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第十一届全国中西医结合肾脏病学术会议

作者：谢院生刘晓峦陈香美中国人民解放军总医院全军肾脏病研究所暨重点实验室

无论是急性肾损伤还是慢性肾脏病,都存在损伤和修复的病理生理过程。当损伤的因素占主导地位时,肾脏出现损伤、疾病、功能减退;当机体修复的因素占主导地位时,损伤和疾病好转、结构重塑、功能恢复。肾脏病医生的首要任务就是减轻肾脏损... 详细信息

无论是急性肾损伤还是慢性肾脏病,都存在损伤和修复的病理生理过程。当损伤的因素占主导地位时,肾脏出现损伤、疾病、功能减退;当机体修复的因素占主导地位时,损伤和疾病好转、结构重塑、功能恢复。肾脏病医生的首要任务就是减轻肾脏损害、促进肾脏修复。遗憾的是,迄今为止直接针对成熟肾脏损伤进行研究,对治疗没有多大帮

关键词：急性肾损伤生长因子肾发育肾小球内皮细胞肾小球上皮细胞肾功能恢复修复再生肾单位肾脏发育肾小管细胞肾脏损伤

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利用双向电泳技术分析正常大鼠肾小球蛋白质组方法的建立

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中国中西医结合肾病杂志 2010年第3期11卷 197-199页

作者：吕杨谢院生张术佳李晓帆谢振声杨福全陈香美解放军总医院肾病科全军肾脏病研究所暨重点实验室北京100853 中国科学院生物物理研究所北京100101

目的:利用双向电泳技术分析大鼠肾小球蛋白质,以建立肾小球蛋白质组分析的方法。方法:选取体重约200g的雄性Wistar大鼠,分离肾小球并提取蛋白质。使用24cm、pH3-11的IPG胶条对蛋白质进行一相等电聚焦,采用12.5%聚丙烯酰胺凝胶进行二相... 详细信息

目的:利用双向电泳技术分析大鼠肾小球蛋白质,以建立肾小球蛋白质组分析的方法。方法:选取体重约200g的雄性Wistar大鼠,分离肾小球并提取蛋白质。使用24cm、pH3-11的IPG胶条对蛋白质进行一相等电聚焦,采用12.5%聚丙烯酰胺凝胶进行二相分离。Decyder软件分析凝胶上的蛋白质点,切取1个蛋白质点,经过胰蛋白酶消化后,使用飞行质谱获取肽指纹谱,并用Mascot软件分析。结果:纯化的肾小球纯度在90%以上,在双向电泳的凝胶上,共发现1240个肾小球蛋白质;切取的蛋白质点经鉴定为CAPZA2蛋白质,Mascot得分为137分(阈值为61分)。结论:成功建立了双向电泳分析大鼠肾小球蛋白质组的方法。

关键词：双向电泳肾小球 CAPZA2

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p21^(WAF1/CIP1/SDI1)在大鼠肾脏组织的增龄性变化及意义

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实用老年医学 2010年第2期24卷 113-117页

作者：卓莉刘伏友蔡广研汪杨师锁柱中国人民解放军总医院肾内科全军肾脏病研究所暨重点实验室北京市100853 中南大学湘雅二医院肾病内科中南大学肾脏病研究所湖南省长沙市410011

目的研究p21野生型p53活化片段1/细胞周期蛋白依赖性激酶影响蛋白1/衰老细胞衍生抑制剂1(p21WAF1/CIP1/SDI1)在大鼠肾脏中随年龄增长的表达变化规律。方法取3月龄、12月龄及24月龄健康雄性Wistar大鼠肾组织进行衰老相关β-半乳糖苷酶(SA... 详细信息

目的研究p21野生型p53活化片段1/细胞周期蛋白依赖性激酶影响蛋白1/衰老细胞衍生抑制剂1(p21WAF1/CIP1/SDI1)在大鼠肾脏中随年龄增长的表达变化规律。方法取3月龄、12月龄及24月龄健康雄性Wistar大鼠肾组织进行衰老相关β-半乳糖苷酶(SA-β-gal)活性染色,TUNEL法检测细胞凋亡,采用逆转录多聚酶链反应(RT-PCR)和Western印迹法(Westernblotassay)分别在基因及蛋白质表达水平上检测肾脏组织中p21WAF1/CIP1/SDI1的表达变化,并用免疫组化法检测p21WAF1/CIP1/SDI1在肾脏组织中的表达与定位。结果大鼠肾脏组织SA-β-gal活性随年龄增长逐渐增强,凋亡细胞也随年龄增长逐渐增加(P<0.05);p21WAF1/CIP1/SDI1mRNA表达随年龄增长逐渐增强,不同月龄比较差异有统计学意义(P<0.05)。Western印迹亦显示p21WAF1/CIP1/SDI1蛋白表达随鼠龄增加逐渐增强(P<0.05)。免疫组化结果显示,p21WAF1/CIP1/SDI1蛋白表达于大鼠肾小球足细胞,其在肾小管与间质细胞中也有表达,且随年龄增长表达增加(P<0.05)。结论p21WAF1/CIP1/SDI1在大鼠肾脏组织中的表达随年龄增加而增强,可作为肾脏组织中重要的衰老指标。

关键词： p21WAF1/CIP1/SDI1 肾脏衰老大鼠

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不同抗凝剂对血液透析过程凝血状态的影响

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中华肾脏病杂志 2009年第5期25卷 335-340页

作者：张莉孙雪峰张冬马志芳茅玉梅魏日胞陈香美解放军总医院全军肾脏病研究所暨重点实验室北京100853

目的探讨血液透析（HD）中不同抗凝剂的特点和合理选择。方法选取HD患者21例，分为普通肝素（UFH）组，10例，首剂3000U，追加1000U／h，下机前1h停止追加；达肝素钠组，11例，达肝素钠5000U透前30min静脉注射。另选取伴有出血倾向的HD... 详细信息

目的探讨血液透析（HD）中不同抗凝剂的特点和合理选择。方法选取HD患者21例，分为普通肝素（UFH）组，10例，首剂3000U，追加1000U／h，下机前1h停止追加；达肝素钠组，11例，达肝素钠5000U透前30min静脉注射。另选取伴有出血倾向的HD患者10例，作为阿加曲班组，首剂8mg，追加6～8mg／h，总剂量1．5μg·kg^-1·min^-1，下机前20min停止追加。同时选取8例健康人为对照。在上机前管路动脉端、HD2h管路动、静脉端及下机前管路动脉端采血。应用Sonoclot分析仪测定前玻璃珠激活的凝血时间（gbACT）、凝血速率（CR）及血小板功能（PF）；酶联免疫法测定前凝血酶原片段1＋2（PF1＋2）及血小板表面仪颗粒膜蛋白（GMP-140）。健康对照组采血1次测定上述指标。结果（1）与健康对照组比较，全部患者上机前CR、PF1＋2和PF、GMP-140均显著增高（P〈0．05）。（2）UFH组：与透析前比较，HD管路2h动、静脉端及下机前的gbACT显著延长（P〈0．05），CR、PF和PF1＋2均显著减少（P〈0．05）；与健康对照组比较，下机前gbACT显著延长（P〈0．05），CR显著减少（P〈0．05）。（3）达肝素钠组：与透析前比较，HD管路2h动脉端的gbACT显著延长（P〈0．05），HD管路2h的动、静脉端的CR和PF1＋2均显著减少（P〈0．05），下机前CR仍减少（P〈0．05），但PF1＋2差异无统计学意义。2h管路动脉端gbACT延长与CR减少值大于静脉端；与健康对照组比较，下机前gbACT延长（P〈0．05），但CR差异无统计学意义。（4）阿加曲班组：与透析前比较，上机后的gbACT均无明显变化；管路2h的动、静脉端的CR均显著减少（P〈0．05），而以静脉端更明显；2h管路动脉端的CR与健康对照组相比，差异无统计学意义；下机前的CR大于对照组（P〈0．05）；在监测过程中PF1＋2呈上升趋势。结论UFH具有较强的抗凝血作用，HD过程中和结束后均有较大出血风险。达肝素钠具有良好的抗凝作用，但HD过程中有出血风险。阿加曲班适用于有出血或出血倾向的HD患者。

关键词：血液透析滤过血液凝固肝素达肝素阿加曲班

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氧化低密度脂蛋白与糖尿病肾病的关系研究进展

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中国实用内科杂志 2009年第8期29卷 749-751页

作者：梁艳玲孙雪峰解放军总医院全军肾脏病研究所暨重点实验室北京100853

氧化应激是糖尿病肾病的重要发病机制之一。近年来氧化低密度脂蛋白(Ox-LDL)在糖尿病肾病发生、发展上的作用越来越受到关注,再度成为研究热点。本文综述了近年来关于Ox-LDL的形成及代谢机制、糖尿病肾病进展中Ox-LDL的变化及其临床意义... 详细信息

氧化应激是糖尿病肾病的重要发病机制之一。近年来氧化低密度脂蛋白(Ox-LDL)在糖尿病肾病发生、发展上的作用越来越受到关注,再度成为研究热点。本文综述了近年来关于Ox-LDL的形成及代谢机制、糖尿病肾病进展中Ox-LDL的变化及其临床意义,以及针对Ox-LDL一些新的治疗措施,以进一步理解Ox-LDL在糖尿病肾病发病、进展机制上的作用,为临床有效治疗糖尿病肾病提供新思路。

关键词：氧化低密度脂蛋白糖尿病肾病

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达肝素钠治疗肾病综合征高凝状态

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中华肾脏病杂志 2009年第7期25卷 561-562页

作者：张莉孙雪峰黄静张金萍魏日胞陈香美解放军总医院肾内科全军肾脏病研究所暨重点实验室北京100853

合理抗凝是肾病综合征（NS）治疗的重要部分。低分子肝素（LMWH）虽然目前应用于NS患者治疗，但有效剂量和给药方式尚不清楚。本研究通过应用Sonoclot分析仪及酶联免疫法动态监测达肝素钠干预前后NS患者的凝血指标，探讨LMWH治疗NS的合... 详细信息

合理抗凝是肾病综合征（NS）治疗的重要部分。低分子肝素（LMWH）虽然目前应用于NS患者治疗，但有效剂量和给药方式尚不清楚。本研究通过应用Sonoclot分析仪及酶联免疫法动态监测达肝素钠干预前后NS患者的凝血指标，探讨LMWH治疗NS的合理用法。

关键词：肾病综合征达肝素钠治疗高凝状态 Sonoclot 低分子肝素酶联免疫法给药方式

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血清乙型肝炎病毒DNA载量对乙型肝炎相关性肾炎临床及病理表现的影响

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解放军医学杂志 2009年第10期34卷 1181-1184页

作者：李平魏日胞汤力陈仆师锁柱尹忠陈香美解放军总医院肾病科全军肾脏病研究所暨重点实验室北京100853

目的研究血清乙型肝炎病毒(HBV DNA)载量对乙型肝炎病毒相关性肾炎(HBV-GN)的临床表现及肾脏病理的影响。方法根据HBV DNA复制程度将135例患者分为4组:病毒复制阴性组(n=52)、低度复制组(n=21)、中度复制组(n=20)、高度复制组(n=42)。... 详细信息

目的研究血清乙型肝炎病毒(HBV DNA)载量对乙型肝炎病毒相关性肾炎(HBV-GN)的临床表现及肾脏病理的影响。方法根据HBV DNA复制程度将135例患者分为4组:病毒复制阴性组(n=52)、低度复制组(n=21)、中度复制组(n=20)、高度复制组(n=42)。收集患者血常规、血生化指标、免疫球蛋白、血清补体C3、C4;尿常规、24h尿蛋白定量,尿NAG酶等数据。用半定量积分法分析各组间临床指标与病理表现的差异。结果随着血清HBV DNA载量的增加,患者中肾病综合征比例增高,而慢性肾炎综合征比例下降(P<0.01)。随着血清HBV DNA载量的增加,患者尿蛋白定量升高(P<0.01),血浆白蛋白降低(P<0.05),血清C3、C4降低(P<0.05);膜性肾病患者肾小球损伤加重,IgA肾病的患者小管及间质损害加重。病毒复制阴性组乙肝标记物沉积以HbsAg为主,而中、低度复制组以HbcAg和HBsAg共同沉积为主,与阴性组比较差异有统计学意义(P<0.01)。随着血清HBV DNA的增加,肾脏C4沉积增加,与血清HBV DNA有一定相关性(r=0.343,P<0.01)。结论随着血清HBV DNA载量的增加,HBV-GN患者的临床及肾脏病理表现加重,相关结果可为HBV-GN患者的抗病毒治疗提供依据。

关键词：肝炎乙型肾炎 DNA 病毒

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雷帕霉素对肾小球系膜细胞增殖及凋亡的影响

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中华肾脏病杂志 2009年第11期25卷 849-852页

作者：傅博张四方卓莉蔡广研谢院生魏日胞马强陈香美解放军总医院肾内科全军肾脏病研究所暨重点实验室北京100853

目的观察不同浓度雷帕霉素对大鼠肾小球系膜细胞增殖及凋亡的影响，探讨其可能的作用机制。方法使用不同浓度雷帕霉素（1μg／L、2μg／L、4μg／L、8μg／L、16μg／L）处理大鼠肾小球系膜细胞，并设正常对照组。MTT法测不同浓度雷帕... 详细信息

目的观察不同浓度雷帕霉素对大鼠肾小球系膜细胞增殖及凋亡的影响，探讨其可能的作用机制。方法使用不同浓度雷帕霉素（1μg／L、2μg／L、4μg／L、8μg／L、16μg／L）处理大鼠肾小球系膜细胞，并设正常对照组。MTT法测不同浓度雷帕霉素干预24h、48h、72h后对细胞增殖的影响，并描记生长曲线。干预72h后，采用RT-PCR和Western印迹法分别检测各浓度雷帕霉素组细胞周期负调蛋白p27和p53的mRNA和蛋白表达变化；用流式细胞计量术检测各浓度雷帕霉素组细胞周期及凋亡率。结果小剂量雷帕霉素（1μg／L）对系膜细胞增殖即具有明显的抑制作用，停滞于G1期的细胞数明显增加，但对系膜细胞凋亡无明显影响。较大剂量雷帕霉素（8～16μg／L）能够明显增加肾小球系膜细胞凋亡。雷帕霉素能够增加肾小球系膜细胞p27、p53mRNA和蛋白表达，且呈剂量依赖性。结论雷帕霉素可能通过增加p27、p53表达抑制肾小球系膜细胞增殖和促进系膜细胞凋亡。

关键词：西罗莫司肾小球系膜细胞细胞增殖细胞凋亡

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大鼠肾脏组织哺乳动物雷帕霉素靶蛋白增龄性的表达变化

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中华肾脏病杂志 2009年第3期25卷 237-238页

作者：卓莉蔡广研刘伏友陈俊香张四方师锁柱彭佑铭刘维萍陈香美解放军总医院肾内科全军肾脏病研究所暨重点实验室北京100853 中南大学湘雅二医院肾病内科中南大学肾脏病研究所

肾脏是衰老较快的器官之一，随年龄的增长出现肾小球肥大、系膜增生、肾小球硬化和肾小管-间质纤维化等病理变化。但这一现象的分子机制并不完全清楚。研究发现，雷帕霉素可显著抑制糖尿病肾病早期及单侧肾切除后代偿性的肾小球肥大，... 详细信息

肾脏是衰老较快的器官之一，随年龄的增长出现肾小球肥大、系膜增生、肾小球硬化和肾小管-间质纤维化等病理变化。但这一现象的分子机制并不完全清楚。研究发现，雷帕霉素可显著抑制糖尿病肾病早期及单侧肾切除后代偿性的肾小球肥大，并且它还能减轻蛋白尿相关的肾小管-间质的炎性反应及纤维化。

关键词：雷帕霉素靶蛋白肾脏组织肾小管-间质纤维化表达变化哺乳动物增龄性肾小球肥大大鼠

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雷帕霉素对高糖诱导肾小球系膜细胞增殖的影响

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中国糖尿病杂志 2009年第2期17卷 139-142页

作者：卓莉刘伏友傅博张四方陈俊香蔡广研陈香美中南大学湘雅二医院肾病内科中南大学肾脏病研究所长沙410011 解放军总医院肾病内科全军肾脏病研究所暨重点实验室解放军总医院肾病内科

目的探讨雷帕霉素对高糖诱导肾小球系膜细胞(GMC)增殖的影响及其可能涉及的途径。方法高糖培养GMC,以不同剂量雷帕霉素干预,MTT及流式细胞仪等方法观察雷帕霉素对细胞增殖和周期的影响,RT-PCR、Western印迹观察细胞Cyclin D1、CyclinE和... 详细信息

目的探讨雷帕霉素对高糖诱导肾小球系膜细胞(GMC)增殖的影响及其可能涉及的途径。方法高糖培养GMC,以不同剂量雷帕霉素干预,MTT及流式细胞仪等方法观察雷帕霉素对细胞增殖和周期的影响,RT-PCR、Western印迹观察细胞Cyclin D1、CyclinE和p27^(KIP1)的变化。结果高糖刺激下,GMC增殖明显;雷帕霉素能抑制这一作用,且呈剂量依赖性,并下调Cyclin D1、Cyclin E的基因及蛋白水平,上调p27^(KIP1)的蛋白表达;与对照组相比,高糖组G_0/G_1期细胞减少,S期细胞比例增加(P均<0.05);雷帕霉素干预后,G_0/G_1期细胞升高,S期细胞比例减少(P均<0.05)。结论雷帕霉素可抑制高糖状态下GMC的增殖,且呈剂量依赖性;其可能机制是通过下调Cyclin D1、Cyclin E及上调p27^(KIP1),参与了G_1/S期阻滞。

关键词：雷帕霉素系膜细胞,肾小球高糖细胞周期细胞周期蛋白质类

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