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生命的化学 2021年第12期41卷 2686-2694页

作者：李敏英王楚彤袁美丽李柏青许涛汪洪涛蚌埠医学院慢性疾病免疫学基础与临床安徽省重点实验室蚌埠233030 蚌埠医学院免疫学教研室蚌埠233030 蚌埠医学院临床检验诊断学教研室蚌埠233030

从NCBI中获得PPE7蛋白的编码基因序列,设计引物从H37Rv基因组中克隆出Rv0354c基因,将其转化到大肠杆菌感受态细胞DH5α中,扩大培养后测序鉴定。同时,运用ORF Finder、BLAST、Protparam、ProtScaleon Expasy、TMHMM Server v.2.0、SignalP4.1 Server、NetPhos3.1 Server、NetAcet1.0 Server、NetNGlyc1.0 Server、SOPMA、SWISS-MODEL、ABCpred、STRING等生物信息学分析工具对PPE7蛋白可能的相关生物学信息进行预测。结果显示,Rv0354c基因成功扩增,测序正确。基因全长426 bp,有2个开放阅读框,其编码蛋白为PPE7,由141个氨基酸组成,等电点为5.45,为疏水性蛋白,跨膜氨基酸数为0.59727,无信号肽、乙酰化位点和N-糖基化位点,有14个磷酸化位点;并且PPE7具有潜在的T、B细胞表位,与多种蛋白质存在相互作用关系,可能为抗结核疫苗的研发提供重要参考。

关键词： PPE7蛋白结核分枝杆菌 Rv0354c 生物信息学分析

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左旋棉酚通过下调X连锁凋亡抑制蛋白增强表柔比星抑制肝细胞癌的体外作用

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陆军军医大学学报 2022年第16期44卷 1599-1605页

作者：蒋文斌孙梁博杜烨湘肖云华黎伯胜闫小晶吴亚冉连继勤何凤田陆军军医大学(第三军医大学)基础医学院生物化学与分子生物学教研室重庆400038 陆军军医大学(第三军医大学)药学与检验医学系临床生物化学教研室重庆400038 陆军军医大学(第三军医大学)第一附属医院核医学科重庆400038

目的探讨左旋棉酚增强表柔比星杀伤肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)细胞的作用及可能机制。方法将HCC细胞(Hep3B及HuH7)分为溶剂对照组、左旋棉酚处理组、表柔比星处理组、联合用药组、对照siRNA+表柔比星组、沉默X连锁凋亡抑... 详细信息

目的探讨左旋棉酚增强表柔比星杀伤肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)细胞的作用及可能机制。方法将HCC细胞(Hep3B及HuH7)分为溶剂对照组、左旋棉酚处理组、表柔比星处理组、联合用药组、对照siRNA+表柔比星组、沉默X连锁凋亡抑制蛋白(X-linked inhibitor of apoptosis protein,XIAP)+表柔比星处理组、对照质粒+联合用药组、过表达XIAP+联合用药组,采用CCK-8方法检测各组细胞存活情况;流式细胞术检测各组细胞凋亡情况;Western blot检测剪切型聚(腺苷二磷酸-核糖)聚合酶[cleaved poly(ADP-ribose)polymerase,Cle-PARP]水平、XIAP水平及真核起始因子4E(eukaryotic initiation factor 4E,eIF4E)磷酸化水平。结果与溶剂对照相比,低浓度的左旋棉酚(5μmol/L)单独处理对HCC细胞存活无明显抑制作用(P>0.05),而将左旋棉酚与表柔比星联合使用后可显著增强表柔比星对HCC细胞的杀伤(P<0.05)、促进HCC细胞的凋亡及对剪切型PARP的诱导,同时还能抑制表柔比星诱导的XIAP上调及eIF4E磷酸化。此外,表柔比星抑制HCC细胞存活及升高剪切型PARP的能力能被沉默XIAP所增强,而被过表达XIAP所抑制。结论左旋棉酚可增强表柔比星抑制HCC细胞存活促进细胞凋亡的能力,其机制可能与抑制XIAP上调和eIF4E磷酸化有关,提示左旋棉酚可作为表柔比星治疗HCC的潜在增敏剂。

关键词：表柔比星左旋棉酚肝细胞癌 X连锁凋亡抑制蛋白真核起始因子4E

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nanos1基因在日本血吸虫不同发育时期的定位

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安徽医科大学学报 2020年第2期55卷 215-221页

作者：华梦晴邵延靖刘淼沈际佳蚌埠医学院检验医学院免疫学教研室安徽省感染与免疫重点实验室蚌埠233030 安徽医科大学基础医学院寄生虫学教研室合肥230032

目的探讨nanos1基因在日本血吸虫的定位以及不同发育时期的表达情况。方法在NCBI上搜索日本血吸虫nanos1基因,PCR扩增、测序并将其全长序列经BLAST软件分析,利用DNAMAN6.0和ClustalX2.0.9进行多重序列比对,利用MAGA 5.05构建进化树进行... 详细信息

目的探讨nanos1基因在日本血吸虫的定位以及不同发育时期的表达情况。方法在NCBI上搜索日本血吸虫nanos1基因,PCR扩增、测序并将其全长序列经BLAST软件分析,利用DNAMAN6.0和ClustalX2.0.9进行多重序列比对,利用MAGA 5.05构建进化树进行系统进化分析。体外转录地高辛(DIG)标记的RNA探针,并将其用于日本血吸虫感染后第18、24和42天3个发育时期的雌雄虫整体原位杂交,以确定nanos1基因在日本血吸虫的定位。结果PCR扩增获得日本血吸虫nanos1基因,生物信息学分析结果表明其编码的蛋白与曼氏血吸虫nanos2蛋白同源性最高。体外转录成功的RNA探针用于日本血吸虫整体原位杂交,在感染后第24、42天雌虫的卵巢和卵黄腺以及18天雌虫的卵巢检测到阳性杂交信号,而各个发育阶段的雄虫均未观察到明显阳性杂交信号。结论日本血吸虫nanos1基因高表达于感染后第18天雌虫的卵巢以及第24、42天雌虫的卵巢和卵黄腺。该研究初步揭示了日本血吸虫nanos1基因的表达模式,为研究nanos1基因的功能提供了重要线索。

关键词：日本血吸虫 nanos1 进化分析整体原位杂交

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SCD1对甲状腺乳头状癌细胞增殖和侵袭的影响及其机制研究

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海南医学院学报 2021年第15期27卷 1149-1155页

作者：王玥李强任欣欣孙玉华刘国权蚌埠医学院检验系生物化学与分子生物学教研室安徽蚌埠233030 蚌埠医学院安徽省癌症转化医学重点实验室安徽蚌埠233030 蚌埠医学院生命科学院细胞生物学系安徽蚌埠233030

目的:探讨硬脂酰辅酶A去饱和酶1(stearoyl-CoA desaturase 1,SCD1)对甲状腺乳头状癌(papillary thyroid cancer,PTC)细胞TPC1增殖、迁移及侵袭的影响。方法:采用Western blot方法检测人甲状腺滤泡上皮正常细胞Nthy-ori 3-1和甲状腺乳头... 详细信息

目的:探讨硬脂酰辅酶A去饱和酶1(stearoyl-CoA desaturase 1,SCD1)对甲状腺乳头状癌(papillary thyroid cancer,PTC)细胞TPC1增殖、迁移及侵袭的影响。方法:采用Western blot方法检测人甲状腺滤泡上皮正常细胞Nthy-ori 3-1和甲状腺乳头状癌细胞株TPC1、BCPAP和K1中SCD1的表达量。将阴性对照和SCD1 siRNA转染人甲状腺乳头状癌细胞TPC1,采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)及Western blot实验检测各组细胞中SCD1 mRNA及蛋白的表达水平;并通过CCK-8法和Transwell小室实验分别检测干扰SCD1对TPC1细胞增殖、迁移及侵袭的影响,同时通过qRT-PCR和Western blot实验检测各组细胞中上皮-间质转化(epithelial mesenchymal transition,EMT)相关蛋白:神经钙黏蛋白(N-cadherin)、Snail、波形蛋白(vimentin)和上皮钙黏蛋白(E-cadherin)的表达水平。结果:SCD1在TPC1中的表达水平明显高于Nthy-ori 3-1、BCPAP和K1(P<0.05);与空白对照组(Control)和对照干扰组(si-NC)相比,干扰SCD1组(si-SCD1)SCD1的mRNA和蛋白表达水平显著降低(P<0.05);干扰SCD1后TPC1细胞的增殖、迁移和侵袭明显被抑制(P<0.05);同时,干扰SCD1增加E-cadherin蛋白的表达,但抑制vimentin、Snail和N-cadherin蛋白的表达(P<0.05)。结论:干扰SCD1可通过抑制细胞的EMT抑制甲状腺乳头状癌细胞TPC1的增殖、迁移及侵袭能力。

关键词：甲状腺乳头状癌 SCD1 增殖侵袭上皮间质转化

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1.25（OH）2D3对实验性自身免疫性神经炎的治疗作用研究

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赣南医学院学报 2020年第1期40卷 7-13页

作者：年娣李卓含孙俊杰时鹏蚌埠医学院检验医学系核医学教研室蚌埠医学院第一附属医院神经内科安徽蚌埠233000

目的:探讨1.25(OH)2D 3对实验性自身免疫性神经炎(Experimental autoimmune neuritis,EAN)的治疗作用。方法:采用人工合成P0180-199肽段与完全弗氏佐剂混合免疫Lewis大鼠建立EAN模型,采用1.25(OH)2D 3灌胃处理,测大鼠体重,观察发病情况... 详细信息

目的:探讨1.25(OH)2D 3对实验性自身免疫性神经炎(Experimental autoimmune neuritis,EAN)的治疗作用。方法:采用人工合成P0180-199肽段与完全弗氏佐剂混合免疫Lewis大鼠建立EAN模型,采用1.25(OH)2D 3灌胃处理,测大鼠体重,观察发病情况并进行行为学评分,HE染色观察坐骨神经炎细胞浸润情况,电镜检测坐骨神经脱髓鞘改变。RT-PCR和ELISA法检测大鼠白介素17(IL-17)、白介素10(IL-10)、转化生长因子-β(TGF-β)、干扰素(IFN-γ)RORrt、FoxP3的表达变化。结果:1.25(OH)2D 3干预可减轻EAN大鼠体重丢失情况、降低行为学评分,减少坐骨神经炎细胞浸润和减轻脱髓鞘,IL-17、IFN-γ、RORrt表达降低、IL-10、TGF-β和FoxP3表达增加。结论:1.25(OH)2D 3可改善EAN大鼠临床症状,机制可能与影响T细胞的数量和功能进而抑制促炎性因子表达有关,有望为格林巴利综合征的治疗提供新策略。

关键词：实验性自身免疫性神经炎 1.25(OH)2D 3 炎症相关因子 T淋巴细胞

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SPOC教学模式在生物化学教学中的应用

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科教导刊 2020年第30期 141-143页

作者：黄桦孙钰武文娟郭俣夏俊蚌埠医学院检验医学院生物化学与分子生物学教研室安徽蚌埠233030 蚌埠医学院检验医学院检验与检疫学教研室安徽蚌埠233030

目的:探索利用SPOC教学方法提升生物化学教学质量的途径。方法:以2017、2018年级检验本科为实验组,2015、2016年级检验本科和2017、2018年级影像本科为对照组,实验组采用SPOC教学方法,对照组采用传统式授课。利用考试成绩、问卷调查、... 详细信息

目的:探索利用SPOC教学方法提升生物化学教学质量的途径。方法:以2017、2018年级检验本科为实验组,2015、2016年级检验本科和2017、2018年级影像本科为对照组,实验组采用SPOC教学方法,对照组采用传统式授课。利用考试成绩、问卷调查、成果汇报等方式观察教学效果。结果:采用SPOC教学模式能提高学生的学习成绩,实验组和对照组成绩差异具有统计学意义(P<0.05)。80%以上的学生认为通过SPOC教学能提高其综合能力。结论:在生物化学的教学过程中,采用SPOC教学方法是提高教学质量和学生素质的有效途径。

关键词： SPOC 教学质量生物化学

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阿加曲班治疗超出溶栓时间窗缺血性脑卒中的临床研究

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蚌埠医学院学报 2023年第11期48卷 1534-1536,1540页

作者：唐晓辉陈南星刘唐轶赫肖莉萍贾贤杰于影江苏省昆山市第三人民医院神经内科 215300 江苏省昆山市柏庐社区卫生服务中心疾病控制科 215300 江苏省昆山市第一人民医院检验科 215300 蚌埠医学院流行病学与卫生统计学教研室安徽蚌埠233030 蚌埠医学院生理学教研室安徽蚌埠233030

目的:探讨阿加曲班在超出溶栓时间窗缺血性脑卒中治疗中的应用价值。方法:选择超过溶栓时间窗的缺血性脑卒中病人86例,随机分为对照组46例和观察组40例。对照组病人实施常规抗栓治疗,轻型卒中给予阿司匹林联合氯吡格雷,21 d后改为阿司... 详细信息

目的:探讨阿加曲班在超出溶栓时间窗缺血性脑卒中治疗中的应用价值。方法:选择超过溶栓时间窗的缺血性脑卒中病人86例,随机分为对照组46例和观察组40例。对照组病人实施常规抗栓治疗,轻型卒中给予阿司匹林联合氯吡格雷,21 d后改为阿司匹林继续治疗,非轻型给予阿司匹林治疗;观察组病人采用阿加曲班联合阿司匹林治疗。比较2组病人美国国立卫生研究院卒中量表(NIHSS)评分和改良Rankin量表(mRS)评分。结果:观察组出院当天、出院1个月NIHSS评分均低于对照组(P<0.05);观察组入院当天、出院当天、出院1个月NIHSS评分逐渐降低(P<0.05);对照组入院当天、出院当天、出院1个月NIHSS评分差异无统计学意义(P>0.05)。观察组出院当天、出院1个月mRS评分均低于对照组(P<0.05);观察组入院当天、出院当天及出院1个月mRS评分逐渐降低(P<0.05);对照组入院当天、出院当天及出院1个月mRS评分差异无统计学意义(P<0.05)。结论:阿加曲班治疗超出溶栓时间窗缺血性脑卒中效果显著,有利于改善病人预后,安全性良好。

关键词：缺血性脑卒中阿加曲班溶栓时间窗预后

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安徽北部地区恶性肿瘤人群卡波氏肉瘤相关疱疹病毒血清学分析

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病毒学报 2021年第3期37卷 591-595页

作者：张莹方圆文志林康李文丽周畅柳燕王林定蚌埠医学院第一附属医院检验科蚌埠230004 安徽省第二人民医院输血科合肥230041 安徽医科大学微生物学教研室合肥230032

卡波氏肉瘤相关疱疹病毒是一种新发现的γ疱疹病毒(Kaposi’s sarcoma-associated herpesvirus,KSHV)。在中国新疆,KSHV感染率比较高,KSHV在免疫缺陷患者和静脉吸毒者中感染率也比在普通人群中高。为了进一步研究KSHV在安徽北部地区恶... 详细信息

卡波氏肉瘤相关疱疹病毒是一种新发现的γ疱疹病毒(Kaposi’s sarcoma-associated herpesvirus,KSHV)。在中国新疆,KSHV感染率比较高,KSHV在免疫缺陷患者和静脉吸毒者中感染率也比在普通人群中高。为了进一步研究KSHV在安徽北部地区恶性肿瘤人群中的感染率和高风险因素,初步探讨KSHV与肿瘤的发生之间相关性,研究KSHV的高发人群特点,本研究选用KSHV病毒重组蛋白ORF65、ORF 73和K8.1为抗原,利用酶联免疫吸附实验(ELISA)对500份恶性肿瘤患者血清样本及200份健康体检人群血清样本进行KSHV抗体检测,分析KSHV的感染率及危险因素。结果显示500例肿瘤患者KSHV阳性总数170例,总阳性率为34%,200份健康人群KSHV阳性总数22例,总阳性率为11%,肿瘤人群KSHV阳性率明显高于健康人群(P<0.001)。其中肺癌、肝癌、结肠癌、宫颈癌、乳腺癌样本KSHV阳性率分别为36.4%,34.1%,41.7%,28.6%,30.3%,此5组肿瘤组KSHV阳性率也分别高于健康人群,都具有统计学意义(P<0.001)。但5组肿瘤样本之间KSHV阳性率无明显差异(P>0.05),且各组肿瘤样本分别与性别、乙肝五项、丙肝之间无统计学意义(P>0.05)。本研究结果提示安徽北部地区恶性肿瘤患者KSHV抗体阳性率显著高于中国普通人群总体KSHV抗体阳性率,证明KSHV在恶性肿瘤人群中呈现较高比例的分布。

关键词：卡波氏肉瘤相关疱疹病毒血清阳性率恶性肿瘤危险因素

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临床生物化学检验课程思政教学的实践与探索

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右江民族医学院学报 2020年第6期42卷 810-812页

作者：石玉荣梅传忠武文娟周继红耿建黄桦蚌埠医学院检验医学院生物化学与分子生物学教研室安徽蚌埠233030

课程思政是当前高校思想政治工作的新理念模式,是落实高等教育“立德树人”这一根本任务的重要途径。笔者以临床生物化学检验课程为例,根据课程特点和教育内涵,充分挖掘课程中蕴含的思政教育元素,探索思政元素和专业课程的亲和力,构建... 详细信息

课程思政是当前高校思想政治工作的新理念模式,是落实高等教育“立德树人”这一根本任务的重要途径。笔者以临床生物化学检验课程为例,根据课程特点和教育内涵,充分挖掘课程中蕴含的思政教育元素,探索思政元素和专业课程的亲和力,构建协同育人课堂。

关键词：课程思政临床生物化学检验实践探索

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单核细胞增生李斯特菌L型对小鼠脾脏树突状细胞免疫调节作用影响的研究

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四川大学学报（医学版） 2019年第6期50卷 847-851页

作者：韦莉 Moshin Raza Kashif 金齐力蚌埠医学院病原生物学教研室蚌埠233030 蚌埠医学院感染与免疫安徽省重点实验室蚌埠233030 蚌埠医学院第二附属医院检验科蚌埠233040

目的研究单核细胞增生李斯特菌(Listeria monocytogenes, LM)感染对树突状细胞(dendritic cell, DC)免疫功能的影响,探讨细菌型(WT)和L型(L-form)LM对DC的免疫活化能力差异。方法将C57BL/6小鼠随机分为对照组、WT组、L-form组,3组小鼠... 详细信息

目的研究单核细胞增生李斯特菌(Listeria monocytogenes, LM)感染对树突状细胞(dendritic cell, DC)免疫功能的影响,探讨细菌型(WT)和L型(L-form)LM对DC的免疫活化能力差异。方法将C57BL/6小鼠随机分为对照组、WT组、L-form组,3组小鼠分别经尾静脉感染PBS液、细菌型LM和L型LM,电镜观察脾脏DC超微结构特征;流式细胞术检测小鼠脾脏DC的数量、共刺激分子表达、胞内细胞因子分泌、脾脏T细胞亚群及其活化程度。结果透射电镜可观察到对照组小鼠脾脏DC表面有大量丝状伪足,胞浆均匀,细胞核大而偏于一侧;吞噬细菌后,表面丝状伪足减少,胞质内空泡增多;小鼠感染后第1天脾脏中DC绝对值无明显升高或降低(P>0.05),但成熟表型特征性分子表达上调(P<0.05),L-form感染组DC表面CD80和CD86分子均高于WT组(P<0.05);小鼠感染LM后TNF-α^+DC比例明显升高,L-form感染组分泌TNF-α的DC高于WT组(P<0.05);感染LM后第7天,3组小鼠脾脏CD4^+T细胞和CD8^+T细胞在淋巴细胞中所占比例差异均无统计学意义(P>0.05),但L-form组CD69^+ T细胞比例高于WT组(P<0.05)。结论 L型LM可介导相对高水平的TNF-α,促进DC成熟以增强其抗原递呈的能力。

关键词：单核细胞增生李斯特菌 L型树突状细胞

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