检索结果-内蒙古大学图书馆

贵州医科大学学报 2020年第10期45卷 1128-1136页

作者：杨畅刘东辉宋菲王永林李勇军兰燕宇陈一飞刘亭贵州医科大学省部共建药用植物功效与利用国家重点实验室&贵州省药物制剂重点实验室贵州贵阳550004 贵州医科大学民族药与中药开发应用教育部工程研究中心贵州贵阳550004 上海药品评审核查中心上海201203

目的:研究羊耳菊含药血清对大鼠原代肝细胞中细胞色素P450酶表达的影响。方法:将雄性SD大鼠随机分为给药组(5只)和空白组(5只),给药组大鼠灌胃羊耳菊活性部位提取物,空白组给予灌胃羧甲基纤维素钠;灌胃1 h后,2组大鼠股动脉取血制备血清... 详细信息

目的:研究羊耳菊含药血清对大鼠原代肝细胞中细胞色素P450酶表达的影响。方法:将雄性SD大鼠随机分为给药组(5只)和空白组(5只),给药组大鼠灌胃羊耳菊活性部位提取物,空白组给予灌胃羧甲基纤维素钠;灌胃1 h后,2组大鼠股动脉取血制备血清,同时收集大鼠原代肝细胞进行培养,将培养的细胞分为对照组和羊耳菊含药血清组,羊耳菊含药血清组分别加入含有0.5%、1%、2%、5%、10%体积比含药血清、对照组加入相同比例的空白血清;分别作用24 h和48 h后,提取各组总RNA和蛋白,采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)和免疫印迹(Western blot)方法考察不同培养时间和不同浓度下羊耳菊含药血清对大鼠原代肝细胞中CYP1A2、CYP2C19、CYP2D4、CYP2E1、CYP3A2表达的影响。结果:羊耳菊含药血清作用24 h,显著上调CYP1A2、CYP2E1和CYP3A2的mRNA和蛋白表达水平(P<0.01);作用48 h时,羊耳菊含药血清上调CYP2C19的mRNA和蛋白表达水平,下调CYP3A2的mRNA和蛋白表达水平(P<0.05),但24 h和48 h两个时间点的含药血清对CYP2D4的表达水平没有影响(P>0.05)。结论:羊耳菊可影响大鼠原代肝细胞中P450酶(CYP1A2、CYP2C19、CYP2E1和CYP3A2)的表达,且该作用与其作用浓度和时间有关。

关键词：大鼠原代肝细胞细胞色素P450 荧光定量聚合酶链式反应免疫印迹羊耳菊含药血清

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参芎葡萄糖注射液通过激活PI3K/AKT通路拮抗H2O2诱导H9c2细胞凋亡

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中国中药杂志 2019年第17期44卷 3773-3779页

作者：陆定艳李靖孙佳薛维娜何彬李勇军王永林林昌虎刘亭贵州医科大学贵州省药物制剂重点实验室/省部共建药用植物功效与利用国家重点实验室贵州贵阳550004 贵州医科大学民族药与中药开发应用教育部工程研究中心贵州贵阳550004 贵州医科大学医药卫生管理学院贵州贵阳550025 贵州医科大学药学院贵州贵阳550025

探究参芎葡萄糖注射液拮抗H2O2诱导H9c2细胞凋亡的机制。体外培养H9c2细胞,预先给予体积分数1. 7%,3. 4%,6. 8%的参芎葡萄糖注射液处理H9c2细胞,再给予H2O2诱导细胞凋亡。MTS法检测细胞存活率,AO/EB荧光染色观察细胞凋亡的形态学变化,An... 详细信息

探究参芎葡萄糖注射液拮抗H2O2诱导H9c2细胞凋亡的机制。体外培养H9c2细胞,预先给予体积分数1. 7%,3. 4%,6. 8%的参芎葡萄糖注射液处理H9c2细胞,再给予H2O2诱导细胞凋亡。MTS法检测细胞存活率,AO/EB荧光染色观察细胞凋亡的形态学变化,Annexin/PI法检测细胞凋亡率,基因芯片技术检测细胞表达谱的变化,荧光定量PCR技术(qRTPCR)检测PIK3CA,Bcl-2,Bax,caspase-3,GAPDH mRNA的表达,Western blot法检测PIK3CA,AKT,P-AKT,Bcl-2,Bax,caspase-3蛋白的表达水平,用试剂盒检测细胞乳酸脱氢酶(LDH)漏出量和丙二醛(MDA)含量。结果显示,不同浓度的参芎葡萄糖注射液可显著提高H2O2诱导的H9c2细胞存活率(P<0. 01),明显逆转H2O2诱导的细胞凋亡情况(P<0. 01)。芯片实验发现,参芎葡萄糖注射液处理后,H9c2细胞有138个基因表达发生改变,其中与PI3K/AKT通路相关的PIK3CA差异表达倍数较高,为3. 59倍。qRT-PCR和Western blot结果表明,参芎葡萄糖注射液可下调H2O2处理后H9c2细胞中caspase-3的mRNA和蛋白表达水平(P<0. 01),上调PIK3CA和Bcl-2的mRNA和蛋白的表达水平(P<0. 01),并上调AKT蛋白的磷酸化水平(P<0. 01)。在PI3K/AKT通路抑制剂LY294002作用下,参芎葡萄糖注射液拮抗H2O2细胞损伤作用显著降低。结果表明,参芎葡萄糖注射液可能是通过调控PI3K/AKT信号通路来抑制H2O2诱导的H9c2细胞凋亡。

关键词：参芎葡萄糖注射液 H9c2细胞细胞凋亡基因芯片 PI3K/AKT通路

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白及醇提物中5种主要活性成分的在体肠吸收特征研究

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中国药房 2019年第6期30卷 757-764页

作者：孙慧园陈浩梅朝叶郑林巩仔鹏李月婷李勇军黄勇贵州医科大学贵州省药物制剂重点实验室/药用植物功效与利用国家重点实验室贵阳550004 贵州医科大学药学院贵阳550004 贵州医科大学民族药与中药开发应用教育部工程研究中心贵阳550004

目的:考察白及醇提物中主要活性成分4-(葡萄糖氧基)-肉桂酸葡萄糖氧基苄酯(A1)、2-异丁基苹果酸(A2)、1,4-二[4-(葡萄糖氧)苄基]-2-异丁基苹果酸酯(A3)、二氢菲1(A4)、1,4-二[4-(葡萄糖氧)苄基]-2-异丁基苹果酸酯-2-(4-O-肉桂酰基-6-O-... 详细信息

目的:考察白及醇提物中主要活性成分4-(葡萄糖氧基)-肉桂酸葡萄糖氧基苄酯(A1)、2-异丁基苹果酸(A2)、1,4-二[4-(葡萄糖氧)苄基]-2-异丁基苹果酸酯(A3)、二氢菲1(A4)、1,4-二[4-(葡萄糖氧)苄基]-2-异丁基苹果酸酯-2-(4-O-肉桂酰基-6-O-乙酰基)葡萄糖苷(A5)在大鼠肠道中的吸收动力学特征。方法:以葛根素为内标,采用超高效液相色谱-串联质谱法(UPLC-MS/MS)检测肠循环液中A1～A5的质量浓度。色谱柱为Acquity UPLC BEH C_(18),流动相为乙腈(含0.1%甲酸)-水(含0.1%甲酸)(梯度洗脱),流速为0.35 mL/min,柱温为45℃,进样量为3μL;采用电喷雾离子源,以多反应监测模式进行正、负离子扫描,用于定量分析的离子对分别为m/z 593.2→431.1(A1)、m/z 189.0→129.0(A2)、m/z 725.3→457.2(A3)、m/z 347.1→332.1(A4)、m/z 1 059.3→793.1(A5)、m/z 417.0→267.0(内标)。采用大鼠在体肠循环灌流模型,以累计吸收转化率(A)和吸收转化速率常数(Ka)为指标,考察不同剂量白及醇提物(低、中、高剂量分别为166、333、667μg/mL)、胆汁、P-糖蛋白(P-gp)抑制剂(维拉帕米)、不同肠段对上述5种成分肠吸收的影响。结果:A1、A2、A3、A4、A5检测质量浓度的线性范围分别为0.22～14.00、0.34～21.75、1.99～127.16、0.15～9.75、0.16～10.00μg/mL(r>0.99),定量下限分别为0.22、0.34、1.99、0.15、0.16μg/mL,最低检测限分别为0.028、0.085、0.251、0.035、0.010μg/mL,日内、日间RSD均小于10%,方法回收率为83.60%～106.91%,基质效应不影响待测物的测定。白及醇提物低、中剂量组A1的A、K_a值均显著高于高剂量组,低剂量组A3的A值显著高于中、高剂量组(P<0.05或P<0.01)。不结扎组A1、A3的A、K_a值均显著低于对照组,而A4的A、K_a值均显著高于对照组(P<0.05或P<0.01);P-gp抑制剂组A1、A3的A、K_a值均显著低于对照组(P<0.05或P<0.01)。空肠组、回肠组、结肠组A1的A值以及结肠组A1的K_a值,结肠组A2的A、Ka值,回肠组A3的A值,回肠组、结肠组A4的A、K_a值,空肠组、回肠组A5的A值以及空肠组A5的K_a值均显著低于十二指肠组;而空肠组、回肠组、结肠组A3的K_a值均显著高于十二指肠组(P<0.05或P<0.01)。结论:本研究建立的UPLC-MS/MS法专属性强、灵敏度高、操作简便,可用于A1～A5的定量分析及药动学研究。白及醇提物中5种活性成分均为全肠道吸收,且吸收肠段各有不同;A1、A3在肠道中的吸收较多,可能已达饱和;胆汁可抑制A1、A2的肠吸收,但可促进A4的肠吸收;A1～A5可能均不是P-gp的底物。

关键词：白及醇提物活性化合物在体肠循环灌流模型超高效液相色谱-串联质谱法肠吸收特征

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汉桃叶化学成分的药理作用及质量控制研究进展

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贵州农业科学 2020年第12期48卷 109-113页

作者：罗媛晏婷巩仔鹏李月婷王爱民陈思颖郑林黄勇贵州省骨科医院药科剂贵州贵阳550002 贵州医科大学贵州省药物制剂重点实验室/药用植物功效与利用国家重点实验室贵州贵阳550004 贵州医科大学药学院贵州贵阳550004 贵州医科大学民族药与中药开发应用教育部工程研究中心贵州贵阳550004

汉桃叶植物是我国传统民族中草药,主要含有三萜皂苷类、挥发油类、有机酸类及黄酮类,具有抑菌、抗炎镇痛、抗惊厥等多种药理活性。为汉桃叶资源的研究及开发利用提供依据,在广泛检索文献基础上,从化学成分、药理活性及质量检测方法研究... 详细信息

汉桃叶植物是我国传统民族中草药,主要含有三萜皂苷类、挥发油类、有机酸类及黄酮类,具有抑菌、抗炎镇痛、抗惊厥等多种药理活性。为汉桃叶资源的研究及开发利用提供依据,在广泛检索文献基础上,从化学成分、药理活性及质量检测方法研究等方面对汉桃叶进行综述。

关键词：汉桃叶化学成分药理作用质量检测

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白及有效成分Militarine在肝微粒体中的体外代谢途径及其酶促动力学特征

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中国药房 2019年第10期30卷 1316-1320页

作者：夏涛王昌权陈浩郑林巩仔鹏李月婷李勇军黄勇潘洁贵州省药物制剂重点实验室/药用植物功效与利用国家重点实验室贵阳550004 贵州医科大学药学院贵阳550004 民族药与中药开发应用教育部工程研究中心贵阳550004

目的:研究白及有效成分Militarine在肝微粒体中的体外代谢途径及其酶促反应动力学特征。方法:建立大鼠和人肝微粒体体外孵育体系,对Militarine进行体外孵育反应;采用超高效液相色谱-四极杆-飞行时间质谱联用技术,结合UNIFI数据库并参考... 详细信息

目的:研究白及有效成分Militarine在肝微粒体中的体外代谢途径及其酶促反应动力学特征。方法:建立大鼠和人肝微粒体体外孵育体系,对Militarine进行体外孵育反应;采用超高效液相色谱-四极杆-飞行时间质谱联用技术,结合UNIFI数据库并参考文献对其代谢产物进行结构鉴定。同时,以葛根素为内标,采用超高效液相色谱-三重四极杆串联质谱联用技术对Militarine在大鼠肝微粒体中的代谢转化量进行定量分析,通过GraphPad Prism 5.0软件拟合代谢转化曲线,并计算在有/无还原性辅酶Ⅱ(NADPH)参与的反应条件下的Militarine酶促动力学参数[最大清除速率(v_(max))、米氏常数(k_m)、固有清除率(CL_(int))]。结果:Militarine在大鼠和人肝微粒体中孵育后,生成了1个化学式为C_(21)H_(29)O_(11)的化合物,推测其为Militarine的酯键水解代谢产物。酶促动力学研究显示,有/无NADPH参与的Militarine酶促反应的v_(max)分别为1.955、2.129 nmol/(h·mg),k_m分别为8.601、9.854 nmol/mL,CL_(int)分别为0.227 3、0.216 1 mL/(h·mg),两者无明显差异。结论:Militarine在肝微粒体中的主要代谢途径为C1或C4位酯键的水解;其代谢不依赖于由NADPH启动反应的细胞色素P_(450)酶代谢途径。

关键词：白及 Militarine 肝微粒体代谢途径酶促动力学

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良附滴丸抗大鼠乙醇型胃溃疡预防作用及机制

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贵州医科大学学报 2020年第7期45卷 767-772页

作者：潘洁李莉娜李勇军曹闯郭振虎陆苑贵州医科大学民族药与中药开发应用教育部工程研究中心贵州贵阳550004 贵州医科大学贵州省药物制剂重点实验室&省部共建药用植物功效与利用国家重点实验室贵州贵阳550004 贵州医科大学药学院贵州贵阳550004 贵州黄果树立爽药业有限公司贵州贵阳550008

目的:研究良附滴丸对乙醇型胃溃疡大鼠模型的预防作用及机制。方法:48只SD大鼠均分为良附滴丸(低、中、高)剂量组、奥美拉唑组、模型组以及空白对照组,低、中、高剂量组分别灌胃良附滴丸[良附滴丸剂量0.27 g/(kg·d)、0.54 g/(kg... 详细信息

目的:研究良附滴丸对乙醇型胃溃疡大鼠模型的预防作用及机制。方法:48只SD大鼠均分为良附滴丸(低、中、高)剂量组、奥美拉唑组、模型组以及空白对照组,低、中、高剂量组分别灌胃良附滴丸[良附滴丸剂量0.27 g/(kg·d)、0.54 g/(kg·d)、1.08 g/(kg·d)],奥美拉唑组灌胃奥美拉唑[18 mg/(kg·d)],模型组和空白组给予等体积生理盐水,连续给药5 d,每天给药1次,第5天给药后禁食不禁水24 h,再给药1次,末次给药1 h后,除空白对照组外,其余各组大鼠灌胃无水乙醇(5 mL/kg)诱导胃溃疡,于1 h后处死大鼠并收集胃组织,观察各组大鼠胃组织表观形态和HE染色下组织形态特征,比较胃组织溃疡指数、计算溃疡抑制百分率,检测胃组织匀浆中一氧化氮(NO)、丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)、前列腺素(PGE 2)等指标的含量。结果:与模型组比较,良附滴丸中、高剂量组可改善胃溃疡组织水肿、黏膜糜烂、血管扩张出血及炎症细胞浸润等病理改变;良附滴丸低、中、高剂量组的溃疡抑制百分率依次升高;与模型组比较,良附滴丸低剂量组能够升高NO、SOD的含量(P<0.05或P<0.01),降低IL-6、TNF-α含量(P<0.05或P<0.01),对MDA、PGE 2的含量影响不明显(P>0.05);良附滴丸中、高剂量组能降低胃黏膜损伤大鼠胃溃疡指数(P<0.01),胃组织中NO、SOD、PGE 2含量明显升高(P<0.01),TNF-α、IL-6、MDA水平明显降低(P<0.05或P<0.01)。结论:良附滴丸可减轻大鼠无水乙醇诱导的胃溃疡病理改变,其机制可能与增加NO、SOD、PGE 2水平或降低TNF-α、IL-6、MDA水平有关。

关键词：胃溃疡乙醇大鼠一氧化氮丙二醛超氧化物歧化酶良附滴丸胃溃疡

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黔产钩毛茜草HPLC指纹图谱建立及化学模式识别研究

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中药材 2019年第11期42卷 2593-2597页

作者：何燕玲汪洋马雪潘洁孙佳李勇军贵州医科大学民族药与中药开发应用教育部工程研究中心省部共建药用植物功效与利用国家重点实验室贵州贵阳550004 贵州医科大学药学院贵州贵阳550004 贵州医科大学贵州省药物制剂重点实验室贵州贵阳550004

目的:建立钩毛茜草HPLC指纹图谱,并进行化学模式识别。方法:采用Cortecs C18(150 mm×4.6 mm,2.7μm)色谱柱;以乙腈-0.1%磷酸溶液为流动相,梯度洗脱;流速为1.0 mL/min;检测波长为254 nm;柱温为30℃,建立钩毛茜草HPLC指纹图谱,并进... 详细信息

目的:建立钩毛茜草HPLC指纹图谱,并进行化学模式识别。方法:采用Cortecs C18(150 mm×4.6 mm,2.7μm)色谱柱;以乙腈-0.1%磷酸溶液为流动相,梯度洗脱;流速为1.0 mL/min;检测波长为254 nm;柱温为30℃,建立钩毛茜草HPLC指纹图谱,并进行相似度评价、聚类分析及主成分分析。结果:10批钩毛茜草样品HPLC指纹图谱中共有13个共有峰,除S5号样品外,其余样品相似度均在0.875以上。10批钩毛茜草样品分为2类。结论:该方法稳定、可靠、重复性好,可用于钩毛茜草的质量控制。

关键词：钩毛茜草 HPLC指纹图谱化学模式识别

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苗药芭蕉根的化学成分研究(Ⅱ)

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中药材 2019年第12期42卷 2809-2812页

作者：蒋礼雷艳黄勇巩仔鹏付思红李勇军林昌虎贵州医科大学/民族药与中药开发应用教育部工程研究中心/省部共建药用植物功效与利用国家重点实验室贵州贵阳550004 贵州医科大学药学院贵州贵阳550004 贵州医科大学/贵州省药物制剂重点实验室贵州贵阳550004

目的:研究苗药芭蕉根的化学成分。方法:采用Sephadex LH-20柱层析、Toyopearl HW-40F、Toyopearl HW-40C柱层析、正相硅胶柱层析等分离手段对芭蕉根70%乙醇提取物进行分离和纯化,并运用现代波谱学技术和理化性质鉴定化合物的结构。结果... 详细信息

目的:研究苗药芭蕉根的化学成分。方法:采用Sephadex LH-20柱层析、Toyopearl HW-40F、Toyopearl HW-40C柱层析、正相硅胶柱层析等分离手段对芭蕉根70%乙醇提取物进行分离和纯化,并运用现代波谱学技术和理化性质鉴定化合物的结构。结果:从芭蕉根70%乙醇提取物中分离得到13个化合物,分别鉴定为:rel-(3S,4aS,10bR)-3-(4′-hydroxyphenyl)-8-hydroxy-9-methoxy-4a,5,6,10b-tetrahydro-3H-naphtho[2,1-b]pyran(1)、4-hydroxy-3-methoxybenzaldehyde(2)、trans-phydroxycinnamic acid ethyl ester(3)、dibutyl phthalate(4)、邻苯二甲酸-(2-乙基)己酯(5)、ethyl ferulate(6)、2-(4′-hydroxyphenyl)naphthalene-1,8-dicarboxylic anhydride(7)、香草酸(8)、leonuriside A(9)、腺苷(10)、uridine(11)、2-hydroxy-9-(4-hydroxyphenyl)-1H-phenalen-1-one(12)、(1S,2R,3S)-(-)-2,3-dihydro-1,2,3-trihydroxy-4-(4′-hydroxyphenyl)phenalene(13)。结论:其中,化合物1~3、6、8~11为首次从芭蕉属植物中分离得到,化合物4、5、7、12、13为首次从该植物中分离得到。

关键词：芭蕉根化学成分结构鉴定

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苗药黑骨藤的化学成分研究(Ⅱ)

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中药材 2019年第2期42卷 311-314页

作者：何燕玲李小双马雪王广成郑林赵珊李勇军贵州医科大学民族药与中药开发应用教育部工程研究中心/药用植物功效与利用国家重点实验室贵州贵阳550004 贵州医科大学药学院贵州贵阳550004 贵州医科大学贵州省药物制剂重点实验室贵州贵阳550004

目的:研究黑骨藤的化学成分。方法:采用多种柱色谱及制备型HPLC等方法进行分离纯化,并运用理化分析及现代波谱学方法鉴定其结构。结果:从黑骨藤70%乙醇提取物中分离鉴定了14个化合物,分别为:1-O-咖啡酰基奎宁酸(1)、杠柳苷L(2)、21-O-me... 详细信息

目的:研究黑骨藤的化学成分。方法:采用多种柱色谱及制备型HPLC等方法进行分离纯化,并运用理化分析及现代波谱学方法鉴定其结构。结果:从黑骨藤70%乙醇提取物中分离鉴定了14个化合物,分别为:1-O-咖啡酰基奎宁酸(1)、杠柳苷L(2)、21-O-methyl-5-pregnene-3β,14β,17β,20,21-pentol(3)、胡萝卜苷(4)、臭矢菜素B(5)、丁香树脂醇(6)、8-羟基松脂醇(7)、丁香醛(8)、3-甲氧基-4-羟基肉桂酸(9)、丙三醇(10)、异莨菪亭(11)、尼古丁酸(12)、表丁香树脂醇(13)、3-O-咖啡酰基-4-O-芥子酰基奎宁酸(14)。结论:其中,化合物1、10、12、14为首次从该属植物中分离得到,化合物3、8、9为首次从该植物中分离得到。

关键词：黑骨藤化学成分结构鉴定

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CYP2A13/MRP2双表达Flp-In^TM CHO细胞系的建立

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细胞与分子免疫学杂志 2019年第10期35卷 865-871页

作者：刘香香何俊奇杨畅王永林薛维娜何彬李勇军兰燕宇刘亭贵州医科大学贵州省药物制剂重点实验室/省部共建药用植物功效与利用国家重点实验室贵州贵阳550004 贵州医科大学药学院贵州贵阳550004 贵州医科大学医药卫生管理学院贵州贵阳550004 贵州医科大学民族药与中药开发应用教育部工程研究中心贵州贵阳550004

目的构建稳定表达细胞色素P450家族2亚家族A成员13(CYP2A13)和多药耐药相关蛋白2(MRP2)的双转染Flp-In^TM CHO细胞系.方法分别构建pCMV6-NEO-CYP2A13和pcDNA5-MRP2重组质粒.先将pCMV6-NEO-CYP2A13重组质粒转染至Flp-In^TM CHO细胞中,通过有限稀释法和4-甲基亚硝胺-1-3-呲啶基-1-丁酮(NNK)细胞毒性实验筛选CYP2A13活性较高的CYP2A13-Flp-In^TMCHO细胞.再将pcDNA5-MRP2转染至CYP2A13-Flp-In^TMCHO细胞中.用实时定量P眈CR、Western blot法和NNK细胞毒性实验,检测双转染细胞及正常细胞中CYP2AI3和MRP2的表达量及其活性,筛选稳定表达CYP2A13和MRP2的FlpInTMCHO细胞.结果相较于未转染细胞,CYP2AI3-Flp-In^TMCHO细胞的CYP2A13表达增加,NNK毒性敏感度增加;CYP2A13/MRP2-Flp-In^TM CHO细胞的CYP2A13和MRP2表达也明显增加.和CYP2AI3-Flp-In^TM CHO细胞相比,CYP2A13/MRP2-Flp-In^TM CHO细胞的CYP2A13表达量无明显差异,MRP2表达增加,NNK毒性敏感度明显降低.结论成功建立了CYP2A13和MR凹的双转染细胞模型,为呼吸道致癌物质原位激活研究奠定了基础.

关键词：细胞色素P450家族2亚家族A成员13(CYP2A13) 多药耐药相关蛋白2(MRP2) 4-甲基亚硝胺基-1-丁酮(NNK) 稳定转染双表达 Flp-In^TM CHO细胞

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