检索结果-内蒙古大学图书馆

蚌埠医学院学报 2014年第4期39卷 426-428,432页

作者：盛玲玲夏惠孙悝陈勇李柏青蚌埠医学院免疫学教研室感染与免疫安徽省重点实验室安徽蚌埠233030

目的：比较磷酸化抗原（HDMAPP）、结核杆菌耐热抗原（Mtb-HAg）和结核杆菌低分子耐热抗原Mtb-HAg（10 k）刺激外周血T细胞产生γ-干扰素（IFN-γ）的反应能力方面的特点及差异.方法：采集正常人外周血,分别用HDMAPP、Mtb-HAg和Mtb-HAg... 详细信息

目的：比较磷酸化抗原（HDMAPP）、结核杆菌耐热抗原（Mtb-HAg）和结核杆菌低分子耐热抗原Mtb-HAg（10 k）刺激外周血T细胞产生γ-干扰素（IFN-γ）的反应能力方面的特点及差异.方法：采集正常人外周血,分别用HDMAPP、Mtb-HAg和Mtb-HAg（10 k）刺激培养14 h,再加入莫能霉素继续培养6h,收集细胞,加入荧光标记单抗进行表面分子和胞内染色,然后在流式细胞仪上检测各实验组中CD3＋ αβ细胞和CD3＋ γδ细胞胞内IFN-γ的表达.结果：正常人各抗原实验组CD3＋ αβ细胞和CD3＋γδ细胞胞内产生IFN-γ＋细胞比率较阴性组对照组升高（P＜0.01）.各抗原刺激组CD3＋γδ细胞产生IFN-γ＋细胞比率明显高于CD3＋αβ细胞（P ＜0.05 ～P＜0.01）.3种抗原刺激组间CD3＋αβ细胞和CD3＋γδ细胞无明显不同（P＞0.05）.结论：HDMAPP、Mtb-HAg和Mtb-HAg（10 k）均可以刺激外周血中T细胞中αβ和γδ细胞群产生IFN-γ,均可特异性诱导刺激CD3＋γδ细胞产生IFN-γ,HDMAPP、Mtb-HAg（10 k）对CD3＋γδ细胞产生IFN-γ的表达量高于Mtb-HAg.

关键词：结核杆菌抗原干扰素 γδ T细胞 αβ T细胞

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抗疟原虫单抗M26-32 IgM的单体化及其免疫学特性研究

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中国人兽共患病学报 2014年第6期30卷 551-555,567页

作者：陶志勇徐岁夏惠顾亚萍刘耀宝方强高琪蚌埠医学院病原生物学教研室安徽省感染与免疫重点实验室蚌埠233030 江苏省寄生病防治研究所卫生部寄生虫病预防与控制技术重点实验室江苏省寄生虫分子生物学重点实验室无锡214064

目的改造IgM类抗疟原虫单抗M26-32为单体IgM亚单位,胶体金标记天然和改造后两种M26-32用于检测疟原虫抗原。方法复苏培养M26-32杂交瘤细胞,接种BALB/c小鼠,收集含有单抗的腹水,用商品HiTrap IgM HP柱纯化腹水中的IgM抗体,并用L-半胱氨... 详细信息

目的改造IgM类抗疟原虫单抗M26-32为单体IgM亚单位,胶体金标记天然和改造后两种M26-32用于检测疟原虫抗原。方法复苏培养M26-32杂交瘤细胞,接种BALB/c小鼠,收集含有单抗的腹水,用商品HiTrap IgM HP柱纯化腹水中的IgM抗体,并用L-半胱氨酸裂解IgM类M26-32单抗成单体IgM亚单位。经间接免疫荧光检定两种抗体的效价,并用胶体金标记,分别检测恶性疟原虫和间日疟原虫可溶性抗原。结果接种20只小鼠,共采集约80mL单抗腹水,经HiTrap IgM HP柱纯化,获得了纯度较高的M26-32单抗。经L-半胱氨酸裂解后,Native电泳显示天然IgM被裂解为单体亚单位,IFA结果显示,亚单位M26-32与天然五聚体IgM滴度无差别。经胶体金标记后,两种金标抗体均分别能检测1∶100稀释的恶性疟原虫和1∶10稀释的间日疟原虫可溶性抗原。结论建立了L-半胱氨酸裂解IgM类M26-32单抗为单体IgM亚单位及其胶体金标记的方法,为利用M26-32进一步制备相应快速诊断工具奠定基础。

关键词：疟疾单克隆抗体 M26—32 IgM 胶体金

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结核分枝杆菌H37Ra菌株ESAT6基因的克隆及序列分析

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蚌埠医学院学报 2014年第10期39卷 1324-1326页

作者：王英薛玉芹王雪梅陈勇李江艳李倩唐洁夏惠方强蚌埠医学院病原生物学教研室安徽蚌埠233030 蚌埠医学院安徽省感染与免疫重点实验室安徽蚌埠233030 蚌埠医学院免疫学教研室安徽蚌埠233030

目的:从结核分枝杆菌H37Ra菌株克隆早期分泌性抗原靶6(ESAT6)基因并进行序列分析。方法:以结核分枝杆菌H37Ra菌株基因组DNA为模版,用PCR方法扩增ESAT6基因,将扩增产物连接到克隆载体pTG19-T中,并用PCR、单双酶切和测序进行鉴定,以BLAST... 详细信息

目的:从结核分枝杆菌H37Ra菌株克隆早期分泌性抗原靶6(ESAT6)基因并进行序列分析。方法:以结核分枝杆菌H37Ra菌株基因组DNA为模版,用PCR方法扩增ESAT6基因,将扩增产物连接到克隆载体pTG19-T中,并用PCR、单双酶切和测序进行鉴定,以BLAST软件进行序列比对分析。结果:从结核分枝杆菌H37Ra株成功克隆了ESAT6基因,测序表明该片段由288 bp组成,与GenBank所报告的H37Rv基因相比同源性为100%。结论:成功克隆了H37Ra株ESAT6编码基因,其序列与H37Rv标准株ESAT6编码基因完全一致。

关键词：结核分枝杆菌 H37Ra株早期分泌性抗原靶6基因克隆序列分析

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SCF诱导肥大细胞产生IL-13的效应及其相关机制的研究

SCF诱导肥大细胞产生IL-13的效应及其相关机制的研究

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中国免疫学会第九届全国免疫学学术大会

作者：汪忆梦马华宋传旺蚌埠医学院免疫学教研室安徽省感染与免疫重点实验室

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LPS促进结核分枝杆菌感染的小鼠单核细胞ROS的产生

LPS促进结核分枝杆菌感染的小鼠单核细胞ROS的产生

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第九届全国免疫学学术大会

作者：张爱霞钱中清蚌埠医学院免疫学教研室感染与免疫安徽省重点实验室

研究背景:活性氧(ROS)是单核巨噬细胞抗感染免疫应答中的重要效应产物。其不仅发挥直接的杀菌功能,对吞噬溶酶体成熟、抗原处理与提呈细胞等也具有重要的影响。结核分枝杆菌(***)可通过抑制TLR信号,削弱单核巨噬细胞ROS产生,进而逃逸免... 详细信息

研究背景:活性氧(ROS)是单核巨噬细胞抗感染免疫应答中的重要效应产物。其不仅发挥直接的杀菌功能,对吞噬溶酶体成熟、抗原处理与提呈细胞等也具有重要的影响。结核分枝杆菌(***)可通过抑制TLR信号,削弱单核巨噬细胞ROS产生,进而逃逸免疫细胞的识别和杀伤。目的:探讨通过TLR激动剂LPS促进Mtb感染的小鼠单核巨噬细胞细胞产生活性氧(ROS)。方法:***减毒株H37Ra(2×10～6 CFU/只)分别感染6—8周小鼠7天、14天、21天,建立Mtb感染小鼠模型。然后分四组为:①空白对照组。②Mtb感染组。③Mtb+LPS组。④Mtb+NS组。各组小鼠尾静脉注射LPS(500ng/kg)和NS,分别于给药7天、14天、21天后,取小鼠外周血经ROS探针罗丹明123染色后,流式细胞仪检测单核细胞胞内ROS产生的水平。以平均荧光强度(MFI)表示。结果:Mtb感染组小鼠单核细胞胞内ROS的水平较空白组明显降低;其中7天、14天、21天感染组的MFI分别为:(21.67、50.70、105.54),空白组为:(120.79、57.77、199.89)。LPS刺激Mtb感染小鼠单核细胞组胞内ROS水平与无LPS刺激的Mtb感染小鼠单核细胞组比较明显升高。其中7天、14天、21天的Mtb+LPS组的MFI分别为:(23.50、100.90、67.321。Mtb+NS组为(18.43、72.99、108.67)。结论:LPS可增强小鼠体内被Mtb抑制的单核细胞ROS的产量,其中14天表达量最大。TLR激动剂LPS可激活小鼠TLR4信号途径,促进Mtb感染单核细胞产生ROS。

关键词：小鼠结核分枝杆菌 LPS 单核细胞活性氧。

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LPS促进结核分枝杆菌感染的小鼠单核细胞ROS的产生

LPS促进结核分枝杆菌感染的小鼠单核细胞ROS的产生

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中国免疫学会第九届全国免疫学学术大会

作者：张爱霞钱中清蚌埠医学院免疫学教研室感染与免疫安徽省重点实验室

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SCF诱导肥大细胞产生IL-13的效应及其相关机制的研究

SCF诱导肥大细胞产生IL-13的效应及其相关机制的研究

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第九届全国免疫学学术大会

作者：汪忆梦马华宋传旺蚌埠医学院免疫学教研室安徽省感染与免疫重点实验室

研究背景:哮喘病人血清和痰液中SCF的含量增加,但SCF在哮喘发病中的作用一直不清楚。近来的研究表明,肥大细胞不仅作为效应细胞,还可作为调节细胞参与哮喘的发生。现在知道,Th2型细胞因子IL-13在哮喘的发生、发展中起到关键作用。SCF是... 详细信息

研究背景:哮喘病人血清和痰液中SCF的含量增加,但SCF在哮喘发病中的作用一直不清楚。近来的研究表明,肥大细胞不仅作为效应细胞,还可作为调节细胞参与哮喘的发生。现在知道,Th2型细胞因子IL-13在哮喘的发生、发展中起到关键作用。SCF是否可对肥大细胞分泌IL-13产生影响,从而影响哮喘发病的进程,关于这方面仍不甚清楚。目的:探讨SCF对肥大细胞产生IL-13的影响及其相关机制。方法:取肥大细胞P815为研究对象,在有或无各种信号通路阻断剂情况下,不同浓度SCF刺激不同时间点后,ELISA检测上清液中IL-13的含量,荧光定量PCR检测IL-13的表达情况;Western blot检测细胞外信号调节激酶(ERK)磷酸化情况,EMSA检测cAMP反应原件结合蛋白(CREB)活化情况。结果:SCF及各种阻断剂作用于P815细胞6 h、16 h后,以浓度依赖的方式促进肥大细胞P815分泌IL-13,与对照组比较,P<0.05;MEK通路抑制剂U0126(10gM)预处理P815细胞30min后,SCF引起的IL-13分泌明显被阻断,P<0.05;肥大细胞受SCF刺激后出现ERK磷酸化和CREB激活的现象。结论:SCF促进肥大细胞产生IL-13,这一效应涉及ERK1/2-CREB信号通路。

关键词： SCF 肥大细胞 IL-13 ERK CREB

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LPS对外周血PBMC中T细胞产生IFN-γ和IL-4的影响

LPS对外周血PBMC中T细胞产生IFN-γ和IL-4的影响

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第九届全国免疫学学术大会

作者：方芳钱中清蚌埠医学院免疫学教研室安徽省感染与免疫重点实验室

研究背景:机体抗***机制包括体液免疫和细胞免疫俩个方面。其中,细胞免疫起着重要作用,即机体感染***后由T淋巴细胞的活化所提供的特异性抗结核免疫保护。T淋巴细胞活化产生的细胞因子中,最关键的是IFN-γ,其主要功能是活化巨噬细胞;促... 详细信息

研究背景:机体抗***机制包括体液免疫和细胞免疫俩个方面。其中,细胞免疫起着重要作用,即机体感染***后由T淋巴细胞的活化所提供的特异性抗结核免疫保护。T淋巴细胞活化产生的细胞因子中,最关键的是IFN-γ,其主要功能是活化巨噬细胞;促进T细胞的增殖和分化,从而发挥抗结核免疫作用。目的:探讨TLR激动剂LPS对外周血PBMC中T细胞产生IFN-γ和IL-4的影响。方法:1.健康人和结核病患者各5例,取外周抗凝血,加入佛波醇酯(PMA)和钙离霉素(Ionomycin)刺激2小时后,加入莫能霉素(Monensin)继续培养4小时,收集细胞,加入荧光标记抗体anti-CD3-APC,antiCD8-PECY5.5染色,透膜后再加细胞因子荧光标记单抗anti-IFN-γ和anti-IL-4进行细胞内染色,流式细胞仪检测分泌IFN-γ和IL-4的T细胞亚群的比例。2健康人和结核病患者各5例,取外周抗凝血各4ml,分离获得外周血单个核细胞(PBMC),用含5%NBS RPMI-1640培养液配成细胞悬液,浓度为1.5×10～6/ml,接种于24孔培养板,于结核病人孔加入100 ng/ml LPS,培养24h后,流式细胞仪检测分泌IFN-γ和IL-4的T细胞亚群的比例。结果:1健康人外周血T细胞中IFN-γ表达水平(11 45±4 10)%,IL-4表达水平(0.92±0.98)%,与结核病患者组(5 11±1 17)%及(1.66±0.34)%比较,差异有统计学意义(p<0.05)。2.100 ng/ml LPS刺激组结核病患者外周血T细胞IFN-γ表达水平(8.43±1.39)%明显高于未处理组(6.12±1.65)%,差异有统计学意义(p<0.05);刺激组IL-4表达水平(1.43±0.44)%与未处理组(2 03±0.66)%比较,差异无统计学意义(p>0.05)。

关键词：肺结核结核分枝杆菌(M.tb) LPS 细胞因子 IFN-γ IL-4

来源：评论

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结核分枝杆菌抗原B细胞表位肽对人外周γδ T细胞的特异性激活作用

结核分枝杆菌抗原B细胞表位肽对人外周γδ T细胞的特异性激活作用

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第九届全国免疫学学术大会

作者：王充李柏青蚌埠医学院免疫学教研室感染与免疫安徽省重点实验室

研究背景:已知γδ T细胞识别多肽抗原不需要抗原递呈细胞,其识别方式类似于B细胞。本实验室最近应用噬菌体随机多肽库筛选技术证实γδ T细胞可被人工合成多肽表位激活。但γδ T细胞能否识别结核分枝杆菌（Mtb）抗原中的B细胞多肽表... 详细信息

研究背景:已知γδ T细胞识别多肽抗原不需要抗原递呈细胞,其识别方式类似于B细胞。本实验室最近应用噬菌体随机多肽库筛选技术证实γδ T细胞可被人工合成多肽表位激活。但γδ T细胞能否识别结核分枝杆菌（Mtb）抗原中的B细胞多肽表位尚未见报道。目的:探讨Mtb抗原中B细胞多肽表位能否特异性刺激γδ T细胞的活化和增殖。方法:选择文献已经报道的Mtb抗原中B细胞识别的多肽表位（Bp）序列人工合成6条多肽（Bp-1p-6）包被24孔细胞培养板,采集健康成年人外周血分离获取PBMC,经CFSE染色后放人分别包被Bp-1至Bp-6的培养板中刺激培养。以Mtb耐热抗原作为阳性对照,以IL-2作为阴性对照。每3天半量换液并加入IL-2 50 U/ml,培养12天后,收集扩增细胞,用流式细胞术检测γδ T细胞比例及增殖指数（PI）。扩增的细胞用相同多肽再刺激培养16或20小时后测定γδ T细胞CD69和IFN-γ的表达。结果:12例健康人PBMC,经B细胞表位肽刺激培养后,扩增的γδ T细胞比例明显高于阴性对照组的,在Bp-1、Bp-2和Bp-6刺激组均为4例;在Bp-3,Bp-4和Bp-5组分别为7例、6例和5例。其中代表性的1例如下,阴性对照组γδ T细胞的比例为2.35%,PI为4.37;阳性对照组为61 1%,PI为6.97;在Bp-1、Bp-2、Bp-3、Bp-4、Bp-5和Bp-6刺激组γδ T细胞的比例分别为6.27%、7.01%、7 22%、7.7%、12.2%和6.64%,PI则分别为6.26、6.99、3.00、6.99、7.00和6.96。经Bp-3刺激扩增的细胞加Bp-3再刺激后,活化分子CD69表达（73.6%）高于阴性对照组（48.2%）;γδ T细胞中IFN-γ产生细胞为3.21%,而非γδ T细胞中未能检测到IFN-γ产生细胞。结论:Mtb抗原中B细胞表位肽片段在体外能刺激人PBMC中γδ T细胞的增殖,扩增细胞经相同B表位肽刺激后可表达活化分子和产生细胞因子IFN-γ。虽然各B细胞表位肽对健康人外周γδ T细胞刺激增殖和活化有个体差异性,但仍有力提示B细胞表位肽可特异性激活γδ T细胞。

关键词：结核分枝杆菌抗原 γδ T细胞 B细胞表位

来源：评论

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结核分枝杆菌抗原B细胞表位肽对人外周γδT细胞的特异性激活作用

结核分枝杆菌抗原B细胞表位肽对人外周γδT细胞的特异性激活作用

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中国免疫学会第九届全国免疫学学术大会

作者：王充李柏青蚌埠医学院免疫学教研室感染与免疫安徽省重点实验室蚌埠233030

研究背景:已知γδ T细胞识别多肽抗原不需要抗原递呈细胞,其识别方式类似于B细胞.本实验室最近应用噬菌体随机多肽库筛选技术证实γδ T细胞可被人工合成多肽表位激活.但γδ T细胞能否识别结核分枝杆菌(Mtb)抗原中的B细胞多肽表位尚... 详细信息

研究背景:已知γδ T细胞识别多肽抗原不需要抗原递呈细胞,其识别方式类似于B细胞.本实验室最近应用噬菌体随机多肽库筛选技术证实γδ T细胞可被人工合成多肽表位激活.但γδ T细胞能否识别结核分枝杆菌(Mtb)抗原中的B细胞多肽表位尚未见报道.目的:探讨Mtb抗原中B细胞多肽表位能否特异性刺激γδ T细胞的活化和增殖.方法:选择文献已经报道的Mtb抗原中B细胞识别的多肽表位(Bp)序列人工合成6条多肽(Bp-1～Bp-6)包被24孔细胞培养板,采集健康成年人外周血分离获取PBMC,经CFSE染色后放人分别包被Bp-1至Bp-6的培养板中刺激培养.以Mtb耐热抗原作为阳性对照,以IL-2作为阴性对照.每3天半量换液并加入IL-2 50 U/ml,培养12天后,收集扩增细胞,用流式细胞术检测γδ T细胞比例及增殖指数(PI).扩增的细胞用相同多肽再刺激培养16或20小时后测定γδ T细胞CD69和IFN-γ的表达.

关键词：结核分枝杆菌抗原 γδT细胞 B细胞表位

来源：评论

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