检索结果-内蒙古大学图书馆

中国比较医学杂志 2021年第8期31卷 9-15页

作者：周唯君彭涛周栋珍杨懿琛周艳华李化何志旭舒莉萍贵州医科大学细胞工程生物医药技术国家地方联合工程实验室贵州省再生医学重点实验室基础医学院免疫学教研室贵阳550004 中国医学科学院成体干细胞转化研究重点实验室贵阳550004 遵义医科大学附属医院儿科学教研室贵州遵义563003 贵州大学贵阳550025

目的探究rpl15基因在野生型斑马鱼胚胎中的表达形式。方法利用NCBI和Ensemble数据库进行rpl15基因的共线性分析和Rpl15蛋白质序列相似性分析,使用MEGA X软件绘制进化树;构建pCS2^(+)-rpl15重组质粒,再利用T3聚合酶制备地高辛标记的rpl1... 详细信息

目的探究rpl15基因在野生型斑马鱼胚胎中的表达形式。方法利用NCBI和Ensemble数据库进行rpl15基因的共线性分析和Rpl15蛋白质序列相似性分析,使用MEGA X软件绘制进化树;构建pCS2^(+)-rpl15重组质粒,再利用T3聚合酶制备地高辛标记的rpl15反义RNA探针,用全胚胎原位杂交检测rpl15基因的mRNA水平的表达;通过Western blot检测24、48和72 hpf斑马鱼胚胎中Rpl15蛋白的表达。结果在进化过程中,rpl15基因相对保守。构建了pCS2^(+)-rpl15重组质粒,原位杂交结果显示在24 hpf,rpl15基因在斑马鱼的几乎所有细胞中广泛表达;到48 hpf,rpl15在中枢神经系统的表达最强并且在胰腺的表达也开始显现;72 hpf仍然可见rpl15在后脑中的表达以及胰腺、肝和肠道中的表达。Western blot结果显示24、48和72 hpf斑马鱼胚胎中Rpl15蛋白的相对表达量随时间增加而增多。结论系统观察了斑马鱼发育过程中rpl15的表达部位及表达水平的变化,为斑马鱼rpl15缺失模型的建立提供了实验基础。

关键词：斑马鱼 rpl15基因原位杂交基因表达反义mRNA 胚胎发育

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红系祖细胞在造血缺陷斑马鱼体内的移植

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中国比较医学杂志 2019年第5期29卷 84-89页

作者：李志操黄波向文碧孙琮杰吴西军周艳华何志旭舒莉萍贵州医科大学细胞工程生物医药技术国家地方联合工程实验室组织工程与干细胞实验中心临床医学院儿科学教研室贵州省再生医学重点实验室贵阳550004 中国医学科学院成体干细胞转化研究重点实验室贵阳550004 遵义医科大学附属医院儿科学教研室贵州遵义563003

目的评估红系祖细胞在先天原始造血缺陷cloche^(-/-)突变体斑马鱼体内的移植效果。方法收集绿色荧光标记红系祖细胞的转基因系zTg(gata1:EGFP)斑马鱼胚胎,制备成单细胞悬液,经流式细胞仪分选出携带绿色荧光的gata1^+细胞,利用显微注射... 详细信息

目的评估红系祖细胞在先天原始造血缺陷cloche^(-/-)突变体斑马鱼体内的移植效果。方法收集绿色荧光标记红系祖细胞的转基因系zTg(gata1:EGFP)斑马鱼胚胎,制备成单细胞悬液,经流式细胞仪分选出携带绿色荧光的gata1^+细胞,利用显微注射技术将gata1^+细胞移植到42hpf的cloche^(-/-)突变体斑马鱼心脏中,采用体视荧光显微镜追踪观察移植后的红系祖细胞在cloche^(-/-)突变体斑马鱼中的表达情况。结果成功分选出携带绿色荧光的gata1^+细胞,并在移植后2 h可观察到携带绿色荧光的gata1^+细胞逐渐增殖扩散且16 h持续有绿色荧光表达。结论红系祖细胞有重建造血的潜力,为进一步研究红系祖细胞移植后的功能鉴定提供实验依据。

关键词：红系祖细胞斑马鱼移植 cloche^-/-突变

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骨髓间充质干细胞对衰老猕猴胸腺及脾脏结构和功能的影响

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中国组织工程研究 2023年第19期27卷 2953-2959页

作者：潘杭朱向情何洁杨再玲田川吕冠柯阮光萍叶丽何志旭舒莉萍潘兴华贵州医科大学组织工程与干细胞实验中心贵州省贵阳市550004 中国人民解放军联勤保障部队第九二〇医院干细胞与免疫细胞生物医药技术国家地方联合工程实验室、云南省细胞治疗技术转化医学重点实验室、昆明市干细胞与再生医学重点实验室、基础医学实验室云南省昆明市650032 贵州医科大学基础医学院免疫学教研室、细胞工程生物医药技术国家地方联合工程实验室、贵州省再生医学重点实验室、省部共建药用植物功效与利用国家重点实验室、中国医学科学院成体干细胞转化研究重点实验室贵州省贵阳市550004 贵州医科大学附属医院肿瘤医院贵州省贵阳市550004 四川省医学科学院、四川省人民医院四川省成都市610000 遵义医科大学附属医院儿科学教研室贵州省遵义市563100

背景:随着年龄的增长,脾脏的结构和功能发生改变,胸腺在青春期之后逐渐萎缩退化,导致机体发生免疫功能障碍。目的:探讨骨髓间充质干细胞对衰老猕猴胸腺及脾脏结构和功能的作用。方法:筛选出平均年龄25岁老年猕猴6只,随机分为老年组和老... 详细信息

背景:随着年龄的增长,脾脏的结构和功能发生改变,胸腺在青春期之后逐渐萎缩退化,导致机体发生免疫功能障碍。目的:探讨骨髓间充质干细胞对衰老猕猴胸腺及脾脏结构和功能的作用。方法:筛选出平均年龄25岁老年猕猴6只,随机分为老年组和老年治疗组各3只;老年治疗组猕猴经股静脉输注超顺磁性铁纳米颗粒标记的第4代骨髓间充质干细胞(1×10^(7)个/kg),1次/d,连续输注3 d,老年组猕猴在同一时间输注等体积的生理盐水;猕猴最后一次输注骨髓间充质干细胞5个月后给予安乐死处理,取出胸腺以及脾脏组织;苏木精-伊红染色观察胸腺组织和脾脏组织的结构变化;免疫荧光染色分析胸腺组织中各种T细胞亚群以及衰老相关基因蛋白P21的表达量变化;免疫组织化学染色分析脾脏组织中各种T细胞亚群以及衰老相关基因蛋白P21的表达量变化;安乐死处理猕猴之前抽取各组猕猴股静脉血5 mL,运用酶联免疫分析外周血血清中衰老相关分泌表型肿瘤坏死因子α和白细胞介素1α的分泌水平。结果与结论:①超顺磁性铁纳米颗粒标记的骨髓间充质干细胞经过股静脉输注入猕猴体内能够成功定植在衰老胸腺和脾脏组织中发挥作用;②骨髓间充质干细胞移植治疗后,衰老猕猴中胸腺部分组织出现清晰的皮质与髓质交界,脂肪细胞减少,出现胸腺小体,向正常的胸腺组织结构转变;衰老猕猴中脾脏组织出现清晰的红髓与白髓分界,脾小体的边缘多完整,且巨噬细胞减少,向正常的脾脏组织结构转变;③与老年组相比,老年治疗组衰老胸腺和脾脏组织中CD3^(+)、CD4^(+)以及CD8^(+)T细胞的表达量呈现增高的趋势,老年治疗组衰老胸腺和脾脏组织中P21蛋白的表达量呈现显著下降趋势;④与老年组相比,老年治疗组外周血中衰老相关分泌表型肿瘤坏死因子α以及白细胞介素1α的分泌水平呈现显著下降趋势;⑤上述结果表明,通过骨髓间充质干细胞的移植治疗,能够改善老年猕猴胸腺及脾脏组织的结构和功能。

关键词：干细胞骨髓间充质干细胞猕猴胸腺脾脏抗衰老免疫衰老相关分泌表型

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hUC-MSCs对缺氧缺血脑损伤新生大鼠脑组织的保护作用研究

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安徽医科大学学报 2021年第8期56卷 1226-1231页

作者：陈茂琼向敏宋海良王岚匡梦岚张丽娟熊英何志旭许键炜高鸿秦臻贵州医科大学附属医院新生儿科贵阳550004 贵州医科大学细胞工程生物医药技术国家地方联合工程实验室组织工程与干细胞实验中心贵州省再生医学重点实验室贵阳550000 中国医学科学院成体干细胞转化研究重点实验贵阳550004 东莞大朗医院普外科东莞523770 贵州医科大学医学科学研究所贵阳550000 贵州医科大学基础医学院药理学教研室贵阳550000 贵州医科大学护理学院贵阳550000 贵州医科大学基础医学院机能学实验室贵阳550000 贵州医科大学第三附属医院麻醉科都匀558000

目的通过移植人脐带来源的间充质干细胞(hUC-MSCs)治疗缺氧缺血诱导的新生大鼠缺氧缺血性脑病(HIE),并探讨hUC-MSCs对神经细胞的保护作用及机制。方法采集足月健康新生儿脐带约10 cm,运用组织块贴壁法培养hUC-MSCs,通过感染重组携带绿... 详细信息

目的通过移植人脐带来源的间充质干细胞(hUC-MSCs)治疗缺氧缺血诱导的新生大鼠缺氧缺血性脑病(HIE),并探讨hUC-MSCs对神经细胞的保护作用及机制。方法采集足月健康新生儿脐带约10 cm,运用组织块贴壁法培养hUC-MSCs,通过感染重组携带绿色荧光蛋白的腺病毒标记细胞;取18只新生健康7d龄SD大鼠,随机均分为对照(假手术)、模型、治疗组,其中模型组及治疗组建立新生大鼠缺氧缺血脑损伤模型,建模成功24 h后将标记的hUC-MSCs注射入治疗组左侧(损伤侧)侧脑室,各组大鼠hUC-MSCs移植治疗48 h后,检测hUC-MSCs在HIE大鼠大脑内的定植并采用TTC染色观察梗死脑组织,RT-qPCR测定海马组织中Beclin-2、Caspase-3 mRNA水平的变化,Western blot检测海马区细胞Beclin-2、Caspase-3蛋白的表达。结果对照组大鼠大脑没有形成梗死体积,模型组大鼠大脑梗死体积明显,梗死体积比为(41.67±4.17)%;治疗组大鼠经hUC-MSCs移植治疗48 h后,大脑梗死体积减小[(16.65±3.43)%],与模型组比较,差异有统计学意义;HIE建模48 h后,内源性Beclin-2、Caspase-3的mRNA以及蛋白的表达上调。hUC-MSCs移植治疗48 h后,Beclin-2、Caspase-3的mRNA以及蛋白的表达下降。结论hUC-MSCs能减小缺氧缺血损伤大鼠大脑梗死体积,对损伤大鼠有保护作用;hUC-MSCs能够减少大鼠脑细胞凋亡,下调缺氧缺血脑损伤大鼠海马区细胞凋亡相关Beclin-2、Caspase-3的mRNA以及蛋白水平。

关键词：缺氧缺血性脑病人脐带来源的间充质干细胞凋亡 Beclin-2 Caspase-3

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氟对斑马鱼骨骼发育的影响及与OPG/RANKL通路的相关性研究

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中华地方病学杂志 2022年第2期41卷 93-99页

作者：龚艺舒莉萍陈芳萍郑丹官志忠楼迪栋贵州医科大学法医学院法医病理学教研室贵阳550004 中国医学科学院成体干细胞转化研究重点实验室贵阳550004 贵阳妇幼保健院 550004 贵州医科大学地方病与少数民族疾病教育部重点实验室贵阳550004 贵州中医药大学基础医学院法医学教研室贵阳550004 贵州省法医中药毒理学特色重点实验室贵阳550004

目的探究氟暴露对斑马鱼幼鱼骨骼发育的影响,并探索其可能的分子机制。方法选择受精后6 h(6 hpf)野生型斑马鱼胚胎,采用氟化钠[NaF,对照组(0 mg/L NaF)、低氟组(25 mg/L NaF)和高氟组(100 mg/L NaF)]暴露至9 d。使用氟离子选择电极法检... 详细信息

目的探究氟暴露对斑马鱼幼鱼骨骼发育的影响,并探索其可能的分子机制。方法选择受精后6 h(6 hpf)野生型斑马鱼胚胎,采用氟化钠[NaF,对照组(0 mg/L NaF)、低氟组(25 mg/L NaF)和高氟组(100 mg/L NaF)]暴露至9 d。使用氟离子选择电极法检测斑马鱼幼鱼的整体氟含量,观察并统计斑马鱼幼鱼的死亡及发育情况,采用茜素红染色和阿尔新蓝染色分别分析斑马鱼幼鱼的骨矿化和软骨形成情况,实时荧光定量PCR法分析sry相关高迁移率组盒9(Sox9)的同源基因Sox9a、骨保护素(OPG)和核因子κB受体活化因子配体(RANKL)的表达情况。结果与对照组[(0.12±0.01)μg/140条]比较,低氟组[(0.28±0.03)μg/140条]和高氟组[(0.64±0.10)μg/140条]斑马鱼幼鱼整体氟含量均较高,差异均有统计学意义(P均<0.05)。与对照组比较,高氟组斑马鱼幼鱼体长较短、鱼鳔发育缺失率和脊柱弯曲率均较高(P均<0.05);低氟组茜素红染色骨矿化面积、累计光密度(IOD)和矿化椎骨数均较高,阿尔新蓝染色软骨形成面积较低(P均<0.05);高氟组茜素红染色骨矿化面积、IOD和矿化椎骨数均较低,阿尔新蓝染色软骨形成面积较高(P均<0.05)。与对照组比较,低氟组OPG mRNA表达水平和OPG/RANKL比值均较高(P均<0.05);高氟组RANKL mRNA表达水平较高,OPG/RANKL比值较低(P均<0.05)。结论斑马鱼胚胎至幼鱼时期给予短时间的氟暴露即可造成斑马鱼幼鱼骨骼发育异常,该影响可能与软骨内成骨和OPG/RANKL通路相关。

关键词：氟斑马鱼软骨内成骨骨骼发育

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miR-26b调控Wnt/β-catenin信号通路促进成肝样分化MSCs迁移研究

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安徽医科大学学报 2020年第12期55卷 1850-1857页

作者：吉杨丹罗红阳王丹王恒杨小燕何志旭刘金河汪显耀赵锦张丽娟张玲敏秦臻许键炜黔南民族医学高等专科学校药理学教研室都匀558013 贵阳市乌当区人民医院贵阳550018 贵州医科大学附属医院儿科贵阳550004 贵州医科大学细胞工程生物医药技术国家地方联合工程实验室组织工程与干细胞实验中心贵州省再生医学重点实验室贵阳550004 中国医学科学院成体干细胞转化研究重点实验贵阳550004 贵州医科大学护理学院贵阳550004 贵州医科大学基础医学院药理学教研室贵阳550004

目的探讨miR-26b与Wnt/β-catenin信号通路、间充质干细胞(MSCs)不同分化状态的关系及其在MSCs向肝细胞生长因子(HGF)趋化迁移过程中的作用。方法以大鼠骨髓来源MSCs作为研究对象,用无血清诱导分化培养基分别培养0、7、14、21d,建立成... 详细信息

目的探讨miR-26b与Wnt/β-catenin信号通路、间充质干细胞(MSCs)不同分化状态的关系及其在MSCs向肝细胞生长因子(HGF)趋化迁移过程中的作用。方法以大鼠骨髓来源MSCs作为研究对象,用无血清诱导分化培养基分别培养0、7、14、21d,建立成肝样分化不同阶段的MSCs分化模型,qRT-PCR检测miR-26b在不同分化状态MSCs细胞中的表达;重组腺病毒(Ad-26b)感染MSCs实现miR-26b的高表达,并以空病毒感染MSCs为对照(Ad)后,检测细胞中信号分子active-β-catenin(ABC)、p-β-catenin、β-catenin的表达量以及Wnt/β-catenin经典靶基因c-Myc、RUNX2的转录水平,明确其对MSCs铺展面积和黏着斑的影响以及通过Transwell、Dunnchamber实验,比较其对不同分化状态MSCs趋化迁移的影响。结果随着诱导分化时间的延长,MSCs的miR-26b表达呈上升趋势,14d时,miR-26b的表达至高峰,与对照组比较有统计学意义(P<0.05);Ad-26b组较Ad组ABC蛋白水平升高,p-β-catenin的蛋白水平下降,而β-catenin总蛋白无变化,Wnt/β-catenin信号下游靶基因c-Myc,RUNX2的表达上调。Ad-26b组高表达miR-26b后可促使MSCs铺展面积变小并呈现极性分布,MSCs细小黏着斑数目增加并向细胞前端周边分布。Transwell及Dunncham-ber实验表明MSCs诱导分化至7d,向HGF的趋化迁移能力高于诱导分化0、14和21d。高表达miR-26b组较Ad组细胞向HGF的趋化迁移能力较对照组增强(P<0.05)。结论miR-26b通过调节Wnt/β-catenin信号通路影响MSCs的分化和趋化迁移。

关键词：间充质干细胞 miR-26b Wnt/β-catenin信号通路成肝样分化趋化迁移

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12722例新生儿出生体质量特点及其影响因素分析

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贵州医科大学学报 2021年第11期46卷 1294-1300页

作者：丁可军侯红林舒莉萍黄璟吴昌学郎溪县人民医院儿科安徽宣城242100 贵州医科大学基础医学院贵州省再生医学重点实验室&中国医学科学院成体干细胞转化研究重点实验室贵州贵阳550004 贵州医科大学附属医院儿科贵州贵阳550004 贵州医科大学分子生物学重点实验室&地方病与少数民族疾病教育部重点实验室贵州贵阳550004

目的探讨12722例新生儿出生体质量及其影响因素。方法收集产科出生的12722例活产新生儿及孕母围生期临床资料,统计新生儿(新生儿出生体质量等基本数据,早产儿、低出生体质量儿、巨大儿、过期产儿发生率)、产妇(产妇总数、初产妇人数、... 详细信息

目的探讨12722例新生儿出生体质量及其影响因素。方法收集产科出生的12722例活产新生儿及孕母围生期临床资料,统计新生儿(新生儿出生体质量等基本数据,早产儿、低出生体质量儿、巨大儿、过期产儿发生率)、产妇(产妇总数、初产妇人数、年龄、孕前BMI、孕期增重程度等)情况,对新生儿出生体质量的进行单因素分析,采用Logistics回归分析新生儿出生体质量的影响因素。结果12722例新生儿平均出生体质量为(3324.37±457.64)g,男性高于女性(F=897.856,P<0.001);2012—2014年新生儿出生体质量逐年增加(F=36.552,P<0.001),2015—2019年逐年下降(F=10.663,P<0.001);2012—2019年早产儿的发生率总体保持递减趋势(χ^(2)=37.751,P<0.001);2012—2019年产妇平均年龄逐年增大(χ^(2)=57.865,P<0.001),30岁以上的产妇逐渐增多(χ^(2)=49.537,P<0.001);2012年后孕前消瘦孕妇逐渐增多(χ^(2)=19.228,P<0.001),孕前正常体质量产妇比例无明显改变(χ^(2)=0.806,P=0.652),孕前超重产妇比例下降(χ^(2)=14.559,P=0.001);单因素分析结果显示,不同性别、胎龄、出生胎儿数量新生儿的出生体质量比较,差异有统计学意义(P<0.001);不同年龄、文化水平、孕前BMI、孕期增重程度、羊水量、孕次、产次、身高以及有无患妊娠期高血压的产妇所产新生儿的出生体质量比较,差异有统计学意义(P<0.05);多Logistics回归分析果显示,新生儿出生体质量影响因素依次是双胎妊娠、胎龄、羊水量、妊娠期高血压、孕期增重程度、新生儿出生性别、产妇文化水平、妊娠糖期尿病、产妇年龄、孕前BMI、孕母身高、孕次以及产次。结论产妇年龄、孕前BMI、孕期增重程度、是否患妊娠期糖尿病和妊娠期高血压以及新生儿胎龄是新生儿出生体质量的影响因素。

关键词：新生儿出生体质量产妇婴儿,极低出生体重婴儿,早产体质量指数影响因素

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YTHDF3靶向PD-L1对肝细胞癌细胞增殖、迁移、侵袭和肿瘤干性的影响

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现代肿瘤医学 2024年第17期32卷 3164-3171页

作者：宋雯茜安亚军朱婕李远迪苏敏赵友波胡蓉贵州医科大学基础医学院组织学与胚胎学教研室贵州医科大学细胞工程生物医药技术国家地方联合工程实验室贵州省再生医学重点实验室中国医学科学院成体干细胞转化研究重点实验室贵州医科大学转化医学研究中心贵州省高等学校自身免疫病研究重点实验室贵州贵阳550025

目的:探究YTHDF3在肝癌中的表达水平和YTHDF3对肝癌细胞增殖、迁移、侵袭和肿瘤干性的影响及可能涉及的靶点。方法:RT-PCR和Western blot检测临床肝癌组织和癌旁组织中YTHDF3的表达水平,使用正常肝细胞和肝癌细胞检测YTHDF3在mRNA和蛋... 详细信息

目的:探究YTHDF3在肝癌中的表达水平和YTHDF3对肝癌细胞增殖、迁移、侵袭和肿瘤干性的影响及可能涉及的靶点。方法:RT-PCR和Western blot检测临床肝癌组织和癌旁组织中YTHDF3的表达水平,使用正常肝细胞和肝癌细胞检测YTHDF3在mRNA和蛋白水平的表达。干扰YTHDF3在两组肝癌细胞中的表达,通过CCK-8、划痕实验、Transwell实验检测肝癌细胞活力、迁移和侵袭能力。干扰YTHDF3后观察肝癌细胞的成球能力和流式细胞术测定CD133干性标记的变化。最后,下调YTHDF3检测PD-L1在mRNA和蛋白水平的变化。结果:与癌旁组织相比,YTHDF3在肝癌组织中表达显著上调。与LO2细胞相比,两组肝癌细胞中YTHDF3的表达升高。干扰YTHDF3在肝癌细胞中的表达后,肝癌细胞的增殖、迁移、侵袭和成球能力减弱,CD133干性标记阳性率降低。下调YTHDF3在肝癌细胞中的表达,PD-L1的表达随之减少。结论:YTHDF3在肝癌中的高表达能够促进肝癌细胞的增殖、迁移、侵袭和肿瘤干性等特征,可能是作用于PD-L1来实现肝癌细胞免疫逃逸。

关键词：肝癌 YTHDF3 m^(6)A 肿瘤干性免疫逃逸

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斑马鱼早期胚胎发育过程中IL-1β表达的特点

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贵州医科大学学报 2022年第9期47卷 993-999页

作者：赵砚驰李化李丹杨雁竹杨晓凤黄江涛莫大双舒莉萍贵州医科大学基础医学院免疫学教研室细胞工程生物医药技术国家地方联合工程实验室贵州省再生医学重点实验室省部共建药用植物功效与利用国家重点实验室贵州贵阳550004 中国医学科学院成体干细胞转化研究重点实验室贵州贵阳550004

目的探讨野生型斑马鱼胚胎早期发育中白细胞介素1β(IL-1β)的表达特点。方法选取美国国家生物信息技术中心(NCBI)数据库中人类、斑马鱼、猪、绵羊、水牛、小鼠、大鼠、家兔以及豚尾猴9个不同物种IL-1β氨基酸序列进行同源性比对,采... 详细信息

目的探讨野生型斑马鱼胚胎早期发育中白细胞介素1β(IL-1β)的表达特点。方法选取美国国家生物信息技术中心(NCBI)数据库中人类、斑马鱼、猪、绵羊、水牛、小鼠、大鼠、家兔以及豚尾猴9个不同物种IL-1β氨基酸序列进行同源性比对,采用分子进化遗传分析软件(MEGA X)绘制系统进化树;收集4组72受精后小时(hpf)斑马鱼胚胎、25枚/组,提取总RNA及合成互补脱氧核糖核酸(cDNA),构建pGEMT-IL-1β重组质粒并合成地高辛标记的IL-1β反义RNA探针;分别收集4、6、9、12、18、24、48及72 hpf斑马鱼胚胎、25枚/组,采用整胚原位杂交技术检测IL-1β在斑马鱼早期不同时间胚胎发育中的表达及分布状况。结果 IL-1β氨基酸序列在不同物种中相对保守;限制性内切酶双酶切重组质粒及测序结果显示,重组质粒构建无误;原位杂交实验结果表明,4 hpf斑马鱼胚胎中开始观察到IL-1β阳性杂交信号表达,6~12 hpf斑马鱼胚胎中观察到IL-1β阳性杂交信号持续表达,12 hpf斑马鱼胚胎中表达尤为明显,18 hpf斑马鱼胚胎躯干背侧、眼睛以及中后部中间细胞群等部位观察到不同程度的IL-1β阳性杂交信号表达,24 hpf斑马鱼胚胎全身躯干观察到IL-1β广泛表达,且头部及眼睛部位表达尤为明显,48~72 hpf斑马鱼胚胎观察到IL-1β表达逐渐从头部延伸至全身躯干且于肌肉组织中表达尤为明显。结论斑马鱼IL-1β在进化过程中具有相对保守性,斑马鱼早期胚胎发育过程中IL-1β有不同程度的表达。

关键词：斑马鱼白细胞介素1β 原位杂交细胞因子类胚胎早期发育重组质粒构建

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斑马鱼早期胚胎发育过程中IL-10表达的特点

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贵州医科大学学报 2022年第9期47卷 1000-1006,1013页

作者：赵砚驰李化李丹孔鹏张乙进吴洁玲莫大双舒莉萍贵州医科大学基础医学院免疫学教研室细胞工程生物医药技术国家地方联合工程实验室贵州省再生医学重点实验室省部共建药用植物功效与利用国家重点实验室贵州贵阳550004 中国医学科学院成体干细胞转化研究重点实验室贵州贵阳550004

目的探讨野生型斑马鱼白细胞介素10(IL-10)在胚胎早期发育过程中的表达特点。方法在美国国家生物信息技术中心(NCBI)数据库中分别查询人类、小鼠及斑马鱼染色体中IL-10的基因位置,与Ensemble数据库中的数据进行比对,采用软件分子进化遗... 详细信息

目的探讨野生型斑马鱼白细胞介素10(IL-10)在胚胎早期发育过程中的表达特点。方法在美国国家生物信息技术中心(NCBI)数据库中分别查询人类、小鼠及斑马鱼染色体中IL-10的基因位置,与Ensemble数据库中的数据进行比对,采用软件分子进化遗传分析软件(MEGA X)绘制系统进化树;收集3组72受精后小时(hpf)斑马鱼胚胎、30枚/组,提取总RNA(Total RNA)及合成互补脱氧核糖核酸(cDNA),构建斑马鱼重组质粒pCS^(2+)-IL-10,体外转录合成地高辛标记的IL-10反义RNA探针;分别收集4、6、9、12、18、24、48及72 hpf的斑马鱼胚胎75枚(25枚/组、3组),采用全胚胎原位杂交技术检测斑马鱼胚胎不同发育时间点IL-10表达及分布情况。结果野生型斑马鱼IL-10基因与人类IL-10基因相似度较高,且在进化过程中相对保守;限制性内切酶双酶切重组质粒及测序结果显示,重组质粒构建无误;全胚胎原位杂交结果显示,4~12 hpf野生型斑马鱼胚胎中未观察到阳性杂交信号,18 hpf野生型斑马鱼胚胎中后部中间细胞群观察到IL-10阳性杂交信号,24~72 hpf野生型斑马鱼胚胎胚胎头部区域IL-10广泛表达,头部背侧、心脏、眼眶以及卵黄囊背侧部位的信号尤为明显。结论斑马鱼IL-10在进化过程中具有相对保守性,在早期胚胎发育过程中IL-10有不同程度的表达,提示IL-10在斑马鱼胚胎早期发育中发挥重要作用。

关键词：斑马鱼白细胞介素10 原位杂交细胞因子类胚胎早期发育重组质粒构建

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