检索结果-内蒙古大学图书馆

中华损伤与修复杂志（电子版） 2016年第2期11卷 90-95页

作者：唐富波张文华李雨梦李静远刘锐胡森白晓东武警总医院烧伤整形科北京100039 武警后勤学院天津300309 解放军总医院第一附属医院全军创伤修复与组织再生重点实验室暨皮肤损伤修复与组织再生北京市重点实验室北京100048 哈尔滨市第五医院烧伤整形科 150040

目的研究丁酸钠对特重度烧伤大鼠脏器功能及血流量的影响。方法雄性SD大鼠48只,体重(250±20)g,随机数字表法分为假伤组、烧伤组和丁酸钠组,每组16只。丁酸钠组与烧伤组采用沸水烫大鼠背部15 s、腹部8 s,造成50%TBSAⅢ度烧伤,伤后... 详细信息

目的研究丁酸钠对特重度烧伤大鼠脏器功能及血流量的影响。方法雄性SD大鼠48只,体重(250±20)g,随机数字表法分为假伤组、烧伤组和丁酸钠组,每组16只。丁酸钠组与烧伤组采用沸水烫大鼠背部15 s、腹部8 s,造成50%TBSAⅢ度烧伤,伤后分别立即腹腔注射丁酸钠(400 mg/kg)与等体积0.9%氯化钠溶液。假伤组37℃温水浸泡后腹腔注射等体积0.9%氯化钠溶液。伤后3 h和6 h采用激光多普勒血流仪测定肝、肾、小肠黏膜血流量;腹主动脉取血检测血清谷丙转氨酶(ALT)、肌酐(Cr)、肌酸激酶同工酶(CK-MB)和二胺氧化酶(DAO);处死大鼠取脏器组织采用干湿重法检测心、肺、肝、肾和小肠含水率。结果丁酸钠组伤后3 h肾和小肠黏膜血流量[(93.56±11.56)、(84.65±12.64)BPU]分别高于烧伤组[(80.71±10.53)、(59.64±11.82)BPU],差异均有统计学意义(t=2.324、4.087,P值均小于0.05);心、肺、小肠含水率[(72.35±1.93)%、(69.56±1.83)%、(63.75±2.58)%]以及CK-MB水平(2794.56±291.54)U/L分别低于烧伤组(74.45±1.62)%、(73.56±1.69)%、(72.54±2.93)%、(3676.32±259.65)U/L,差异均有统计学意义(t=2.357、4.541、6.368、6.388,P值均小于0.05)。丁酸钠组伤后6 h肝和小肠黏膜血流量[(65.36±11.79)、(62.65±12.56)BPU]分别高于烧伤组[(51.72±10.54)、(31.56±12.72)BPU],差异均有统计学意义(t=2.439、4.919,P值均小于0.05);肺、肝、肾和小肠含水率[(73.72±2.05)%、(78.41±1.84)%、(75.64±2.63)%、(70.53±3.13)%]分别低于烧伤组[(80.62±2.16)%、(82.62±1.93)%、(80.32±3.05)%、(81.53±2.79)%],差异均有统计学意义(t=6.553、4.465、3.286、7.420,P值均小于0.05);丁酸钠组血浆ALT(96.36±6.56)U/L、Cr(79.35±4.16)μmol/L、DAO(78.54±5.23)U/L、CK-MB(3712.64±309.45)U/L分别低于烧伤组[(113.54±7.41)U/L、(90.34±5.37)μmol/L、(92.34±5.34)U/L、(5264.46±351.62)U/L],差异均有统计学意义(t=4.910、4.576、5.222、9.370,P值均小于0.05)。结论丁酸钠能够增加特重度烧伤大鼠腹腔脏器血流量,减轻组织水肿,改善脏器功能,对特重度烧伤引起的重要脏器损害具有一定的保护作用。

关键词：组蛋白脱乙酰基酶抑制剂烧伤水肿丁酸钠脏器功能血流量

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差速贴壁交换法在C57小鼠骨髓间充质干细胞集落形成实验中的新发现

差速贴壁交换法在C57小鼠骨髓间充质干细胞集落形成实验中的新发现

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第十届全国创伤修复(愈合)与组织再生学术会议、第三届中欧创面修复学术会议、中国医师协会创伤外科医师分会创面修复医师专业委员会会议

作者：吴旭张振中刘南波付小兵黄沙南方医科大学南方医院惠侨医学中心解放军总医院第一附属医院全军创伤修复与组织再生重点实验室暨皮肤损伤修复与组织再生北京市重点实验室

目的：在全骨髓法提取C57 小鼠骨髓间充质干细胞的过程中引入差速贴壁交换法,初步探索骨髓间充质干细胞集落的形成过程.方法：实验一：在全骨髓法提取C57 小鼠骨髓间充质干细胞的过程中,采用差速贴壁法将骨髓中的细胞按照贴壁的先后顺... 详细信息

目的：在全骨髓法提取C57 小鼠骨髓间充质干细胞的过程中引入差速贴壁交换法,初步探索骨髓间充质干细胞集落的形成过程.方法：实验一：在全骨髓法提取C57 小鼠骨髓间充质干细胞的过程中,采用差速贴壁法将骨髓中的细胞按照贴壁的先后顺序进行分离培养,每隔2h 将已接种但仍未贴壁的细胞重新悬浮和接种至新的细胞培养皿中,进而将细胞分为0～2h 组、2h～4h 组、4h～6h 组、6h～8h组、8h～48h 组,并观察和比较其形态特征和生长规律;实验二：选取GFP(+)或GFP(-)的C57 小鼠作为研究对象,分为GFP(+)组和GFP(-)组.全骨髓法提取C57 小鼠骨髓细胞.在细胞混悬液恒温孵育4h 后,悬浮起仍未贴壁的骨髓细胞,在GFP(+)组和GFP(-)组间进行交换,并继续孵育至48h,从而获得了"(0～4h 内贴壁)GFP(+)细胞/(4h～48h内贴壁)GFP(-)细胞"混合组A 及"(0～4h 内贴壁)GFP(-)细胞/(4h～48h 内贴壁)GFP(+)细胞"混合组B.继续原代培养上述两组细胞,并观察其中的集落形成过程.结果：在实验一中：0～2h 组和2h～4h 组的细胞形态和生长规律相似,4h～6h 组、6h～8h 组和8h～48h 组的细胞形态和生长规律相似.重复上述实验,将细胞重新分为0～4h 组和4h～48h组,继续孵育3 天,0～4h 组的细胞悉数凋亡,继续孵育10 天,4h～48h 组的细胞相继凋亡;在实验二中："(0～4h 内贴壁)GFP(+)细胞"和"(4h～48h 内贴壁)GFP(-)细胞"混合培养后分别发现了由"(0～4h 内贴壁)GFP(+)细胞"和"(4h～48h 内贴壁)GFP(-)细胞"形成的细胞集落,两种集落的细胞形态有较大差异.结论：通过全骨髓法获得的C57 小鼠"骨髓间充质干细胞"中至少应该含有两种不同的细胞类型(暂命名为"先贴细胞"和"后贴细胞")."先贴细胞"和"后贴细胞"的贴壁时间不同,但在体外培养时相互依存,并共同参与了"骨髓间充质干细胞"的集落形成、和传代.

关键词：差速贴壁骨髓间充质干细胞集落形成

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高迁移率蛋白族B1通过调控p53表达抑制T细胞增殖

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感染．炎症．修复 2016年第3期17卷 143-148页

作者：贾敏张卉童亚林姚咏明广西师范大学生命科学学院广西桂林541002 解放军第181医院烧伤整形中心广西桂林541002 解放军总医院第一附属医院全军创伤修复与组织再生重点实验室暨皮肤损伤修复与组织再生北京市重点实验室北京100048

目的:探讨高迁移率蛋白族B1(HMGB1)对T细胞的增殖抑制作用及其分子机制。方法:将培养的Jurkat细胞分为对照组、HMGB1(100 ng/ml)12、24、48 h组,HMGB1组加入HMGB1培养相应时间;将细胞分为对照组、HMGB1 10、100、1 000 ng/ml组,予不同浓... 详细信息

目的:探讨高迁移率蛋白族B1(HMGB1)对T细胞的增殖抑制作用及其分子机制。方法:将培养的Jurkat细胞分为对照组、HMGB1(100 ng/ml)12、24、48 h组,HMGB1组加入HMGB1培养相应时间;将细胞分为对照组、HMGB1 10、100、1 000 ng/ml组,予不同浓度HMGB1培养24 h;采用细胞计数试剂盒(CCK-8)法检测各组细胞增殖率,采用实时荧光定量-聚合酶链反应(RT-PCR)和Western blot法检测各组细胞中p53m RNA、磷酸化p53及p53总蛋白的表达水平。将载有p53 sh RNA、p53 m RNA表达序列及空白质料的病毒转染入Jurkat细胞中,并选择100 ng/ml HMGB1刺激24 h,采用同样方法检测细胞增殖率。最后,将细胞分为正常组、HMGB1组、SB203580[p38丝裂原活化蛋白激酶(p38MAPK)抑制剂]+HMGB1组进行相应处理。收集各组细胞,RT-PCR和Western blot法检测p53 m RNA、磷酸化p53及p53总蛋白的表达水平。结果:HMGB1(100ng/ml)刺激细胞24、48 h后细胞增殖率降低,较正常组差异有显著性(P<0.05);100、1 000 ng/ml HMGB1刺激细胞24 h后,增殖率明显下降,与正常组相比差异具有统计学意义(P<0.05)。HMGB1(100 ng/ml)刺激细胞后,p53 m RNA、磷酸化及总蛋白表达水平在24、48 h逐步上升,且有明显统计学意义(P<0.05);HMGB1刺激24 h,10、100 ng/ml HMGB1刺激组细胞p53 m RNA、p53磷酸化及总蛋白表达水平较正常组显著上升,但1 000 ng/ml HMGB1没有明显变化;在不同转染组中,予HMGB1刺激细胞,空载组增殖率降低,而p53 sh RNA表达组细胞增殖趋于正常,p53 m RNA过表达组增殖率较空载组下降更为明显。Jurkat细胞在p38 MAPK阻断剂和HMGB1共同作用后,p53 m RNA、磷酸化及总蛋白表达水平比HMGB1刺激组明显下降(P<0.05)。结论:胞外HMGB1可通过诱导p38 MAPK信号通路激活p53蛋白,抑制T细胞增殖。

关键词：高迁移率族蛋白B1 p53 p38丝裂原活化蛋白激酶 T细胞增殖

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DNA去甲基化与间充质干细胞的分化调控

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感染．炎症．修复 2016年第1期17卷 52-54页

作者：赵洪良张翠萍陈艳赵换军谭志军付小兵解放军医学院北京100853 解放军总医院第一附属医院全军创伤修复与组织再生重点实验室暨皮肤损伤修复与组织再生北京市重点实验室北京100048 北京军区总医院药理科北京100700 天津医科大学研究生院天津300070

间充质干细胞（mesenchymalstemcells,MSCs）是一种重要的多能干细胞干细胞,来源于发育早期的中胚层和外胚层,在体内或体外特定的诱导条件下,可分化为多谱系细胞,如心肌、骨、软骨、肌肉和脂肪等多种组织,因其可用于修复损伤组织及治疗... 详细信息

间充质干细胞（mesenchymalstemcells,MSCs）是一种重要的多能干细胞干细胞,来源于发育早期的中胚层和外胚层,在体内或体外特定的诱导条件下,可分化为多谱系细胞,如心肌、骨、软骨、肌肉和脂肪等多种组织,因其可用于修复损伤组织及治疗某些遗传缺陷性疾病而具有广阔的临床应用前景,所以近年来成为基础和临床医学的研究热点,并取得了丰硕的成果[1].

关键词：间充质干细胞分化调控去甲基化 DNA 损伤组织多能干细胞缺陷性疾病诱导条件

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小汗腺自发荧光现象的观察

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感染．炎症．修复 2016年第1期17卷 12-15页

作者：王彬彬张翠萍赵志力付小兵王丽内蒙古自治区人民医院整形美容科内蒙古呼和浩特010017 解放军总医院第一附属医院全军创伤修复与组织再生重点实验室暨皮肤损伤修复与组织再生北京市重点实验室北京100048 北京军区总医院整形美容中心北京100700

目的:观察小汗腺是否具有自发荧光现象及其随汗腺细胞生长、衰老的变化,推测其发光基团,探讨研究小汗腺的新方法。方法:取整形美容患者弃用的皮肤组织,苏木素染色,奥林巴斯倒置相差显微镜观察小汗腺组织的自发荧光现象。从皮肤中提取单... 详细信息

目的:观察小汗腺是否具有自发荧光现象及其随汗腺细胞生长、衰老的变化,推测其发光基团,探讨研究小汗腺的新方法。方法:取整形美容患者弃用的皮肤组织,苏木素染色,奥林巴斯倒置相差显微镜观察小汗腺组织的自发荧光现象。从皮肤中提取单个汗腺细胞进行体外培养,于汗腺细胞贴壁后7、14、21、28 d在奥林巴斯倒置相差显微镜分别以紫外光、绿光、蓝光3种不同激发光照射,观察小汗腺自发荧光的变化情况;利用激光扫描共聚焦显微镜γ扫描测量小汗腺自发荧光的强度。结果:苏木素染色后的小汗腺组织自发荧光表现为似有小孔的网状结构,小汗腺边界清晰,其自发荧光在蓝色激发光下表现为绿色自发荧光,绿色激发光下表现出红色自发荧光;单独的小汗腺细胞在荧光显微镜下表现出更多颜色的自发荧光,紫外光的激发下显示出蓝色的自发荧光,蓝色的激发光下显示出绿色自发荧光,绿色的激发光下显示出红色的自发荧光,随小汗腺的生长,荧光强度没有明显变化;用激光扫描共聚焦显微镜γ分层扫描方法测定小汗腺自发荧光强度,分别在近530 nm和590 nm处发现两个自发荧光峰值,与黄素和脂褐素的自发荧光峰值相近。结论:通过观察苏木素染色后小汗腺组织的自发荧光可以简单、快速地帮助判断小汗腺结构。单个汗腺细胞的自发荧光强度随汗腺生长没有明显减弱。根据小汗腺自发荧光的峰值测定初步判定小汗腺自发荧光的发光基团是黄素和脂褐素。

关键词：小汗腺自发荧光荧光显微镜激光扫描共聚焦显微镜黄素脂褐素

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激动素在创面修复及皮肤美容中作用的研究进展

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中华创伤杂志 2015年第12期31卷 1135-1138页

作者：周云超赵志力张翠萍付小兵北京军区总医院全军皮肤修复研究所整形美容中心 100700 解放军总医院第一附属医院全军创伤修复与组织再生重点实验室暨皮肤损伤修复与组织再生北京市重点实验室

激动素（kinetin，KT）是60年前发现的第一个细胞分裂素，经过国内外60年的不断研究，人们对它的观念已从最初的定义植物激素逐步发展为对动植物及人体起广泛作用的物质，并已把它应用于皮肤的美容护理和人体疾病的治疗。然而，KT对动... 详细信息

激动素（kinetin，KT）是60年前发现的第一个细胞分裂素，经过国内外60年的不断研究，人们对它的观念已从最初的定义植物激素逐步发展为对动植物及人体起广泛作用的物质，并已把它应用于皮肤的美容护理和人体疾病的治疗。然而，KT对动物和人体的一些作用机制，以及对多系统的作用是否存在共同作用机制还不太清楚。笔者通过KT对动物及人体各系统作用及作用机制进行归纳总结，

关键词：皮肤美容激动素创面修复细胞分裂素植物激素人体疾病美容护理归纳总结

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电针足三里穴对失血性休克大鼠肾组织功能及脂质过氧化的影响

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中国急救医学 2015年第11期35卷 1036-1038页

作者：钟毓贤乔晋琳石现胡森中国人民解放军海军总医院康复医学科北京100048 解放军总医院针灸科北京100853 解放军总医院第一附属医院全军创伤修复与组织再生重点实验室暨皮肤损伤修复与组织再生北京市重点实验室北京100048

目的研究电针足三里穴对失血性休克大鼠肾组织功能及脂质过氧化损伤的保护作用。方法取40只SD雄性大鼠按全血容量的40％放血制成失血性休克模型。随机分为四组，电针足三里组（EA组）、电针非经非穴组（SEA组）、液体复苏组（FR组）、... 详细信息

目的研究电针足三里穴对失血性休克大鼠肾组织功能及脂质过氧化损伤的保护作用。方法取40只SD雄性大鼠按全血容量的40％放血制成失血性休克模型。随机分为四组，电针足三里组（EA组）、电针非经非穴组（SEA组）、液体复苏组（FR组）、模型对照组（MC组），每组10只。FR组于失血后10min静脉输入3倍失血量的乳酸林格液。EA组于失血后10min电针足三里穴（持续刺激25min，4Hz，4V）；SEA组电针非经非穴部位，其他操作同EA组。MC组制成失血性休克模型后不做任何处理。于失血后3、6h采血测定血浆肌酐（Cr）含量，并检测肾组织血流量（KBF），后处死动物取肾组织测定丙二醛（MDA）含量及组织含水率（WG）。结果失血性休克后3h和6h，EA组Cr含量显著低于SEA组和MC组，KBF显著高于SEA组和MC组（P〈0．05）；失血性休克后6h，EA组肾组织MDA含量及WG显著低于SEA组和MC组，以上三组均显著高于FR组（P〈0．05）。结论电针足三里能够一定程度上改善失血性休克大鼠肾组织缺血，减轻过氧化和组织水肿。

关键词：失血性休克足三里穴电针肾缺血

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小型猪耐甲氧西林金黄色葡萄球菌感染创面模型的建立

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感染．炎症．修复 2015年第2期16卷 86-90,F0002页

作者：周文芳黄瑾马奎耿志军孙同柱韩松蒋达和王择胜黎君友解放军总医院全军创伤修复与组织再生重点实验室暨皮肤损伤修复与组织再生北京市重点实验室北京100048 武汉摩尔生物科技有限公司

目的：建立耐药菌感染创面模型，为研究抗菌药物提供可靠稳定的动物模型。方法：在3～4个月龄小型猪背部脊柱中线旁开4cm处用直径16mm的切割器每侧钻出6个至深筋膜的圆形切口，创面间隔3cm。将创面随机分为两组，一侧为耐甲氧西林金黄... 详细信息

目的：建立耐药菌感染创面模型，为研究抗菌药物提供可靠稳定的动物模型。方法：在3～4个月龄小型猪背部脊柱中线旁开4cm处用直径16mm的切割器每侧钻出6个至深筋膜的圆形切口，创面间隔3cm。将创面随机分为两组，一侧为耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）感染组，于创面形成后30min接种MRSA菌液0．1ml（1×10^8CFU／cm^2）；对侧为对照组，接种等体积生理盐水。伤后不同时间进行创面炎症反应及愈合的大体观察和组织学观察，测量创面面积，进行组织细菌学检测。结果：MRSA感染2d后创面暗红、创缘肿胀、渗出多、有大量白色分泌物且愈合慢；感染后2、10d创面组织培养菌落数均超过1×10^8CFU／g；对照组2d和10d组织培养菌落数为1×10^5CFU／g，不足以影响伤口正常愈合。组织学观察显示感染后2、10d，MRSA感染组较阴性对照组炎症细胞明显增多、肉芽组织生长缓慢。对照组新生肉芽生长较快，有大量新生血管生成。结论：采用小型猪背部2cm。的全层皮肤缺损创面接种1×108cFu／cm。MRSA的方法，2d后可以形成MRSA感染创面，且具有创面面积可控、感染效果稳定的优点。

关键词：小型猪创面耐药菌 MRSA感染动物模型

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骨髓间充质干细胞和其来源的汗腺样细胞microRNAs差异表达分析

骨髓间充质干细胞和其来源的汗腺样细胞microRNAs差异表达分析

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首届全国组织修复与再生医学大会暨国际组织修复与再生医学学术研讨会

作者：谭志军张翠萍付小兵解放军总医院全军创伤修复与组织再生重点实验室暨皮肤损伤修复与组织再生北京市重点实验室北京100048

目的：对骨髓间充质干细胞(human bone marrow mesenchymal stem cells,hBM-MSCs)和其来源的汗腺样细胞进行microRNAs差异表达谱分析,寻找人骨髓间充质干细胞向汗腺样细胞分化的关键microRNAs,并初步预测其功能。方法：原代培养鉴定hBM-...

目的：对骨髓间充质干细胞(human bone marrow mesenchymal stem cells,hBM-MSCs)和其来源的汗腺样细胞进行microRNAs差异表达谱分析,寻找人骨髓间充质干细胞向汗腺样细胞分化的关键microRNAs,并初步预测其功能。方法：原代培养鉴定hBM-MSCs和汗腺细胞,当汗腺细胞密度达到70～80％时进行热休克处理,然后将其与hBM-MSCs通过Transwell进行共培养诱导;10天后,分别提取hBM-MSCs和其来源的汗腺样细胞的总RNA,纯化标记后,进行microRNAs杂交和数据分析以及靶基因预测。并将关键microRNA分别转染人骨髓间充质干细胞并继续与热休克的汗腺细胞间接共培养诱导7天,之后采用免疫荧光、RT-PCR和Western Blot技术检测转染并间接共培养对细胞的诱导效果。

关键词：

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人骨髓间充质干细胞转分化为汗腺样细胞的DNA甲基化调控机制

人骨髓间充质干细胞转分化为汗腺样细胞的DNA甲基化调控机制

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首届全国组织修复与再生医学大会暨国际组织修复与再生医学学术研讨会

作者：赵焕军赵宏良张翠萍付小兵解放军总医院全军创伤修复与组织再生重点实验室暨皮肤损伤修复与组织再生北京市重点实验室北京100048

目的：筛选与人骨髓间充质干细胞(MSCs)转分化为汗腺样细胞过程密切相关基因启动子位点,探索DNA甲基化调控MSCs的转分化机制.方法：热休克汗腺诱导MSCs共培养10d,免疫组化检测MSCs转分化后KRT19和CEA标志,诱导MSCs分化0d、5d和10d用RT-...

目的：筛选与人骨髓间充质干细胞(MSCs)转分化为汗腺样细胞过程密切相关基因启动子位点,探索DNA甲基化调控MSCs的转分化机制.方法：热休克汗腺诱导MSCs共培养10d,免疫组化检测MSCs转分化后KRT19和CEA标志,诱导MSCs分化0d、5d和10d用RT-PCR和Western blots检测CEA基因和蛋白表达情况.芯片检测MSCs分化前后45万个基因位点DNA甲基化水平变化.从甲基化水平显著变化基因位点中,筛选出与MSCs转分化密切相关基因位点.用飞行质谱技术检测关键基因启动子的甲基化水平在诱导分化前后的水平变化;筛选出的关键基因构建质粒并转染MSCs并培养,培养基内加入10ng/μL5Azd,应用RT-PCR和Western blot检测转染5天CEA基因和蛋白表达.结果：MSC经共培养10d后KRT19和和CEA免疫荧光染色示阳性,对照组KRT19和CEA示阴性.芯片检测MSC诱导分化前后共有76个基因位点的DNA甲基化水平具有明显差异(0.169‰),甲基化水平明显降低51个位点,其中SLC12A7、ENKUR、LRWD1、Pax6和HDAC4等位点甲基化水平显著下降.甲基化水平明显升高25个位点,其中Hoxd11、ADARB2、ANGPT1、UNC84A和BMP6等位点DNA甲基化水平明显升高.提示MSC转分化过程中DNA甲基化水平以下调为主.经过比较分析,选择Pax6基因位点进行飞行质谱检测,结果提示该位点甲基化水平明显降低.质粒构建Pax6转染MSCs,培养5天CEA基因表达明显增高,CEA蛋白阳性表达.结论：DNA去甲基化在MSCs分化过程中起到重要的调控作用,Pax6基因与5azd协同作用可能调控CEA基因表达影响MSC转分化.

关键词：

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