检索结果-内蒙古大学图书馆

肝脏 2003年第3期8卷 60-61页

作者：纪冬董菁成军李莉杨雪莲解放军第三○二医院传染病研究所基因治疗研究中心北京100039

暴发性肝衰竭 (FHF)是由于肝细胞大量坏死而出现以肝功能严重受损为特征的综合征。目前临床治疗尚无特效药物 ,以综合治疗为主 ,但其效果不佳 ,患者通常死于继全身炎症反应综合征 (systemicinflammatoryresponsesyndrome ,SIRS)后的严... 详细信息

暴发性肝衰竭 (FHF)是由于肝细胞大量坏死而出现以肝功能严重受损为特征的综合征。目前临床治疗尚无特效药物 ,以综合治疗为主 ,但其效果不佳 ,患者通常死于继全身炎症反应综合征 (systemicinflammatoryresponsesyndrome ,SIRS)后的严重感染[1] ,其病死率高达 80 %～ 90 % ,尤其合并有其他疾病时病死率更高。引起严重肝炎发病的原因有很多 ,但大部分是由病毒感染和药物所致。本文仅就免疫受损宿主的乙型肝炎病毒 (HBV)再激活所致的暴发性肝衰竭进行阐述。免疫受损宿主概念指的是患有免疫缺陷性疾病或使用细胞毒性或免疫抑制剂药物的患者。一般包括肿瘤、器官或组织移植而需使用免疫抑制剂治疗的患者以及人免疫缺陷病毒(HIV)感染者[2 ] 。免疫受损宿主的免疫功能发生慢性损害 ,使他们具有高风险的机会性或非机会性感染。受损免疫指的是免疫系统功能低下的任何情况。在一些情况下 ,对特定抗原的受损免疫反应取决于遗传背景。从这方面来讲 ,免疫受损宿主可能对某一特定抗原产生受损免疫 ,而对其他抗原的免疫反应则是正常的。例如 ,某些人对HBV不产生免疫反应 ,从而允许HBV对机体产生更多的...

关键词：乙型肝炎病毒再激活暴发性肝衰竭治疗 a干扰素高效价免疫球蛋白

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丙型肝炎病毒非结构蛋白4B研究进展

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国外医学（病毒学分册） 2003年第1期10卷 10-13页

作者：王建军刘妍成军解放军第三零二医院传染病研究所基因治疗研究中心北京100039

丙型肝炎病毒 (HCV)非结构蛋白 4 B(NS4 B)是至今为止功能尚不明确的 HCV非结构蛋白 ,近年来的研究表明其定位于内质网膜 ,与细胞内膜结构的功能有关。在体外实验中 ,它和 NS4 A一起可以抑制宿主细胞的翻译 ;在一定程度上可以减弱机体... 详细信息

丙型肝炎病毒 (HCV)非结构蛋白 4 B(NS4 B)是至今为止功能尚不明确的 HCV非结构蛋白 ,近年来的研究表明其定位于内质网膜 ,与细胞内膜结构的功能有关。在体外实验中 ,它和 NS4 A一起可以抑制宿主细胞的翻译 ;在一定程度上可以减弱机体对抗病毒药物干扰素 -α(INF-α)的反应 ,同时使病毒可以逃避宿主对病毒的免疫 ;在 HCV病毒的致瘤性方面亦有重要作用。可以与 NS3、NS4 A、NS5 A、NS5 B等相互作用 ,对其它非结构蛋白的功能起协同、促进甚或是下调作用。

关键词：基因定位亚细胞定位丙型肝炎病毒非结构蛋白4B 研究进展

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最早传入北京地区的SARS冠状病毒S基因序列分析和克隆

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中国生物工程杂志 2003年第9期23卷 75-79页

作者：徐东平张政王福生王俊貌盼勇贺雄雷王波金磊汪健解放军第三○二医院传染病研究所北京100039 中国科学院华大基因研究中心北京101300

SARS冠状病毒的spike (S)蛋白对病毒的致病力至关重要 ,也是机体特异性体液和细胞免疫主要针对的靶分子。从北京地区最早发现的SARS患者咽拭子细胞培养上清中提取病毒RNA ,用反转录巢式聚合酶链式反应 (RT PCR)分 6个片段扩增出S基因全... 详细信息

SARS冠状病毒的spike (S)蛋白对病毒的致病力至关重要 ,也是机体特异性体液和细胞免疫主要针对的靶分子。从北京地区最早发现的SARS患者咽拭子细胞培养上清中提取病毒RNA ,用反转录巢式聚合酶链式反应 (RT PCR)分 6个片段扩增出S基因全序列 ,用TA载体克隆后进行DNA序列分析 ,再通过重叠PCR将 6个片段连接成一条完整的S基因并克隆测序。DNA测序结果表明病毒S基因序列与报告的BJ0 1株SARS冠状病毒S基因序列完全一致 ,用重叠PCR将 6个S基因片段连接成了一条完整的S基因 ,插入到pGEM T载体后读序完全正确。上述结果表明最早传入北京地区的病毒与新近报告的BJ0 1株SARS冠状病毒在分子流行病学上具有同源特征 ,重叠PCR技术可以用于有效连接多个基因片段。S区全基因的克隆为进一步研究该基因的功能和DNA疫苗等研究提供了基础。

关键词： SARS 冠状病毒 S基因序列分析克隆非典型肺炎

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乙型肝炎病毒核心启动子的结构及调节研究

引用

世界华人消化杂志 2003年第7期11卷 1006-1008页

作者：杨艳杰成军陈东风刘妍杨倩王建军中国人民解放军第302医院传染病研究所基因治疗研究中心、全军病毒性肝炎防治研究重点实验室北京市100039 中国人民解放军第302医院传染病研究所基因治疗研究中心、全军病毒性肝炎防治研究重点实验室北京市100039 中国人民解放军第三军医大学大坪医院消化内科重庆市400038

0引言乙型肝炎是一种严重威胁人类健康的疾病,呈全球性分布,目前全世界有3.5亿人感染乙型肝炎病毒(HBV),其中相当一部分感染者发展为慢性肝炎,少数还发展为肝硬化甚至肝癌,至今仍缺乏有效控制[1-5].造成这一局面的原因很多,其中关于HBV... 详细信息

0引言乙型肝炎是一种严重威胁人类健康的疾病,呈全球性分布,目前全世界有3.5亿人感染乙型肝炎病毒(HBV),其中相当一部分感染者发展为慢性肝炎,少数还发展为肝硬化甚至肝癌,至今仍缺乏有效控制[1-5].造成这一局面的原因很多,其中关于HBV与肝细胞之间相互作用的分子生物学机制的研究进展相对滞后是严重影响新型治疗技术和新型药物开发与研究的重要原因之一.进一步弄清HBV DNA的复制、转录及调节的过程,对于我们研究乙型肝炎的发病机制具有重要意义.本文仅就乙型肝炎病毒核心启动子(CP)结构及调节近几年的研究进展作一综述.

关键词：乙型肝炎病毒核心启动子结构调节基因突变生物学病毒复制

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丙型肝炎病毒非结构蛋白NS5抗独特型人源单链可变区抗体的筛选与鉴定

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肝脏 2003年第1期8卷 9-11页

作者：钟彦伟成军张忠东李强洪源王琳李莉张玲霞陈菊梅中国人民解放军第三〇二医院传染病研究所基因治疗研究中心全军病毒性肝炎防治研究重点实验室北京100039

目的　制备丙型肝炎病毒 (HCV )非结构蛋白NS5 (NS5 )的抗独特型单链可变区抗体scFv(抗 IdscFv) ,为研制HCVNS5的抗 IdscFv疫苗奠定基础。方法　采用噬菌体表面展示技术 ,将HCVNS5单克隆抗体固相包被于Nunc板 ,从噬菌体单链可变区抗... 详细信息

目的　制备丙型肝炎病毒 (HCV )非结构蛋白NS5 (NS5 )的抗独特型单链可变区抗体scFv(抗 IdscFv) ,为研制HCVNS5的抗 IdscFv疫苗奠定基础。方法　采用噬菌体表面展示技术 ,将HCVNS5单克隆抗体固相包被于Nunc板 ,从噬菌体单链可变区抗体库中经过 5轮“吸附洗脱扩增”筛选过程 ,随机挑选 80个克隆 ,利用酶联免疫吸附试验 (ELISA)、交叉反应和竞争抑制实验 ,对其进行免疫学检测 ,获得与HCVNS5单克隆抗体结合活性较强的抗 IdscFv阳性克隆 ,并对HCVNS5特异性抗 IdscFv的编码序列进行序列测定分析。结果　筛选得到的HCVNS5抗 IdscFv片段由 786bp组成 ,具有结合HCVNS5单克隆抗体的生物学活性和特异性。结论　用噬菌体抗体库技术能够成功地获得HCVNS5的抗 IdscFv。本实验结果为开展用抗 IdscFv防治丙型肝炎的研究创造了条件。

关键词：丙型肝炎病毒非结构蛋白5 抗独特型抗体单链可变区抗体

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多嘧啶序列结合蛋白与丙型肝炎病毒的关系

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世界华人消化杂志 2003年第12期11卷 1956-1959页

作者：党晓燕成军邓红中国人民解放军第302医院传染病研究所基因治疗研究中心西安交通大学第二医院感染科陕西省西安市710004

0 引言多嘧啶序列结合蛋白(polypyrimidine tract bindingprotein,PTB),在大多数哺乳动物细胞及人类原始肝细胞的胞核及胞质中均可检测到,其分子量约为57kD,故也有人称之为***在稳态时定位于核内[1],且可通过能量依赖机制快速穿梭于细... 详细信息

0 引言多嘧啶序列结合蛋白(polypyrimidine tract bindingprotein,PTB),在大多数哺乳动物细胞及人类原始肝细胞的胞核及胞质中均可检测到,其分子量约为57kD,故也有人称之为***在稳态时定位于核内[1],且可通过能量依赖机制快速穿梭于细胞的胞质及胞核.

关键词：多嘧啶序列结合蛋白丙型肝炎病毒细胞因子分子生物学机制

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丙型肝炎病毒非结构区NS3基因在大肠埃希菌中的可诱导性表达

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中华实验和临床病毒学杂志 2002年第1期16卷 85-87页

作者：成军钟彦伟刘妍董菁杨继珍杨守纯解放军第三○二医院传染病研究所基因治疗研究中心北京100039

目的　构建丙型肝炎病毒 (HCV)NS3基因的原核细胞表达载体 ,实现在大肠埃希菌中的可诱导性表达。方法　应用聚合酶链反应 (PCR)技术 ,以美国HCV H株全长cDNA质粒为模板 ,扩增获得NS3基因片段 ,克隆到原核表达载体pET 30C(+)中 ,构建原... 详细信息

目的　构建丙型肝炎病毒 (HCV)NS3基因的原核细胞表达载体 ,实现在大肠埃希菌中的可诱导性表达。方法　应用聚合酶链反应 (PCR)技术 ,以美国HCV H株全长cDNA质粒为模板 ,扩增获得NS3基因片段 ,克隆到原核表达载体pET 30C(+)中 ,构建原核表达载体pET NS3,转化BL2 1(DE3)宿主菌 ,以IPTG诱导 ,获得NS3蛋白的可诱导性表达 ,以HCVNS3的单链可变区抗体 (ScFv)证实表达的NS3蛋白的特异性。结果　以HCVNS3基因序列特异性引物 ,PCR扩增获得 1893bp的NS3DNA片段 ,插入pET 30C(+)表达载体。转化BL 2 1(DE3)受体菌 ,经培养、IPTG诱导 ,获得了重组HCVNS3蛋白的表达 ,以HCVNS3的ScFv证实了表达的重组蛋白HCVNS3的特异性。

关键词：丙型肝炎病毒 NS3 基因表达聚合酶链反应大肠埃希菌

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HCV核心蛋白结合蛋白基因6的克隆

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中华实验和临床病毒学杂志 2002年第4期16卷 351-353页

作者：李克王琳成军张玲霞段惠娟陆荫英杨继珍刘妍夏小兵王刚董菁李莉钟彦伟洪源陈菊梅解放军第三○二医院传染病研究所基因治疗研究中心北京100039

目的　克隆与丙型肝炎病毒 (HCV)核心蛋白结合的肝细胞中的未知蛋白基因。方法　应用酵母双杂交系统 ,构建丙型肝炎病毒核心蛋白诱饵质粒 ,转化酵母AH10 9后与含文库质粒的酵母Y187进行配合 ,在营养缺陷培养基上进行双杂交筛选。筛选出... 详细信息

目的　克隆与丙型肝炎病毒 (HCV)核心蛋白结合的肝细胞中的未知蛋白基因。方法　应用酵母双杂交系统 ,构建丙型肝炎病毒核心蛋白诱饵质粒 ,转化酵母AH10 9后与含文库质粒的酵母Y187进行配合 ,在营养缺陷培养基上进行双杂交筛选。筛选出 30个克隆 ,既能在四缺营养缺陷培养基上生长 (SD Trp Leu Ade His)又能在涂有x α gal的四缺培养平皿上长出蓝色菌落 ,提取此酵母克隆的质粒 ,转化大肠埃希菌后进行测序 ,进行生物信息学分析。结果　分析结果显示 ,其中 6号克隆的测序结果与Genbank中的 2个未知功能序列有 98%的同源性 ,初步证明了此基因与丙型肝炎病毒核心蛋白有结合性。结论　丙型肝炎病毒核心蛋白结合蛋白肝基因克隆成功。

关键词：丙型肝炎病毒病毒核心蛋白类杂交酵母菌基因克隆丙型肝炎

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丙型肝炎病毒核心蛋白与转位蛋白相互作用的研究

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中华医学杂志 2002年第10期82卷 673-677页

作者：李克王琳成军陆荫英张玲霞牟劲松洪源刘妍段惠娟王刚李莉陈菊梅北京解放军第三O二医院传染病研究所基因治疗研究中心 100039

目的　本文为了探讨丙型肝炎病毒 (HCV)核心蛋白 (core)在肝肿瘤中起作用的分子机制 ,研究核心蛋白是否与肿瘤相关蛋白的相互作用。方法　应用酵母双杂交系统 3构建HCV核心蛋白诱饵质粒 ,转化酵母AH10 9后与含文库质粒的酵母Y187进行配... 详细信息

目的　本文为了探讨丙型肝炎病毒 (HCV)核心蛋白 (core)在肝肿瘤中起作用的分子机制 ,研究核心蛋白是否与肿瘤相关蛋白的相互作用。方法　应用酵母双杂交系统 3构建HCV核心蛋白诱饵质粒 ,转化酵母AH10 9后与含文库质粒的酵母Y187进行配合 ,在营养缺陷培养基上进行双杂交筛选。筛选出 30个克隆 ,对既能在四缺营养缺陷培养基上生长 (SD/ Trp Leu His Ade) ,又能在涂有x α gal的四缺培养平皿上长出蓝色菌落 ,提取此酵母克隆的质粒转化大肠杆菌后测序 ,进行生物信息学分析。发现一个可以引起染色体转位的基因即与肿瘤发生有关的基因转位蛋白基因 (Translin)同源。为了进一步证实转位蛋白基因所表达蛋白能与HCV核心蛋白相互作用 ,网织红细胞裂解物进行体外翻译、蛋白之间的免疫共沉淀。结果　结果显示 ,转位蛋白不但在酵母双杂交中能与HCV核心蛋白相互作用 ,而且在体外翻译后也能相互作用。结论　HCV核心蛋白可以和转位蛋白相互作用 ,推测此蛋白可能在HCV致癌中起一定作用 ,部分解释了HCV引起肿瘤的发病机制。

关键词：丙型肝炎病毒核心蛋白转位蛋白相互作用研究

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杜氏利什曼原虫激活蛋白激酶C受体的基因克隆化与序列分析

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中国人兽共患病杂志 2002年第2期18卷 24-27页

作者：成军夏小兵王刚刘妍钟彦伟王琳杨继珍解放军第三二医院传染病研究所基因治疗研究中心北京100039

目的　克隆杜氏利什曼原虫 (LeishmaniadonovaniLd) 1S株激活蛋白激酶C受体 (RACK ,receptorofactivatedpro teinCkinase)的编码基因 ,为应用这种编码T细胞抗原的基因进行基因疫苗的研究奠定基础。方法　体外培养杜氏利什曼原虫 1S株无... 详细信息

目的　克隆杜氏利什曼原虫 (LeishmaniadonovaniLd) 1S株激活蛋白激酶C受体 (RACK ,receptorofactivatedpro teinCkinase)的编码基因 ,为应用这种编码T细胞抗原的基因进行基因疫苗的研究奠定基础。方法　体外培养杜氏利什曼原虫 1S株无鞭毛体 ,常规方法提取制备基因组DNA。以硕大利什曼原虫 (Leishmaniaamjor)的RACK基因的核苷酸序列为参照 ,设计并合成利什曼原虫RACK基因序列特异性的引物。以杜氏利什曼原虫的基因组DNA为模板 ,利用多聚酶链反应(PCR)技术 ,扩增获得了杜氏利什曼原虫RACK的全长编码基因。结果　基因序列测定结果表明 ,杜氏利什曼原虫 1S株RACK基因序列长度为 981bp ,开放读码框架由 831bp组成 ,编码产物为 2 76个氨基酸残基。获得的杜氏利什曼原虫 1S株的RACK基因与来源于硕大利什曼原虫的RACK基因序列同源性达 98% (2 6 4 / 2 6 7)。结论　本研究克隆了杜氏利什曼原虫的RACK基因。

关键词：利什曼原虫激活蛋白激酶C受体基因疫苗 T细胞抗原基因克隆化序列分析

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