检索结果-内蒙古大学图书馆

中国急救医学 2015年第11期35卷 1036-1038页

作者：钟毓贤乔晋琳石现胡森中国人民解放军海军总医院康复医学科北京100048 解放军总医院针灸科北京100853 解放军总医院第一附属医院全军创伤修复与组织再生重点实验室暨皮肤损伤修复与组织再生北京市重点实验室北京100048

目的研究电针足三里穴对失血性休克大鼠肾组织功能及脂质过氧化损伤的保护作用。方法取40只SD雄性大鼠按全血容量的40％放血制成失血性休克模型。随机分为四组，电针足三里组（EA组）、电针非经非穴组（SEA组）、液体复苏组（FR组）、... 详细信息

目的研究电针足三里穴对失血性休克大鼠肾组织功能及脂质过氧化损伤的保护作用。方法取40只SD雄性大鼠按全血容量的40％放血制成失血性休克模型。随机分为四组，电针足三里组（EA组）、电针非经非穴组（SEA组）、液体复苏组（FR组）、模型对照组（MC组），每组10只。FR组于失血后10min静脉输入3倍失血量的乳酸林格液。EA组于失血后10min电针足三里穴（持续刺激25min，4Hz，4V）；SEA组电针非经非穴部位，其他操作同EA组。MC组制成失血性休克模型后不做任何处理。于失血后3、6h采血测定血浆肌酐（Cr）含量，并检测肾组织血流量（KBF），后处死动物取肾组织测定丙二醛（MDA）含量及组织含水率（WG）。结果失血性休克后3h和6h，EA组Cr含量显著低于SEA组和MC组，KBF显著高于SEA组和MC组（P〈0．05）；失血性休克后6h，EA组肾组织MDA含量及WG显著低于SEA组和MC组，以上三组均显著高于FR组（P〈0．05）。结论电针足三里能够一定程度上改善失血性休克大鼠肾组织缺血，减轻过氧化和组织水肿。

关键词：失血性休克足三里穴电针肾缺血

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3D生物打印技术打印组织和器官的研究进展

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感染．炎症．修复 2016年第1期17卷 46-48页

作者：姚斌刘南波黄沙谢江帆付小兵解放军总医院第一附属医院全军创伤修复与组织再生重点实验室北京100048 南开大学医学院天津300071 南方医科大学南方医院心胸外科广东广州501515

3D打印技术由***在1986年第1次提出,称为“立体光固化技术”,即将紫外光照射后的薄层材料打印形成固体3D结构,这种方法后来用于将生物材料塑造成具有三维结构的树脂模型[1].3D生物打印作为一种组织工程技术,其发展需要3D打印技术、细胞... 详细信息

3D打印技术由***在1986年第1次提出,称为“立体光固化技术”,即将紫外光照射后的薄层材料打印形成固体3D结构,这种方法后来用于将生物材料塑造成具有三维结构的树脂模型[1].3D生物打印作为一种组织工程技术,其发展需要3D打印技术、细胞生物学和材料学的发展推动.无溶剂系统的发现促使生物材料可以直接打印形成可用于移植的3D支架[2].目前,在临床医学应用中,3D生物打印已被用来制作导管和夹板[3].

关键词：组织工程技术打印技术生物材料器官光固化技术紫外光照射细胞生物学 3D结构

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人外分泌汗腺细胞分离方法的优化

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中国应用生理学杂志 2015年第3期31卷 235-237,I0004页

作者：赵换军赵洪良谭志军陈艳许永安张茂张翠萍付小兵天津医科大学天津300070 解放军总医院第一附属医院全军创伤修复与组织再生重点实验室北京100048 浙江大学医学院附属第二医院急诊科杭州310009

目的:优化人外分泌汗腺细胞的分离方法,以高效地提取外分泌汗腺细胞。方法:新鲜的皮肤样本剪成组织微粒(大小约1 mm3),A组采用胰蛋白酶-乙二胺四乙酸(EDTA)和胶原酶Ⅱ型(2 mg/ml)体积分数1∶1混合的方法;B组采用传统消化方法,即胶原酶Ⅱ... 详细信息

目的:优化人外分泌汗腺细胞的分离方法,以高效地提取外分泌汗腺细胞。方法:新鲜的皮肤样本剪成组织微粒(大小约1 mm3),A组采用胰蛋白酶-乙二胺四乙酸(EDTA)和胶原酶Ⅱ型(2 mg/ml)体积分数1∶1混合的方法;B组采用传统消化方法,即胶原酶Ⅱ型;C组采用胰蛋白酶-EDTA消化的方法,三组同时置于恒温培养箱内,比较三种方法处理后汗腺细胞团的获取情况。将挑取的汗腺细胞团种于培养皿内,观察细胞贴壁和生长情况,并用流式细胞仪测定各组细胞的增殖指数,最后进行免疫细胞化学检测汗腺细胞标志性蛋白的表达。结果:A组和C组在消化30 min后,镜下可见少部分的汗腺细胞团,2 h后A组游离汗腺细胞团明显增多,C组游离汗腺细胞团很少;B组在消化6 h后,才出现部分游离的汗腺细胞团。将汗腺细胞团培养3 d后发现C组汗腺细胞贴壁情况差、成活细胞少;A组和B组的汗腺细胞贴壁情况良好,培养9 d后呈"铺路石样"生长,细胞增殖指数分别为(18±4)%和(17±6)%,无明显差异,免疫细胞化学结果表明:两组细胞癌胚抗原(CEA)和细胞角蛋白7(CK7)表达均为阳性。结论:胰蛋白酶-EDTA和Ⅱ型胶原酶联合消化法能明显缩短汗腺细胞的分离时间,且不影响细胞的活性和增殖特性。

关键词：汗腺胰蛋白酶胶原酶

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整合素在皮肤创伤修复中的作用

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解放军医学院学报 2015年第6期36卷 628-630,633页

作者：杨少伟孙晓艳付小兵解放军总医院北京100853 解放军总医院第一附属医院全军创伤修复与组织再生重点实验室暨皮肤损伤修复与组织再生北京市重点实验室北京100048

皮肤是机体抵御外界环境中物理、化学伤害的第一道屏障,其依赖于表皮干细胞的增殖和分化而不断自我更新。整合素是一类细胞黏附受体,其调控细胞一细胞外基质反应,连接细胞外环境与细胞内信号通路,广泛参与增殖、分化和生存等细胞基本活... 详细信息

皮肤是机体抵御外界环境中物理、化学伤害的第一道屏障,其依赖于表皮干细胞的增殖和分化而不断自我更新。整合素是一类细胞黏附受体,其调控细胞一细胞外基质反应,连接细胞外环境与细胞内信号通路,广泛参与增殖、分化和生存等细胞基本活动。本文就整合素分子在调控表皮干细胞的黏附、迁移、信号转导研究进展作一综述,从而为实现皮肤创伤的完美修复提供新的视角。

关键词：整合素基底膜表皮干细胞创伤修复

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小型猪耐甲氧西林金黄色葡萄球菌感染创面模型的建立

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感染．炎症．修复 2015年第2期16卷 86-90,F0002页

作者：周文芳黄瑾马奎耿志军孙同柱韩松蒋达和王择胜黎君友解放军总医院全军创伤修复与组织再生重点实验室暨皮肤损伤修复与组织再生北京市重点实验室北京100048 武汉摩尔生物科技有限公司

目的：建立耐药菌感染创面模型，为研究抗菌药物提供可靠稳定的动物模型。方法：在3～4个月龄小型猪背部脊柱中线旁开4cm处用直径16mm的切割器每侧钻出6个至深筋膜的圆形切口，创面间隔3cm。将创面随机分为两组，一侧为耐甲氧西林金黄... 详细信息

目的：建立耐药菌感染创面模型，为研究抗菌药物提供可靠稳定的动物模型。方法：在3～4个月龄小型猪背部脊柱中线旁开4cm处用直径16mm的切割器每侧钻出6个至深筋膜的圆形切口，创面间隔3cm。将创面随机分为两组，一侧为耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）感染组，于创面形成后30min接种MRSA菌液0．1ml（1×10^8CFU／cm^2）；对侧为对照组，接种等体积生理盐水。伤后不同时间进行创面炎症反应及愈合的大体观察和组织学观察，测量创面面积，进行组织细菌学检测。结果：MRSA感染2d后创面暗红、创缘肿胀、渗出多、有大量白色分泌物且愈合慢；感染后2、10d创面组织培养菌落数均超过1×10^8CFU／g；对照组2d和10d组织培养菌落数为1×10^5CFU／g，不足以影响伤口正常愈合。组织学观察显示感染后2、10d，MRSA感染组较阴性对照组炎症细胞明显增多、肉芽组织生长缓慢。对照组新生肉芽生长较快，有大量新生血管生成。结论：采用小型猪背部2cm。的全层皮肤缺损创面接种1×108cFu／cm。MRSA的方法，2d后可以形成MRSA感染创面，且具有创面面积可控、感染效果稳定的优点。

关键词：小型猪创面耐药菌 MRSA感染动物模型

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骨髓间充质干细胞和其来源的汗腺样细胞microRNAs差异表达分析

骨髓间充质干细胞和其来源的汗腺样细胞microRNAs差异表达分析

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首届全国组织修复与再生医学大会暨国际组织修复与再生医学学术研讨会

作者：谭志军张翠萍付小兵解放军总医院全军创伤修复与组织再生重点实验室暨皮肤损伤修复与组织再生北京市重点实验室北京100048

目的：对骨髓间充质干细胞(human bone marrow mesenchymal stem cells,hBM-MSCs)和其来源的汗腺样细胞进行microRNAs差异表达谱分析,寻找人骨髓间充质干细胞向汗腺样细胞分化的关键microRNAs,并初步预测其功能。方法：原代培养鉴定hBM-...

目的：对骨髓间充质干细胞(human bone marrow mesenchymal stem cells,hBM-MSCs)和其来源的汗腺样细胞进行microRNAs差异表达谱分析,寻找人骨髓间充质干细胞向汗腺样细胞分化的关键microRNAs,并初步预测其功能。方法：原代培养鉴定hBM-MSCs和汗腺细胞,当汗腺细胞密度达到70～80％时进行热休克处理,然后将其与hBM-MSCs通过Transwell进行共培养诱导;10天后,分别提取hBM-MSCs和其来源的汗腺样细胞的总RNA,纯化标记后,进行microRNAs杂交和数据分析以及靶基因预测。并将关键microRNA分别转染人骨髓间充质干细胞并继续与热休克的汗腺细胞间接共培养诱导7天,之后采用免疫荧光、RT-PCR和Western Blot技术检测转染并间接共培养对细胞的诱导效果。

关键词：

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人骨髓间充质干细胞转分化为汗腺样细胞的DNA甲基化调控机制

人骨髓间充质干细胞转分化为汗腺样细胞的DNA甲基化调控机制

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首届全国组织修复与再生医学大会暨国际组织修复与再生医学学术研讨会

作者：赵焕军赵宏良张翠萍付小兵解放军总医院全军创伤修复与组织再生重点实验室暨皮肤损伤修复与组织再生北京市重点实验室北京100048

目的：筛选与人骨髓间充质干细胞(MSCs)转分化为汗腺样细胞过程密切相关基因启动子位点,探索DNA甲基化调控MSCs的转分化机制.方法：热休克汗腺诱导MSCs共培养10d,免疫组化检测MSCs转分化后KRT19和CEA标志,诱导MSCs分化0d、5d和10d用RT-...

目的：筛选与人骨髓间充质干细胞(MSCs)转分化为汗腺样细胞过程密切相关基因启动子位点,探索DNA甲基化调控MSCs的转分化机制.方法：热休克汗腺诱导MSCs共培养10d,免疫组化检测MSCs转分化后KRT19和CEA标志,诱导MSCs分化0d、5d和10d用RT-PCR和Western blots检测CEA基因和蛋白表达情况.芯片检测MSCs分化前后45万个基因位点DNA甲基化水平变化.从甲基化水平显著变化基因位点中,筛选出与MSCs转分化密切相关基因位点.用飞行质谱技术检测关键基因启动子的甲基化水平在诱导分化前后的水平变化;筛选出的关键基因构建质粒并转染MSCs并培养,培养基内加入10ng/μL5Azd,应用RT-PCR和Western blot检测转染5天CEA基因和蛋白表达.结果：MSC经共培养10d后KRT19和和CEA免疫荧光染色示阳性,对照组KRT19和CEA示阴性.芯片检测MSC诱导分化前后共有76个基因位点的DNA甲基化水平具有明显差异(0.169‰),甲基化水平明显降低51个位点,其中SLC12A7、ENKUR、LRWD1、Pax6和HDAC4等位点甲基化水平显著下降.甲基化水平明显升高25个位点,其中Hoxd11、ADARB2、ANGPT1、UNC84A和BMP6等位点DNA甲基化水平明显升高.提示MSC转分化过程中DNA甲基化水平以下调为主.经过比较分析,选择Pax6基因位点进行飞行质谱检测,结果提示该位点甲基化水平明显降低.质粒构建Pax6转染MSCs,培养5天CEA基因表达明显增高,CEA蛋白阳性表达.结论：DNA去甲基化在MSCs分化过程中起到重要的调控作用,Pax6基因与5azd协同作用可能调控CEA基因表达影响MSC转分化.

关键词：

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用动物固定装置观察负压封闭敷料对小型猪全层皮肤缺损创面修复的影响

用动物固定装置观察负压封闭敷料对小型猪全层皮肤缺损创面修复的...

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首届全国组织修复与再生医学大会暨国际组织修复与再生医学学术研讨会

作者：周文芳黎君友孙同柱吴志谷付小兵解放军总医院全军创伤修复与组织再生重点实验室暨皮肤损伤修复与组织再生北京市重点实验室北京100048

目的：负压封闭敷料已在临床创面修复广泛应用,并获得较好的愈合效果,但对其作用机理我们还不甚了解,本文通过自制动物固定装置,观察武汉维斯第牌负压封闭引流材料(VDS)对小型猪全层皮肤缺损创面修复作用的影响.方法：动物固定装置：由...

目的：负压封闭敷料已在临床创面修复广泛应用,并获得较好的愈合效果,但对其作用机理我们还不甚了解,本文通过自制动物固定装置,观察武汉维斯第牌负压封闭引流材料(VDS)对小型猪全层皮肤缺损创面修复作用的影响.方法：动物固定装置：由不锈钢材料构成,包括可自由移动架、两用悬吊棒、悬吊制式服装、接大小便托盘和可放置负压吸引机和吸引罐的悬挂篮组成.动物模型制备：将4月龄小型猪全麻、备皮、消毒后于脊柱两侧各制一个全层皮肤缺损创面(4.5cm×4.5cm).实验分组：A组对照组,凡士林油纱布和4层无菌纱布覆盖包扎;B组125mmHg持续负压24h,至伤后24d.伤后分别将小型猪悬挂于动物固定装置上,单笼喂养,自由饮食.通过大体观察、皮下血流监测和细菌学判断负压封闭敷料对小型猪全层皮肤缺损创面的修复作用.结果：伤后早期大体观察显示两组创面新鲜,均无脓性分泌物.A组创面渗出物较B组多,B组创面无明显分泌物、无水肿.伤后7d,两组创面上皮生长较明显,其上皮化率均能达40％～60％;两组创面有不同程度的肉芽组织生长,A组肉芽填充率＜30％较B组差,B组能达50％以上.伤后14d,两组创面基本长平,A组肉芽填充率低于90％,B组可达到90％以上.伤后21d,A组上皮化率较B组差,B组能达到80％以上.伤后24d两组创面基本愈合.皮下血流监测,伤后4d B组血流灌注量较A高.伤后7d～21d两组血流灌注量均有所下降,但B组仍高于A组.伤后28d B组血流灌注量恢复到伤前水平,A组较高.细菌监测,伤后4d和7d大多创面细菌明显增多,A组细菌量较B组高.10d～21 d两组创面细菌均逐步下降,A组略高于B组.结论：动物固定装置能满足负压封闭引流材料实验研究的需要.在28d的实验中能保证小型猪固定良好,方便更换敷料.在固定状态下小型猪能自由饮水,进食和排便;同时能保证激光多普勒成像仪和其他相关指标的正常检测.负压封闭引流下创面血流量很快增加,能够有效除去创面的渗透液,减轻创面与创周的组织水肿,促进大量新生肉芽组织形成,为上皮爬行提供了基础,负压可促进创面引流的畅通,将存留于创面局部的坏死组织、细菌、分泌物等吸出,减少了创面局部细菌的繁殖.通过连续治疗后使用负压引流的方法创面愈合效果明显较对照组好.

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人骨髓间充质干细胞转分化为汗腺样细胞过程中microRNA介导的NF-κB信号通路调节

人骨髓间充质干细胞转分化为汗腺样细胞过程中microRNA介导的NF-...

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首届全国组织修复与再生医学大会暨国际组织修复与再生医学学术研讨会

作者：陈艳张翠萍付小兵解放军总医院全军创伤修复与组织再生重点实验室暨皮肤损伤修复与组织再生北京市重点实验室北京100048

目的：利用microRNA新技术,寻找MSCs分化为汗腺样细胞过程中的关键microRNA及其介导的信号通路调控,并验证microRNA细胞生物功能.方法：采用1 μg/ml EDA-A1、50 ng/ml EGF以及汗腺热休克损伤微环境,通过transwell间接培养板,诱导MSCs...

目的：利用microRNA新技术,寻找MSCs分化为汗腺样细胞过程中的关键microRNA及其介导的信号通路调控,并验证microRNA细胞生物功能.方法：采用1 μg/ml EDA-A1、50 ng/ml EGF以及汗腺热休克损伤微环境,通过transwell间接培养板,诱导MSCs分化为SGLCs.然后通过microRNA基因芯片检测,分析MSCs诱导前后,以及正常汗腺的microRNA差异表达谱,筛选出表达差异显著的microRNAs,通过生物信息学进行靶点预测,并将关键microRNA模拟物转染MSCs,进行靶基因验证,分析其参与的信号通路网络,并进一步验证其生物功能.

关键词：

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微小RNA治疗从实验室到临床需突破的瓶颈限制

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感染．炎症．修复 2015年第2期16卷 114-117页

作者：陈艳张翠萍付小兵解放军总医院生命科学院北京100853 北京军区总医院药理科北京100700 解放军总医院第一附属医院全军创伤修复与组织再生重点实验室暨皮肤损伤修复与组织再生北京市重点实验室北京100048

微小RNA（miRNA）是由18～24个核苷酸组成的单链非编码小RNA。研究预测，人类基因组中超过60％的基因受miRNAs调节．miRNAs在各种生理、病理过程和疾病治疗中发挥着重要作用。作为分子生物领域一个新的研究热点，当前miRNAS的研究发展... 详细信息

微小RNA（miRNA）是由18～24个核苷酸组成的单链非编码小RNA。研究预测，人类基因组中超过60％的基因受miRNAs调节．miRNAs在各种生理、病理过程和疾病治疗中发挥着重要作用。作为分子生物领域一个新的研究热点，当前miRNAS的研究发展迅速，获得了重要的研究进展，但miRNA研究仍处于早期阶段，尤其面向临床应用时，许多现实问题和技术性瓶颈仍有待于解决。

关键词：临床应用微小RNA 治疗实验室 miRNAs 非编码小RNA 人类基因组 miRNAS

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