检索结果-内蒙古大学图书馆

重庆医科大学学报 2018年第2期43卷 162-166页

作者：杜晓薇韩瑞祎闵鹤鸣李丹丹肖学进包翠芬包翠芳锦州医科大学基础医学院锦州121000 锦州医科大学细胞生物学教研室锦州121000 锦州医科大学基础医学实验教学中心锦州121000 锦州医科大学锦州市中心医院神经内科锦州121000

目的:探讨局灶性脑缺血再灌注损伤(cerebral ischemia reperfusion injury,CIR)时大脑皮质自噬相关蛋白-12(autophagy related protein-12,Atg12)和自噬微管相关蛋白轻链3抗体Ⅱ(autophagy microtubule-associated protein light chain 3 antibodyⅡ,LC3-Ⅱ)的激活规律,在此基础上探讨其对脑组织自噬的影响。方法:实验分为假手术组(sham组)和缺血再灌注组(CIR组),且CIR组下设CIR 0、6、12、24、48、72h共6个亚组。除sham组和CIR 24h组为每组20只外(其中10只用于模型鉴定),其余为每组10只。采用大脑中动脉栓塞术制备局灶性脑缺血再灌注模型,再灌注24 h后采用神经功能评分、2,3,5-三苯基氯化四氮唑(2,3,5-Triphenyltetrazolium chloride,TTC)染色、脑组织含水量来鉴定脑缺血模型是否成功。采用免疫组化和免疫印迹方法检测大脑皮质Atg12和LC3-Ⅱ的表达规律。结果:与sham组比较,CIR 24h组可见明显的神经功能缺损、脑梗死和明显的脑水肿。免疫组化结果显示,Atg12和LC3-Ⅱ在大鼠脑缺血再灌注6 h开始表达[阳性率分别为(15.49±4.18)%、(18.54±3.62)%],在24~48 h达高峰[(33.63±3.26)%、(29.62±1.73)%],72 h之后逐渐减弱[(24.90±3.96)%、(20.36±3.51)%]。免疫印迹结果显示,Atg12和LC3-Ⅱ在大鼠脑缺血再灌注6 h开始表达[表达量为(0.372 3±0.076 5)、(0.148 4±0.011 5)],在24~48 h达高峰[(0.741 7±0.071 8)、(0.451 3±0.019 0)],72 h之后逐渐减弱[(0.365 0±0.042 0)、(0.245 1±0.030 3)]。结论:脑缺血时Atg12和LC3-Ⅱ在调节脑缺血的脑组织自噬方式中具有重要的作用。

关键词：自噬脑缺血再灌注自噬相关蛋白-12 自噬微管相关蛋白轻链3抗体Ⅱ

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教学实验常用细菌鞭毛染色条件的研究

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继续医学教育 2018年第1期32卷 141-142页

作者：刘美杉孙梦哲郭佳媛陈豪郑群首都医科大学基础医学院临床医学系北京100069 首都医科大学基础医学实验教学中心北京100069

目的比较培养条件及制片方法对变形杆菌鞭毛染色效果的影响,找出最适条件。方法将变形杆菌接种于不同培养基,培养不同时间,采取不同孵化制片方法,控制单一变量,染色镜检,比较最佳染色条件。结果血琼脂培养基中培养的细菌鞭毛粗大清晰,... 详细信息

目的比较培养条件及制片方法对变形杆菌鞭毛染色效果的影响,找出最适条件。方法将变形杆菌接种于不同培养基,培养不同时间,采取不同孵化制片方法,控制单一变量,染色镜检,比较最佳染色条件。结果血琼脂培养基中培养的细菌鞭毛粗大清晰,染色效果最好。普通培养基培养16 h的细菌鞭毛长度合适,结构清晰,染色效果好。37℃温箱孵育10~15 min的细菌鞭毛展开充分,染色效果最好。结论血琼脂培养基是观察鞭毛染色的最适宜培养基;16 h是细菌在普通琼脂培养基中的最适宜培养时间;温箱孵育10~15 min是使鞭毛充分展开的最适宜孵化时间。

关键词：鞭毛染色染色条件镀银染色变形杆菌

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构建基于雨课堂的医学生物化学与分子生物学实验教学新模式

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教育现代化 2019年第52期 215-216页

作者：贺铭彭莉童淑芬梁蕾蕾李小洁金会艳昆明医科大学基础医学院基础医学实验教学中心

随着"互联网+"时代的到来,以智能手机为标志的移动端学习方式逐渐走进高校实验教学课堂,雨课堂教学模式悄然兴起,其所具备的方便、灵活、便捷和高效的特点使教师的课堂更具有活力,医学生的学习更具有效率,师生互动和交流更具... 详细信息

随着"互联网+"时代的到来,以智能手机为标志的移动端学习方式逐渐走进高校实验教学课堂,雨课堂教学模式悄然兴起,其所具备的方便、灵活、便捷和高效的特点使教师的课堂更具有活力,医学生的学习更具有效率,师生互动和交流更具有时效和便捷,教学评价更趋于科学和合理。本文以基因工程实验技术和PCR实验技术为例,简要介绍雨课堂在医学分子生物学实验课程当中的应用,总结该教学模式下所取得的良好教学效果,值得在医学实验教学中大力推广。

关键词：医学生物化学与分子生物学实验教学雨课堂互联网

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局部解剖操作后“大体老师”的综合利用

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基础医学教育 2018年第10期20卷 855-857页

作者：刘丽景朋霍秀丽王璐璐宋一志田明君张梦楠高艳首都医科大学基础医学实验教学中心形态学实验室北京100069 首都医科大学基础医学院人体解剖教研室

将局部解剖操作后的"大体老师"进行综合利用,制作种类多样、数量丰富的人体标本,进行本科生第二课堂实验教学,开展仿真手术训练和临床应用解剖学研究。节约了教学资源,增加了标本储备,实现了实验教学与资源的良性循环;提高学... 详细信息

将局部解剖操作后的"大体老师"进行综合利用,制作种类多样、数量丰富的人体标本,进行本科生第二课堂实验教学,开展仿真手术训练和临床应用解剖学研究。节约了教学资源,增加了标本储备,实现了实验教学与资源的良性循环;提高学生学习兴趣和学习效率,确保实验教学质量;为解决临床实践难题、开展精准外科训练提供学习机会和实践平台;促进基础与临床合作,有利于科研发展,为转化医学研究开辟新途径。

关键词：局部解剖大体老师教学改革

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医学课程整合的初步实践与思考

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基础医学教育 2018年第3期20卷 187-190页

作者：秦琼刘华马惠苹贺俊崎首都医科大学基础医学院生物化学与分子生物学系北京100069 首都医科大学基础医学实验教学中心

医学课程整合是医学教育改革与发展、培养具备胜任力的新型医学综合人才的客观需求。经过近半个世纪的发展,医学课程整合在全世界以及我国得到了广泛的推广,然而目前依然存在不少问题,如全国高等医学教育院校医学课程整合的速度和进展... 详细信息

医学课程整合是医学教育改革与发展、培养具备胜任力的新型医学综合人才的客观需求。经过近半个世纪的发展,医学课程整合在全世界以及我国得到了广泛的推广,然而目前依然存在不少问题,如全国高等医学教育院校医学课程整合的速度和进展不平衡、整合型医学教育人才缺乏等问题。通过加强医学课程整合的顶层设计并进行有效推广、课程整合教材的编写、大力推进医学实验课程之间及其与医学理论课的整合、跨学科教学人才的储备和培养,是进一步有效推进医学课程整合的途径。

关键词：医学课程整合基础医学临床医学教育改革

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乳酸脱氢酶和Warburg效应的研究进展

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生理科学进展 2017年第5期48卷 352-356页

作者：蒋晓月江瑛首都医科大学北京100054 首都医科大学基础医学院基础医学实验教学中心北京100069

糖代谢过程的关键限速酶乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)可提升糖酵解速率和促使局部形成酸性微环境。研究发现LDH与恶性肿瘤关系密切,LDH通过Warburg效应调节乳酸产生,而适当的酸性调控则对LDH形成负反馈调节回路。肿瘤细胞的LD... 详细信息

糖代谢过程的关键限速酶乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)可提升糖酵解速率和促使局部形成酸性微环境。研究发现LDH与恶性肿瘤关系密切,LDH通过Warburg效应调节乳酸产生,而适当的酸性调控则对LDH形成负反馈调节回路。肿瘤细胞的LDH-A基因异常激活常伴随着LDH-B基因的异常失活,LDH-A的异常激活及丙酮酸脱氢酶的失活,可进一步促使丙酮酸转化为乳酸,后者不仅仅作为代谢产物,而且是肿瘤细胞的主要能量来源。

关键词：乳酸脱氢酶恶性肿瘤 Warburg效应

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Gprasp2基因缺陷耳聋小鼠模型的构建及表型鉴定

Gprasp2基因缺陷耳聋小鼠模型的构建及表型鉴定

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2018中国遗传学会第十次全国会员代表大会暨学术讨论会

作者：鲁雅洁魏钦俊姚俊陈智斌邢光前曹新南京医科大学基础医学院医学遗传学系江苏省异种移植重点实验室南京医科大学基础医学院基础医学实验教学中心南京医科大学第一附属医院耳鼻咽喉科

X连锁遗传性耳聋家系极为罕见,相比于其他孟德尔遗传方式,其相关的耳聋致病基因报道也数目极少。G蛋白偶联受体相关分选蛋白2(G protein-coupled receptor associated sorting protein 2,GPRASP2)是本课题组首次鉴定的X-连锁隐性遗传综... 详细信息

X连锁遗传性耳聋家系极为罕见,相比于其他孟德尔遗传方式,其相关的耳聋致病基因报道也数目极少。G蛋白偶联受体相关分选蛋白2(G protein-coupled receptor associated sorting protein 2,GPRASP2)是本课题组首次鉴定的X-连锁隐性遗传综合征型耳聋(Syndromic hearing loss,SHL)的致病基因,也是迄今报道的第二个该遗传方式的致聋基因。GPRASP2是GPRASPs家族成员之一,能够与几种G蛋白偶联受体(G protein-coupled receptors, GPCRs),包括M1毒蕈碱型乙酰胆碱受体和降钙素受体相互作用,调节其活性。以往研究提示GPCRs以及GASPs功能异常主要与神经系统疾病、肿瘤以及免疫炎症等疾病的发生相关,与听觉功能相关性的研究迄今尚未见报道。本研究拟在前期工作的基础上,首先通过CRISPR/Cas9技术,设计靶向与人GPRASP2直系同源的小鼠Gprasp2基因的sgRNAs,通过显微注射C57B6/J小鼠胚胎,从而构建Gprasp2基因缺陷的小鼠动物模型。进一步通过定量PCR、免疫组化(Immunohistochemistry, IHC)鉴定Gprasp2基因的敲除效率;应用听性脑干诱发点位(Auditory brainstem response, ABR)、声音信号恐惧测试方法检测基因敲除小鼠的听力表型;应用核磁共振(magnetic resonance imaging, MRI)观察基因缺陷型小鼠内耳结构变化;HE染色切片观察、免疫荧光铺片激光共聚焦显微镜(Laser scanning confocal microscopy,LSCM)和扫描电镜(Scanning electron microscope,SEM)观察小鼠耳蜗基底膜毛细胞超微结构变化;最后通过旷场实验(Open field test, OFT)、新奇抑制摄食实验(Novelty suppressed-feeding, NSF)、蔗糖偏好测试(Sucrose preference test, SPT)、悬尾实验(Tail suspension test, TST)和强迫游泳实验(Forced swimming test, FST)方法检测小鼠的行为学变化。结果表明,通过CRISPR/Cas9技术成功构建了Gprasp2基因缺陷型小鼠,定量PCR和IHC均显示小鼠的耳蜗组织中Gprasp2表达缺陷。ABR和声音信号恐惧测试结果提示Gprasp2缺陷小鼠听阈显著升高,且对噪声和纯音刺激反应不敏感。MRI结果显示其耳蜗基底回与内耳道底部不完全分离。内耳耳蜗毛细胞的电镜观察显示Gprasp2缺陷小鼠的内耳毛细胞超微结构异常,且排列紊乱。此外,行为学检查结果还提示Gprasp2缺陷型小鼠与野生型小鼠相比呈现明显的兴奋效应,提示Gprasp2基因缺陷除导致耳聋表型外,还可能参与调节神经系统相关信号通路,从而影响个体的行为学变化。本研究成功构建了Gprasp2基因缺陷型耳聋小鼠,为进一步探索Gprasp2基因致聋的分子机制提供了重要的动物模型。

关键词： X连锁遗传综合征型耳聋 Gprasp2 耳蜗动物模型

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光谱法研究DDAB与人免疫球蛋白G的结合作用

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山西医科大学学报 2018年第7期49卷 773-778页

作者：刘丹靳宁杨婷奥瑞芳乔华山西医科大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室太原030001 山西医科大学出生缺陷与细胞再生山西省重点实验室山西医科大学基础医学实验教学中心

目的研究双十二烷基二甲基溴化铵(DDAB)与人免疫球蛋白G(Ig G)之间的相互作用。方法采用紫外和荧光光谱法研究DDAB对Ig G的猝灭作用,并用Stern-Volmer方程、修正的Stern-Volmer方程和热力学方程对动态猝灭常数(KSV)、双分子淬灭速率常数... 详细信息

目的研究双十二烷基二甲基溴化铵(DDAB)与人免疫球蛋白G(Ig G)之间的相互作用。方法采用紫外和荧光光谱法研究DDAB对Ig G的猝灭作用,并用Stern-Volmer方程、修正的Stern-Volmer方程和热力学方程对动态猝灭常数(KSV)、双分子淬灭速率常数(K_q)、静态猝灭结合常数(K_a)、结合位点数(n)及热力学常数进行计算;采用同步荧光光谱、圆二色谱研究DDAB对Ig Gβ-折叠构象的影响。结果 DDAB与Ig G混合后,Ig G 220 nm处强吸收峰峰值下降,弱吸收峰蓝移;随着DDAB浓度增大,Ig G荧光强度逐渐降低,荧光峰红移;随着温度升高,K_(SV)、K_q、K_a、n均减小,热力学常数ΔG<0,ΔS<0,ΔH<0;当DDAB浓度增加时,Ig G的同步荧光峰逐渐降低,圆二色谱图形状和峰位置基本不变。结论加入DDAB引起Ig G荧光猝灭,属于静态猝灭,其作用力主要为氢键和范德华力;DDAB影响Ig G构象,但对Ig Gβ-折叠结构影响较小,这一结果将为构建包含DDAB的阳离子脂质体提供参考。

关键词： DDAB 免疫球蛋白G 紫外光谱荧光光谱圆二色谱

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云南省德宏州不同民族孕龄人群地中海贫血的基因检测结果分析

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热带医学杂志 2019年第9期19卷 1070-1073,1077页

作者：徐咏梅王敏杨明华张翠英黄羽倪俊学张杰张小来贺铭德宏州妇幼保健计划生育服务中心检验科云南德宏678400 西双版纳州勐海县妇幼保健院检验科云南西双版纳666200 云南省第一人民医院云南昆明650032 云南省第一人民医院医学遗传科云南昆明650032 云南省第一人民医院儿科云南昆明650032 昆明医科大学基础医学院基础医学实验教学中心云南昆明650500

目的分析云南省德宏州不同民族育龄人群地中海贫血的基因类型特点,为该地区地中海贫血预防和诊断提供科学依据,以更好地实施地中海贫血防控,减少中重度地贫患儿出生。方法选择2017年1月-2018年12月在德宏州妇幼保健计划生育服务中心进... 详细信息

目的分析云南省德宏州不同民族育龄人群地中海贫血的基因类型特点,为该地区地中海贫血预防和诊断提供科学依据,以更好地实施地中海贫血防控,减少中重度地贫患儿出生。方法选择2017年1月-2018年12月在德宏州妇幼保健计划生育服务中心进行孕前咨询的孕龄夫妇和接受产前筛查的孕妇共1 181例,利用跨越断裂点PCR法(GAP-PCR)及PCR结合反向斑点杂交法(RDB-PCR),对地贫筛查阳性的孕龄夫妇进行α、β地中海贫血基因检测。根据地中海贫血筛查结果分为非地贫组和地贫基因携带组,并比较两组之间平均红细胞体积(MCV)、平均血红蛋白含量(MCH)及血红蛋白浓度(HGB)。结果共检出地中海贫血861例,傣族、景颇族和汉族的阳性检出率分别为69.96%、69.03%和30.77%。其中检出α-地中海贫血468例,β-地中海贫血393例,α复合β-地中海贫血163例,构成比分别为39.63%、33.28%、13.80%;α-地中海贫血中,-α3.7/αα缺失型突变基因频率为72.34%,其次为--SEA/αα缺失型占13.37%;β-地中海贫血则主要以CD 26突变型为主,基因频率为86.99%。地贫基因携带组MCV、MCH和HGB均明显低于非地贫组(P<0.001)。结论德宏州属于地中海贫血高发区,地中海贫血基因携带率高,傣族、景颇族明显高于汉族。调查该地区孕龄人群地中海贫血的基因携带情况为遗传咨询和产前诊断,降低中重型地中海贫血发病率提供数据。

关键词：地中海贫血筛查基因型少数民族

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应用酵母双杂交系统筛选与蛋白激酶Pkmyt1相互作用的候选分子

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解剖学报 2017年第1期48卷 48-53页

作者：刘超孟智超栾治东任丽莉刘乙蒙肖建英锦州医科大学锦州医科大学基础医学院发育生物学教研室辽宁锦州121101 锦州医科大学基础医学实验教学中心辽宁锦州121101 锦州医科大学神经生物学教研室辽宁锦州121101 锦州医科大学教务处辽宁锦州121101

目的蛋白激酶Pkmyt1负调控小鼠1-细胞期受精卵有丝分裂的进程,但具体调控机制还不清楚。因此,利用酵母双杂交系统从人卵巢c DNA文库中筛选与Pkmyt1相互作用的候选蛋白,为研究Pkmyt1调控小鼠受精卵早期发育提供新线索。方法以小鼠卵巢组... 详细信息

目的蛋白激酶Pkmyt1负调控小鼠1-细胞期受精卵有丝分裂的进程,但具体调控机制还不清楚。因此,利用酵母双杂交系统从人卵巢c DNA文库中筛选与Pkmyt1相互作用的候选蛋白,为研究Pkmyt1调控小鼠受精卵早期发育提供新线索。方法以小鼠卵巢组织c DNA为模板,构建p GBKT7-Pkmyt1诱饵质粒,转化酵母感受态细胞后,分别接种于SD/-Trp(SDO)、SD/-Trp/X-α-Gal(SDO/X)和SD/-Trp/X-α-Gal/Ab A plates(SDO/X/A)培养板,检测其对酵母的毒性和自身激活能力,Western blotting法检测p GBKT7-Pkmyt1在酵母细胞中的表达。将人卵巢c DNA文库与含有p GBKT7-Pkmyt1的酵母感受态细胞融合,PCR筛选出阳性克隆,提取质粒,测序鉴定,再次检测其对酵母自激活能力,利用生物信息学分析筛选蛋白与胚胎发育的关系。结果酶切鉴定和Blast分析表明p GBKT7-Pkmyt1质粒构建成功。将该质粒转入Y2H golden中,在SDO板上克隆均匀生长,在SDO/X/A平皿上无克隆生长,Western blotting检测Pkmyt1在酵母细胞中有表达。PCR验证融合后的阳性克隆质粒有插入片段。通过初步筛选得到182种能够与Pkmyt1相互作用的蛋白质,经回复性实验进一步验证有46个与Pkmyt1之间存在相互作用的蛋白。结论通过筛选发现46个蛋白可能通过与Pkmyt1相互作用调控小鼠卵母细胞成熟和受精卵早期发育。

关键词： Pkmyt1 酵母双杂交蛋白-蛋白相互作用免疫印迹法小鼠

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