检索结果-内蒙古大学图书馆

中华血液学杂志 2011年第3期32卷 208-211页

作者：唐晓文吴德沛苏州大学附属第一医院血液科、江苏省血液研究所卫生部血栓与止血重点实验室

最新的WHO分类中，间变大细胞淋巴瘤（anaplastic large cell lymphoma，ALCL）被归类于外周T细胞淋巴瘤，约占非霍奇金淋巴瘤（NHL）诊断病例的2％～7％。1985年Stein等首次描述了这一表达CD30（Ki-1）、以多形性大细胞增殖为特征的淋... 详细信息

最新的WHO分类中，间变大细胞淋巴瘤（anaplastic large cell lymphoma，ALCL）被归类于外周T细胞淋巴瘤，约占非霍奇金淋巴瘤（NHL）诊断病例的2％～7％。1985年Stein等首次描述了这一表达CD30（Ki-1）、以多形性大细胞增殖为特征的淋巴瘤，命名为ALCL。

关键词：间变大细胞淋巴瘤诊断病例 ALK lymphoma 外周T细胞淋巴瘤多形性大细胞增殖非霍奇金淋巴瘤治疗

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蛋白激酶C与钙离子在凝血酶受体活化过程中的作用

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中华血液学杂志 2008年第3期29卷 154-157页

作者：韩悦王兆钺谢颖张威戴兰沈文红吴德沛阮长耿苏州大学附属第一医院、江苏省血液研究所、卫生部血栓与止血重点实验室 215006

目的比较两类凝血酶受体活化过程中蛋白激酶C（PKC）与钙离子（Ca^2＋）对血小板聚集率以及血小板膜表面活化标志物糖蛋白（GP）Ⅰb表达的影响，探讨G蛋白q（Gq）信号途径在凝血酶受体活化过程中的作用。方法分别以凝血酶受体活化肽PAR1... 详细信息

目的比较两类凝血酶受体活化过程中蛋白激酶C（PKC）与钙离子（Ca^2＋）对血小板聚集率以及血小板膜表面活化标志物糖蛋白（GP）Ⅰb表达的影响，探讨G蛋白q（Gq）信号途径在凝血酶受体活化过程中的作用。方法分别以凝血酶受体活化肽PAR1-AP（SFLLRN）与PAR4-AP（AYPGKF）模拟各自的固定配基活化血小板。观测PKC选择性抑制剂Ro-31-2220与胞内Ca^2＋螯合剂（BAPTA／AM）作用过程中血小板聚集与血小板膜表面GPⅠb的改变。结果两类凝血酶受体活化肽均能诱导血小板活化，产生完全的聚集波，血小板膜GPⅠb则呈现进行性减少后逐渐回升的可逆性变化。BAPTA与Ro-31-2220预处理后蛋白激酶活化受体（PAR）肽诱导的血小板聚集被抑制，但形态变化依然存在。Ro-31-2220明显抑制PAR1-AP引起的GPⅠbα内陷[1min时为（87．0±0．04）％，2min时为（73．00±0．08）％，P〈0．05]；PAR4-AP可以延长GPⅠbα在胞内的逗留，减缓其返回血小板表面的进程[10min时为（44．00±0．01）％，30min时为（46．00±0．05）％，P〈0．05]。BAPTA则能明显抑制两类PAR肽引起的GPⅠbα内陷[1min时分别为（94．00±0．08）％和（95．00±0）％，2min时分别为（92．00±0．02）％和（94．00±0．01）％，5min时分别为（91．00±0．02）％和（91．00±0．02）％，10min时分别为（90．00±0．04）％和（87．00±0．03）％，各时间点之间比较P值均〈0．05]。结论PKC与Ca^2＋在凝血酶受体活化中发挥重要作用。Ca^2＋与凝血酶受体活化过程密切相关，对两类受体作用相似。PKC在PAR1途径促使GPIb内陷，在PAR4途径则加速GPⅠb重返膜表面。

关键词：血小板受体,凝血酶糖蛋白Ⅰb 蛋白激酶C 钙

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A1500E突变对血管性血友病因子的ADAMTS13依赖性水解的影响

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中华血液学杂志 2012年第3期33卷 169-172页

作者：张敬宇苏健马珍妮董宁征王迎春阮长耿苏州大学附属第一医院、江苏省血液研究所、卫生部血栓与止血重点实验室 215006

目的研究血管性血友病因子（VWF）A1500E突变体对金属蛋白酶ADAMTS13敏感性的改变，为VWF—A1500E突变导致2A型血管性血友病（VWD）的发病机制提供直接依据。方法将野生型VWF质粒和A1500E突变体VWF质粒分别瞬时转染HeLa细胞，收集并浓... 详细信息

目的研究血管性血友病因子（VWF）A1500E突变体对金属蛋白酶ADAMTS13敏感性的改变，为VWF—A1500E突变导致2A型血管性血友病（VWD）的发病机制提供直接依据。方法将野生型VWF质粒和A1500E突变体VWF质粒分别瞬时转染HeLa细胞，收集并浓缩培养上清，分别用重组人ADAMTS13（rADAMTS13）进行水解，然后通过十二烷基硫酸钠-琼脂糖凝胶电泳进行VWF多聚体分析，观察与野生型VWF相比，A1500E突变体VWF对ADAMTS13的敏感性有无改变。结果体外表达研究结果显示WT—VWF和A1500E突变体VWF的表达上清中VWF：舷的平均含量分别为1．10U／ml和0．78U／ml，突变体细胞裂解液中的VWF：Ag表达量为野生型的90．6％，两者差异均无统计学意义（P〉0．05）。VWF多聚体电泳显示突变体VWF与WT—VWF的多聚体分布亦无明显差别。在无尿素和盐酸胍等变性剂的静态条件下，rADAMTS13即可对A1500E突变体VWF进行有效地水解，VWF多聚体分析显示大中分子量VWF多聚体明显减少和小分子量VWF多聚体明显增多；相反，野生型VWF在非变性条件下则无被rADAMTS13水解的证据。结论A1500E突变导致突变体VWF对ADAMTS13的敏感性异常性增高，符合第二组2A型VWD的突变特点。

关键词：血管性血友病因子突变血管性血友病 2A型血管性血友病因子裂解酶

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伊马替尼治疗Ph^＋急性淋巴细胞白血病的临床研究

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中华血液学杂志 2010年第3期31卷 181-185页

作者：李彩霞吴德沛刘红刘跃均马骁吴小津陈晓晨孙道萍苏州大学附属第一医院、江苏省血液研究所卫生部血栓与止血重点实验室215006

目的探讨伊马替尼联合化疗和异基因造血干细胞移植（allo—HSCT）治疗Ph^＋急性淋巴细胞白血病（Ph^＋-ALL）的疗效及转归。方法总结我院2006年1月至2009年3月的初诊Ph^＋-ALL患者30例。诱导化疗均采用CDOLP方案，其中16例化疗不敏感者... 详细信息

目的探讨伊马替尼联合化疗和异基因造血干细胞移植（allo—HSCT）治疗Ph^＋急性淋巴细胞白血病（Ph^＋-ALL）的疗效及转归。方法总结我院2006年1月至2009年3月的初诊Ph^＋-ALL患者30例。诱导化疗均采用CDOLP方案，其中16例化疗不敏感者联合伊马替尼治疗。11例进行allo—HSCT，19例采用大剂量的阿糖胞苷、甲氨蝶呤、环磷酰胺巩固治疗。维持化疗采用VP方案联合伊马替尼。结果30例患者中17例WBC〉30×10^9／L；29例细胞免疫学标记为B系表达；1例为T系表达；24例伴附加染色体异常。诱导化疗总完全缓解（CR）率96．7％，中位CR时间9（2～20）个月。1年和3年总体生存（OS）率分别为（64．7±9．8）％和（30．0±12．4）％；1年和3年无事件生存（EFS）率分别为（28．8±9．5）％和（19．2±10．1）％。30例中13例bcr—abl融合基因持续转阴，持续bcr—abl阴性者较持续阳性及复发者OS率高（70．7％对61．3％，P=0．267）、EFS率高（61．7％对17．3％，P=0．01）。移植与化疗患者中位生存时间分别为18（5～36）个月和14（4～22）个月；移植组比化疗组OS率高（71．6％对58．8％，P=0．189）、EFS率高（36．4％对21．8％，P=0．045）。高白细胞组患者和非高白细胞组患者中位生存时间分别为10（4～18）个月和29（5～36）个月。高白细胞组比非高白细胞组OS率低（46．9％对83．1％，P=0．003）、EFS率低（15．5％对50．8％，P=0．009）。结论伊马替尼能够显著提高Ph^＋-ALL患者的CR率和bcr—abl融合基因的转阴率，延长非移植患者的缓解期。伊马替尼联合allo—HSCT有望提高Ph^＋-ALL患者的治愈率。

关键词：白血病,淋巴细胞,急性费城染色体伊马替尼化疗造血干细胞移植

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角质细胞生长因子在白血病小鼠异基因脐带血移植中的作用

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中华医学杂志 2011年第40期91卷 2863-2867页

作者：陈广华王易乔淑敏冯宇锋朱子玲吴德沛苏州大学附属第一医院江苏省血液研究所卫生部血栓与止血重点实验室 215006

目的探讨角质细胞生长因子（KGF）在白血病小鼠异基因脐带血移植（UCBT）中的作用及机制。方法C57BL/6胎鼠外周血作为脐带血移植物。BALB／c小鼠随机数字表法分为7组，每组12只。对照1组：单纯接种白血病；对照2组：全身辐射（TBI）前第... 详细信息

目的探讨角质细胞生长因子（KGF）在白血病小鼠异基因脐带血移植（UCBT）中的作用及机制。方法C57BL/6胎鼠外周血作为脐带血移植物。BALB／c小鼠随机数字表法分为7组，每组12只。对照1组：单纯接种白血病；对照2组：全身辐射（TBI）前第4天（-4d）接种白血病，单纯TBI处理；对照3组：不接种白血病，TBI处理后输注2×10^6个脐带血总有核细胞数（TNC）；对照4组：不接种白血病，自TBI-3d起每日皮下注射磷酸盐缓冲液（PBS）连用7d，TBI后输注脐带血TNC，移植后第8天（＋8d）予输血小板支持；对照5组：TBI-4d接种白血病，自TBI-3d起每日皮下注射PBS连用7d，TBI后输注2×10^6个脐带血TNC，移植＋8d予输血小板支持；实验1组：不接种白血病，自TBI-3d起每日皮下注射KGF1mg／kg连用7d，TBI后输注脐带血TNC，移植＋8d予输血小板支持；实验2组：接种白血病，自移植-3d起每日皮下注射KGF1mg／kg连用7d，TBI后输注脐带血TNC，移植＋8d予输血小板支持。以生存期、病理组织学变化、脾脏淋巴细胞亚群、胸腺输出功能为观察指标并作组间比较。结果对照1组，12只小鼠全部死于白血病，小鼠生存时间为（11．1±1．5）d；对照2组，小鼠单纯TBI处理后12只全部死于造血衰竭，生存时间为（11．5±2．5）d；对照3组，5只（5／12）小鼠生存期超过100d，7只小鼠20d内死于内脏出血；对照5组，白血病小鼠脐带血移植后4只（4／12）生存期超过100d；实验2组，白血病小鼠9只（9／12）生存期超过100d。实验2组与对照5组白血病小鼠生存时间比较差异有统计学意义（Log-rank检验，χ^2=4．996，P=0．0254）。移植后对照4组小鼠脾脏T、NK和B细胞数分别为（9．32±0．48）×10^6、（1．59±0．11）×10^6、（18．74±2．01）×10^6个；实验1组小鼠脾脏T、NK和B细胞数分别为（13．20±1．14）×10^6、（1．75±0．12）×10^6、（20．36±0．86）×10^6个，实验1组T细胞、NK细胞数均高于对照4组（均P〈0．05）。实验1组信号结合T细胞受体删除DNA环（sjTREC）水平明显高于对照4组[（228±24）拷贝／10^5脾细胞比（167±17）拷贝／10^5脾细胞，P=0．002]。结论足月胎鼠外周血富含造血干祖细胞。KGF输注减少小鼠异基因脐带血移植后白血病复发，其机制为促进胸腺输出功能恢复。

关键词：脐血干细胞移植白血病小鼠近交C57BL 角质细胞生长因子免疫重建

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单中心162例血管性血友病患者的临床分析

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中华血液学杂志 2014年第2期35卷 152-156页

作者：欧阳皖雁余自强殷杰赵小娟王兆钺张威马珍妮苏健白霞阮长耿苏州大学附属第一医院、江苏省血液研究所卫生部血栓与止血重点实验室215006

目的总结国内单中心血管性血友病（VWD）的临床特征和诊治现状。方法回顾性分析162例VWD患者的临床资料和实验室检查结果。结果162例患者中男76例[中位年龄7．2（2．0-41．0）岁]、女86例[中位年龄20．7（5．0-48．0）岁]。1型VWD患者8... 详细信息

目的总结国内单中心血管性血友病（VWD）的临床特征和诊治现状。方法回顾性分析162例VWD患者的临床资料和实验室检查结果。结果162例患者中男76例[中位年龄7．2（2．0-41．0）岁]、女86例[中位年龄20．7（5．0-48．0）岁]。1型VWD患者86例（53．1％），2型42例（25．9％，其中2A型33例、2M型4例、2N型5例），3型34例（21．0％）。87例（53．7％）患者有明确出血性疾病家族史。出血表现以皮肤瘀斑（61．7％）、鼻出血（53．7％）、手术或外伤后出血不止（53．1％）为主，月经量多为女性患者常见主诉（66．3％）。56例（34．6％）患者Vieenza出血评分为异常出血。45例（27．8％）患者接受血制品替代治疗，8例患者接受1．去氨基．8．右旋．精氨酸血管加压素治疗。57例月经量多的女性患者中，8例联合孕激素控制出血，2例行子宫切除术。结论VWD临床表现异质性较高，应分步进行确诊及分型检查并实施个体化治疗。

关键词：血管性血友病血管性血友病因子临床研究

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T淋巴细胞内mTOR／S6途径在难治／复发再生障碍性贫血发病机制中的作用

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中华血液学杂志 2009年第10期30卷 654-657页

作者：张翔何广胜吴德沛孙爱宁苗瞄王秀丽金正明仇惠英常伟荣苏州大学附属第一医院、江苏省血液研究所卫生部血栓与止血重点实验室215006

目的研究难治／复发再生障碍性贫血（AA）患者骨髓T淋巴细胞内雷帕霉素靶蛋白（mTOR）／核糖体蛋白S6途径活化情况，以及mTOR抑制剂雷帕霉素（RAPA）和CD28抗原阻断剂CTLA4免疫球蛋白（CTLA4Ig）对此途径的影响。方法采集13例难治／复... 详细信息

目的研究难治／复发再生障碍性贫血（AA）患者骨髓T淋巴细胞内雷帕霉素靶蛋白（mTOR）／核糖体蛋白S6途径活化情况，以及mTOR抑制剂雷帕霉素（RAPA）和CD28抗原阻断剂CTLA4免疫球蛋白（CTLA4Ig）对此途径的影响。方法采集13例难治／复发AA、8例初治重型AA（SAA）以及10例缺铁性贫血（IDA）患者（对照组）的骨髓标本，加入RAPA和CTLA4Ig进行孵育，用流式细胞术检测加药前后每组患者CD3＋T淋巴细胞胞质内磷酸化mTOR（p-roTOR）、磷酸化S6（P—S6）和干扰素γ（IFN-γ）的表达水平，并分析其与疾病的关系。结果①难治／复发AA组患者骨髓CD3＋T细胞胞内p-mTOR、p-S6及IFN-γ的表达水平较对照组显著升高（P值均〈0．01）。②初治SAA患者p-mTOR和p-S6的表达水平低于难治／复发AA组（P值均〈0．01），而与对照组比较差异无统计学意义（P值均〉0．05）；初治组IFN-γ的表达水平明显高于对照组（P值均〈0．01）。（3）RAPA和CTLA-4Ig作用后，难治／复发AA患者p-mTOR、p-S6及IFN-γ的表达水平较用药前明显下降（P值均〈0．01）。结论CD3＋T淋巴细胞内mTOR／S6途径在难治／复发AA患者中活化。RAPA和CTLA-4Ig均可抑制难治／复发AA患者体内roTOR／S6途径，并下调IFN-γ。CD28／mTOR／S6和IFN-γ途径参与难治／复发AA的免疫发病机制，并且对RAPA和CTLA4Ig敏感，以CD28、mTOR为治疗靶点，临床应用RAPA和CTLA-4Ig治疗此类AA患者值得探索。

关键词：贫血再生障碍性 T淋巴细胞抗原 CD28 雷帕霉素靶蛋白核糖体蛋白质 S6 干扰素γ CTLA-4免疫球蛋白

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尿BK病毒载量与干细胞移植后出血性膀胱炎的关系

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中华血液学杂志 2009年第8期30卷 524-527页

作者：谢颖韩悦吴德沛孙爱宁岑建农姚利阮长耿苏州大学附属第一医院血液科、江苏省血液研究所卫生部血栓与止血重点实验室

目的分析BK病毒尿与造血干细胞移植（HSCT）术后迟发性出血性膀胱炎（LOHC）的相关性，探讨BK病毒载量与LOHC发病的关系。方法收集2006年8月至2008年4月113例HSCT患者的晨尿标本，提取病毒DNA，用PCR方法扩增多瘤病毒DNA，以40名健康成... 详细信息

目的分析BK病毒尿与造血干细胞移植（HSCT）术后迟发性出血性膀胱炎（LOHC）的相关性，探讨BK病毒载量与LOHC发病的关系。方法收集2006年8月至2008年4月113例HSCT患者的晨尿标本，提取病毒DNA，用PCR方法扩增多瘤病毒DNA，以40名健康成人为对照。用实时定量PCR方法检测尿BK病毒阳性患者在LOHC不同时期的尿标本中BK病毒DNA拷贝数。结果113例HSCT患者中22例（19．5％）发生HC，中位发生时间为＋44（＋13～＋114）d，包括1级7例，2级11例，3级3例，4级1例。其中21例（95．5％）LOHC患者尿标本经PCR检出BK病毒，检出率明显高于非LOHC组（31．9％）（P=0．000）。健康对照组均未检出BK病毒。定量PCR检测结果显示，LOHC患者尿BK病毒DNA拷贝数在HC发病前1周的平均水平较初次阳性时有明显上升（10^3拷贝数／μl比10^4拷贝数／μl），在HC发病当周及缓解后1周无明显改变。不同级别LOHC患者在发病前和发病时尿BK病毒DNA拷贝数差异无统计学意义。非LOHC患者尿中BK病毒DNA拷贝数平均水平为10^3～10^4拷贝数／μl，低于LOHC患者。结论BK病毒尿是HSCT后LOHC的重要致病原因。如HSCT患者尿中BK病毒DNA拷贝数呈动态上升并超过10^5拷贝数／μl时可能预示LOHC的发生。

关键词： BK多瘤病毒膀胱炎出血性造血干细胞移植

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重组人平足蛋白基因在中国仓鼠卵巢细胞的稳定表达

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细胞与分子免疫学杂志 2016年第1期32卷 25-28,33页

作者：曲乐赵星鹏傅建新夏利军戴兰阮长耿赵益明苏州大学附属第一医院江苏省血液研究所卫生部血栓与止血重点实验室江苏苏州215006

目的构建平足蛋白(PDPN)真核表达质粒PDPN-pEGFP-N1,建立稳定高表达重组人PDPN的中国仓鼠卵巢(CHO)细胞株并对其进行生物学活性研究。方法通过反转录PCR和DNA重组技术从HEK293细胞中克隆PDPN cDNA,插入带有增强型绿色荧光蛋白(EGFP)标... 详细信息

目的构建平足蛋白(PDPN)真核表达质粒PDPN-pEGFP-N1,建立稳定高表达重组人PDPN的中国仓鼠卵巢(CHO)细胞株并对其进行生物学活性研究。方法通过反转录PCR和DNA重组技术从HEK293细胞中克隆PDPN cDNA,插入带有增强型绿色荧光蛋白(EGFP)标记的真核表达载体pEGFP-N1中。通过PCR、酶切及测序等方法鉴定重组载体;进而将该重组载体转染至CHO细胞中,通过荧光显微镜检测EGFP的表达,Western blot法检测PDPN在CHO细胞中的表达,流式细胞术分选高表达PDPN的CHO细胞,运用血小板聚集实验检测分选后细胞株的生物学活性。结果 DNA测序和酶切鉴定证明PDPN基因正确克隆至pEGFP-N1载体中,重组载体稳定转染CHO细胞后,在荧光显微镜下观察到绿色荧光,流式细胞术分选后的细胞高表达PDPN;Western blot结果显示转染后CHO细胞膜表面表达PDPN蛋白;过表达PDPN的CHO细胞可以诱导人血小板聚集。结论成功构建了稳定高表达PDPN蛋白的CHO细胞株,该细胞株可表达PDPN,并诱导血小板聚集。

关键词：平足蛋白真核表达 pEGFP-N1 CHO细胞血小板聚集

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中国人群耐药Ph阳性急性淋巴细胞白血病高比例ABL激酶区G∶C→A∶T突变和尿嘧啶-N-糖基化酶异常表达研究

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中国实验血液学杂志 2014年第4期22卷 889-893页

作者：沈宏杰陈子兴何军岑建农邱桥成丁子轩姚利陈艳陈苏宁薛永权苏州大学附属第一医院江苏省血液研究所、卫生部血栓与止血重点实验室江苏苏州215006

大多数费城染色体阳性急性淋巴细胞白血病(Ph+ALL)患者在使用酪氨酸激酶抑制剂(TKI)治疗后常表现为复发时间短及易出现ABL激酶区突变现象。为进一步研究Ph+ALL患者使用TKI治疗后易复发特点,本研究采用直接测序法检测了35例TKI耐药Ph+AL... 详细信息

大多数费城染色体阳性急性淋巴细胞白血病(Ph+ALL)患者在使用酪氨酸激酶抑制剂(TKI)治疗后常表现为复发时间短及易出现ABL激酶区突变现象。为进一步研究Ph+ALL患者使用TKI治疗后易复发特点,本研究采用直接测序法检测了35例TKI耐药Ph+ALL患者ABL激酶区突变。结果发现,77.1%(27/35)患者存在ABL激酶区突变,其中T315I突变患者占ABL激酶区突变患者55.6%,特别是首次发现G:C→A:T突变Ph+ALL患者占总ABL激酶区突变Ph+ALL患者77.8%(21/27),包括T315I、E255K和E459K。其次,8例具有两种或两种以上ABL激酶区突变Ph+ALL患者染色体均为复杂核型,5例染色体由初诊单纯t(9;22)进展为复杂核型的TKI耐药Ph+ALL均出现ABL激酶区突变;并且,尿嘧啶-N-糖基化酶2(UNG2)在耐药Ph+ALL组中转录水平表达显著低于初诊组,具有统计学差异(P<0.05),而细胞核内UNG2缺失能增加G:C→A:T突变几率。结论:中国人群TKI耐药Ph+ALL具有高比例ABL激酶区G:C→A:T突变和高度基因组不稳定性。耐药Ph+ALL患者低表达UNG2可能是耐药Ph+ALL患者发生高比例ABL激酶区G:C→A:T突变的因素之一。

关键词：中国人群急性淋巴细胞白血病 ABL激酶区 DNA突变分析尿嘧啶-N-糖基化酶

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