学生化工程研究所

从金色链霉菌和林可链霉菌的原生质体融合重组子产生的代谢物中，分离到１个抗菌组份。其薄层层析的Ｒｆ值，碳、氢、氮、氯及硫元素含量，红外吸收光谱和核磁共振谱的信号分析，证实其化学结构与半合成抗生素克林霉素同质。

关键词：氯林可霉素抗菌组份融合子链霉菌化学结构

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膜通量衰减

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中国抗生素杂志 1997年第4期22卷 264-267页

作者：刘昌胜邬行彦林剑潘德维华东理工大学生化工程研究所

以红霉素发酵液为对象设计实验，考查内压式中空纤维的膜通量衰减现象。其衰减的主要原因是膜表面吸附蛋白质以及在膜表面形成浓差极化层。保留液浓度影响膜通量是间接的，其外在宏观表现为保留液浓度高、膜的处理量大和处理时间长都将... 详细信息

以红霉素发酵液为对象设计实验，考查内压式中空纤维的膜通量衰减现象。其衰减的主要原因是膜表面吸附蛋白质以及在膜表面形成浓差极化层。保留液浓度影响膜通量是间接的，其外在宏观表现为保留液浓度高、膜的处理量大和处理时间长都将加剧膜通量衰减。

关键词：膜通量衰减浓差极化红霉素发酵液

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茯苓多糖对受照射白血病K562细胞N-乙酰氨基半乳糖转移酶-9和自由基等的影响

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中国中西医结合杂志 2005年第S1期25卷 94-96页

作者：刘可人杨雪枫吴士良范雁徐爱华苏州大学医学院生化与分子生物学教研室苏州大学生化工程研究所苏州215007

目的用化学方法提取茯苓多糖,并观察其对肿瘤细胞的作用。方法利用乙酸沉淀法、DEAE-纤维素层析法提取并分离茯苓多糖,并运用RT-PCR方法和流式细胞技术,检测其对受照射后肿瘤细胞的多肽：N-乙酰氨基半乳糖转移酶-9(ppGalNAc-T9)mRNA表... 详细信息

目的用化学方法提取茯苓多糖,并观察其对肿瘤细胞的作用。方法利用乙酸沉淀法、DEAE-纤维素层析法提取并分离茯苓多糖,并运用RT-PCR方法和流式细胞技术,检测其对受照射后肿瘤细胞的多肽：N-乙酰氨基半乳糖转移酶-9(ppGalNAc-T9)mRNA表达、自由基活力以及细胞周期的影响。结果茯苓多糖可使经γ射线照射后的K562细胞中的自由基增多、ppFalNAc-T9表达增高、G_1期受阻明显。结论茯苓多糖对肿瘤细胞中自由基具有一定的清除作用,同时还可以增加ppGalNAc-T9在mRNA水平的表达。

关键词：茯苓多糖肿瘤 RT-PCR 多肽 N-乙酰氨基半乳糖转移酶自由基细胞周期

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