检索结果-内蒙古大学图书馆

浙江农业学报 2021年第2期33卷 215-222页

作者：张飘贺欣薇杨霞曾茂芹刘妍罕张扬子杨颖温贵兰程振涛文明贵州大学动物科学学院贵州贵阳550025 贵州省畜牧兽医研究所贵州贵阳550025 贵州省动物生物制品工程技术研究中心贵州贵阳550025

为建立鸭NF-κB1(nuclear factor-kappa B, NF-κB)基因的荧光定量PCR检测方法,并以建立的方法检测鸭胚成纤维细胞(duck embryo fibroblasts, DEF)在感染鸭肠炎病毒(DEV)后NF-κB1基因随时间变化转录表达量的变化情况。根据GenBank上NF-... 详细信息

为建立鸭NF-κB1(nuclear factor-kappa B, NF-κB)基因的荧光定量PCR检测方法,并以建立的方法检测鸭胚成纤维细胞(duck embryo fibroblasts, DEF)在感染鸭肠炎病毒(DEV)后NF-κB1基因随时间变化转录表达量的变化情况。根据GenBank上NF-κB1基因保守序列设计特异性引物,以鸭胚成纤维细胞mRNA提取样本反转录为cDNA,进行NF-κB1基因克隆质粒构建,以此为模板建立鸭NF-κB1基因荧光定量PCR检测方法并进行特异性、重复性和敏感性试验,并利用建立的方法DEF感染DEV后NF-κB1基因随时间变化的转录变化进行检测。结果显示:建立的鸭NF-κB1基因荧光定量PCR方法标准曲线呈现典型的S型,方程为y=-3.12x+44.086(R~2=1),扩增效率为109.2%;其熔解温度Tm值为(83.5±0)℃,曲线呈特异性单峰,批内变异系数小于0.3%,批间变异系数小于0.2%;检测灵敏度可达到1.79个拷贝。DEF细胞在感染DEV后NF-κB1基因随时间改变转录水平变化无规律,但整体表达水平高于正常细胞,差异显著(P<0.05),36~84 h NF-κB1基因的转录水平与正常细胞中差异极显著(P<0.01)。本研究成功建立了鸭NF-κB1基因荧光定量PCR检测方法,并对DEF细胞感染DEV后NF-κB1基因的转录水平进行了研究,为后续实验研究提供了技术和数据支撑。

关键词：鸭 NF-kB1基因荧光定量PCR 建立应用

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猪繁殖与呼吸综合征病毒GZZJ201711株全基因组序列分析

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动物医学进展 2020年第1期41卷 20-26页

作者：陈广张升波温贵兰李昌红徐丽田浪张喜懿龚新勇陈彦希文明王开功贵州大学动物科学学院预防兽医实验室/贵州省动物生物制品工程技术研究中心

为了解贵州省毕节地区猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)基因变异情况,于2017年从贵州毕节地区某疑似感染PRRSV猪群分离到1株PRRSV,将其命名为GZZJ201711毒株。采用RT-PCR分段扩增出PRRSV GZZJ201711株13个基因片段,分别连接到pMD19-T载体... 详细信息

为了解贵州省毕节地区猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)基因变异情况,于2017年从贵州毕节地区某疑似感染PRRSV猪群分离到1株PRRSV,将其命名为GZZJ201711毒株。采用RT-PCR分段扩增出PRRSV GZZJ201711株13个基因片段,分别连接到pMD19-T载体上进行测序,拼接后得到PRRSV GZZJ201711株全基因组长15 322 bp (去除polyA尾),包括5’UTR、ORFla-ORF7、3’UTR。序列分析表明,GZZJ201711株与欧洲型Lelystad virus(LV)株核苷酸同源性为60.3%,与美洲型毒株代表株ATCC VR-2332核苷酸同源性为89.2%,与HP-PRRSV(HUN4、JXA1、TJ)等毒株同源性在98.8%~98.9%之间。GZZJ201711株与高致病性毒株JXA1、HUN4、TJ属于同一小分支,其中与XJu-1、GDHY毒株遗传关系最近。GZZJ201711毒株的NSP2基因有30个氨基酸缺失,与JXA1、HUN4、TJ等HP-PRRSV毒株缺失位置一致。

关键词：猪繁殖与呼吸综合征病毒全基因组序列分析

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瑶鸡粪便中乳酸菌的分离鉴定及筛选

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中国生物制品学杂志 2022年第4期35卷 413-417页

作者：金正雨邓永军杨泽敏李双杨颖贵州大学动物科学学院贵州贵阳550025 贵州省动物生物制品工程技术研究中心贵州贵阳550025

目的从瑶鸡粪便中筛选优质的宿主源性乳酸菌。方法采集健康成年瑶鸡粪便,将鸡粪汁接种至MRS肉汤培养基富集后,按5%体积比取菌液于PBS(pH 3)中处理1 h,离心后的菌泥用含0.3%胆盐的PBS处理1 h,再倍比稀释涂布MRS琼脂平板,选取优势菌株,对... 详细信息

目的从瑶鸡粪便中筛选优质的宿主源性乳酸菌。方法采集健康成年瑶鸡粪便,将鸡粪汁接种至MRS肉汤培养基富集后,按5%体积比取菌液于PBS(pH 3)中处理1 h,离心后的菌泥用含0.3%胆盐的PBS处理1 h,再倍比稀释涂布MRS琼脂平板,选取优势菌株,对其进行菌落形态、革兰染色镜检、16S r RNA基因序列分析鉴定,并测试生长曲线、产酸性能、耐酸特性、耐胆盐特性、抑菌能力等生物学特征。结果分离株为海氏肠球菌,命名为GZYY2021,该菌株在8 h达到稳定期,培养24 h的菌液pH值接近4.43,该菌株对鸡白痢沙门菌有较强的抑菌活性,抑菌圈直径约为18.46 mm,对低pH和胆盐环境均耐受。结论分离获得的GZYY2021菌株可为后续瑶鸡及其他家禽用微生态制剂的研究及其应用提供可选择的菌种资源。

关键词：益生菌粪便分离海氏肠球菌瑶鸡

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中药茜草对鸭肠炎病毒感染鸭免疫器官病理损伤的影响

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畜牧与兽医 2022年第2期54卷 130-134页

作者：毕文文张黔东张飘田琴王娜杨颖王开功周碧君文明贵州大学动物科学学院贵州贵阳550025 贵州省动物生物制品工程技术研究中心贵州贵阳550025

为探究中药茜草对鸭肠炎病毒感染所致鸭免疫器官组织病理损伤的影响,将30日龄健康三穗麻鸭随机分成给药组(中药干预)、模型组(病毒感染组)和对照组,经相应处理后于处理66、90和114 h时扑杀,采集相关组织和血清样本进行病原核酸PCR扩增... 详细信息

为探究中药茜草对鸭肠炎病毒感染所致鸭免疫器官组织病理损伤的影响,将30日龄健康三穗麻鸭随机分成给药组(中药干预)、模型组(病毒感染组)和对照组,经相应处理后于处理66、90和114 h时扑杀,采集相关组织和血清样本进行病原核酸PCR扩增、免疫器官指数测定、血清生化指标检测和病理组织切片观察。结果显示:与模型组相比,给药组鸭脾脏(90 h)、胸腺(66 h)指数极显著提高(P<0.01),血清高密度脂蛋白(HDL)含量(90 h)极显著下降(P<0.01),谷丙转氨酶(ALT)、66和90 h白蛋白(ALB)、总蛋白(TP)、尿素(UREA)以及90和114 h肌酐(CREA)含量极显著上升(P<0.01);组织病理炎症与出血均有减轻。结果表明:茜草可有效减轻鸭肠炎病毒感染所致鸭免疫器官组织的病理损伤,可用于临床上鸭病毒性肠炎的预防与控制。

关键词：茜草鸭肠炎病毒鸭免疫器官病理损伤

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鸭肠炎病毒感染对鸭肠道菌群多样性的影响

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中国预防兽医学报 2020年第8期42卷 772-778页

作者：杨霞蒲翠敏胡安东张飘杨颖程振涛文明贵州大学动物科学学院/贵州大学动物疫病研究所/贵州省动物生物制品工程技术研究中心贵州贵阳550025

为揭示鸭肠炎病毒(DEV)感染对鸭肠道菌群多样性的影响,本研究采用16S rRNA基因高通量测序和Illumina Hiseq 2500高通量测序技术对DEV感染后鸭肠道菌群多样性和丰度进行分析。结果显示:与对照组比较,感染组鸭肠道菌群Alpha多样性指数均... 详细信息

为揭示鸭肠炎病毒(DEV)感染对鸭肠道菌群多样性的影响,本研究采用16S rRNA基因高通量测序和Illumina Hiseq 2500高通量测序技术对DEV感染后鸭肠道菌群多样性和丰度进行分析。结果显示:与对照组比较,感染组鸭肠道菌群Alpha多样性指数均呈先升高后降低趋势,尤其是在DEV感染96 h和120 h后,鸭肠道菌群Beta多样性(Weighted Unifrac指数)距离越远,相似度越低;DEV感染后鸭肠道优势菌群主要分布于厚壁菌门、变形菌门、拟杆菌门和梭杆菌门,梭菌纲、丙型变形菌纲、拟杆菌纲和梭杆菌纲,梭菌目、肠杆菌目、拟杆菌目和梭杆菌目,肠杆菌科、消化链球菌科、拟杆菌科和梭杆菌科,大肠杆菌志贺菌亚属、拟杆菌属、梭菌属和Turicibacter属,尤其是产气荚膜梭菌和坏死梭杆菌呈先下降后升高趋势,这可能与DEV感染所导致的肠道病变存在一定的关联性。本研究结果为DEV致病机理及其所致疾病的防控研究奠定了基础。

关键词：鸭肠炎病毒肠道菌群高通量测序鸭

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DuCV和GPV与DEV三重PCR检测方法的建立及应用

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湖南农业大学学报（自然科学版） 2021年第2期47卷 225-230页

作者：田琴张明华周碧君程振涛王开功文明贵州大学动物科学学院贵州贵阳550025 贵州省动物疫病研究室贵州贵阳550025 贵州省动物生物制品工程技术研究中心贵州贵阳550025

根据GenBank中的序列,合成针对鸭圆环病毒(DuCV)REP基因、鹅细小病毒(GPV)NS1基因、鸭肠炎病毒(DEV)UL6基因的3对特异性引物,以病毒的克隆质粒作为模板,进行退火温度、引物终浓度的优化,建立一种能同时鉴别DuCV、GPV、DEV的三重PCR检测... 详细信息

根据GenBank中的序列,合成针对鸭圆环病毒(DuCV)REP基因、鹅细小病毒(GPV)NS1基因、鸭肠炎病毒(DEV)UL6基因的3对特异性引物,以病毒的克隆质粒作为模板,进行退火温度、引物终浓度的优化,建立一种能同时鉴别DuCV、GPV、DEV的三重PCR检测方法,并检验该方法的特异性、敏感性和重复性。结果显示:试验所建立的三重PCR检测方法的最适退火温度为58.5℃,引物DuCV REP、GPV NS1、DEV UL6的最适终浓度分别为0.9、0.6、0.7μmol/L;该方法能够同时扩增出DuCV、GPV和DEV的特异性片段,而不能扩增出NDV、RA、AIV、DHV和TUMV,表明该方法特异性强;该方法对质粒DuCV、GPV和DEV模板的最低检测量分别为1、100、10 fg,表明该方法敏感性好;运用该方法对DuCV+GPV+DEV、DuCV+GPV、GPV+DEV、DuCV+DEV、DuCV、GPV、DEV进行检测,均能扩增出与预期一致的特异性片段,表明该方法重复性好;运用该方法对42份临床样本进行检测,其检出率分别为26.19%、30.95%和19.05%,与单一PCR的检出结果一致,表明该方法能适用于临床样本的检测。试验建立的方法具有快速、简便、特异性强、敏感性好、重复性好等特点,可用于DuCV、GPV和DEV临床样本混合感染的快速诊断及鉴别诊断。

关键词：鸭圆环病毒(DuCV) 鹅细小病毒(GPV) 鸭肠炎病毒(DEV) 三重PCR 退火温度引物终浓度

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“复方常青”对鸡柔嫩艾美耳球虫感染的疗效

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动物医学进展 2024年第2期45卷 128-133页

作者：杜鹏杨佳佳向万江王艺舟罗天麻鲜思美王碧贵州大学动物科学学院贵州贵阳550025 贵州省动物疫病研究室贵州贵阳550025 贵州省动物生物制品工程技术研究中心贵州贵阳550025

为探究基于网状Meta分析配制出的中药组方“复方常青”对鸡柔嫩艾美耳球虫病的治疗效果,将180只黄羽肉鸡随机分为6组,分别为复方常青高、中、低剂量组(A、B、C),地克珠利组(D),不攻虫也不给药的阴性对照组(E)和攻虫不给药的阳性对照组(F... 详细信息

为探究基于网状Meta分析配制出的中药组方“复方常青”对鸡柔嫩艾美耳球虫病的治疗效果,将180只黄羽肉鸡随机分为6组,分别为复方常青高、中、低剂量组(A、B、C),地克珠利组(D),不攻虫也不给药的阴性对照组(E)和攻虫不给药的阳性对照组(F)。除E组外,雏鸡在15日龄灌服1×10^(5)个球虫孢子化卵囊以构建感染模型;A、B、C组以中药原药兑水给药,给药浓度分别为5、2.5、1 mL/L,D组以地克珠利溶液1 mL/L兑水给药,并从18日龄起连续治疗5 d。通过增重情况、料肉比、盲肠病变、每克盲肠内容物卵囊数、存活率、抗球虫指数及细胞因子稳态来评价药物治疗效果。结果显示,A组对感染雏鸡增加体重、减轻盲肠病变、减少每克盲肠内容物卵囊数及提高存活率的作用优于其他治疗组,所获得的抗球虫指数最高(>180);B组对细胞因子IL-17、IL-10平衡作用优于其他治疗组。表明复方常青中药组方可有效的治疗鸡柔嫩艾美耳球虫病。

关键词：复方常青地克珠利柔嫩艾美耳球虫抗球虫指数鸡

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贵州省影响猪O型口蹄疫、猪繁殖与呼吸综合征和猪瘟免疫效果的环境因素R和GAM分析

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中国预防兽医学报 2020年第7期42卷 690-695页

作者：田琴周怡张明华周碧君王开功程振涛文明贵州大学动物科学学院贵州贵阳550025 贵州省动物疫病研究室贵州贵阳550025 贵州省动物生物制品工程技术研究中心贵州贵阳550025

为探究贵州省影响猪O型口蹄疫、猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)和猪瘟(CSF)免疫效果的环境因素,本实验收集2015年~2018年的检测数据,采用R语言和GAM建模进行养殖地区、养殖规模、环境温度和猪场海拔高度等环境因素对猪上述3种疫病免疫效果的... 详细信息

为探究贵州省影响猪O型口蹄疫、猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)和猪瘟(CSF)免疫效果的环境因素,本实验收集2015年~2018年的检测数据,采用R语言和GAM建模进行养殖地区、养殖规模、环境温度和猪场海拔高度等环境因素对猪上述3种疫病免疫效果的影响分析。单因素分析结果显示:贵州9个地区猪O型口蹄疫(FMD)抗体阳性率为65.67%~95.73%,PRRS抗体阳性率为54.36%~97.14%,CSF抗体阳性率为33.07%~93.33%,贵州各个地区猪O型FMD抗体阳性率差异显著(p<0.05),PRRS和CSF抗体阳性率差异极显著(p<0.01);规模场猪O型FMD、PRRS和CSF抗体阳性率分别为82.94%、82.85%和71.05%,散养户猪的相应疫病抗体阳性率分别为75.75%、90.12%和75.66%,规模场与散养场差异不显著(p>0.05);环境温度21℃~27℃时猪O型FMD、PRRS和CSF抗体阳性率分别为84.38%、86.24%和75.63%,10℃~20℃时猪的相应疫病抗体阳性率分别为83.81%、84.58%和70.66%,3℃~9℃时猪的相应疫病抗体阳性率分别为70.74%、83.93%和67.56%,不同环境温度的猪O型FMD抗体阳性率差异显著(p<0.05),而猪PRRS和CSF抗体阳性率差异不显著(p>0.05);海拔高度1250 m以上猪场猪O型FMD、PRRS和CSF抗体阳性率分别为80.19%、85.37%和74.54%,1100 m^1250 m猪场相应疫病抗体阳性率分别为88.60%、91.00%和78.83%,1100 m以下猪场相应疫病抗体阳性率分别为73.88%、81.73%和67.34%,不同海拔高度的猪O型FMD抗体阳性率差异显著(p<0.05),而猪PRRS和CSF抗体阳性率差异不显著(p>0.05)。多因素和GAM建模分析显示,在4种环境因素中只有环境温度对猪O型FMD抗体阳性率具有显著影响且二者呈非线性关系,其对抗体阳性率存在饱和效应,而4种环境因素对PRRS和CSF抗体阳性率均无明显影响。这些结果表明,对猪免疫O型FMD疫苗时要注意选择适宜的环境温度。本研究为贵州省猪O型FMD、PRRS和CSF疫苗合理免疫程序的制定提供一定的参考依据。

关键词：猪重要疫病免疫效果环境影响因素 R语言分析 GAM建模分析

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贵州省某地区养鸭场DuCV、NDV、GPV和RA共同感染的调查与分析

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黑龙江畜牧兽医 2021年第5期 97-102页

作者：田琴周怡张明华周碧君王开功文明程振涛贵州大学动物科学学院贵阳550025 贵州省动物疫病研究室贵阳550025 贵州省动物生物制品工程技术研究中心贵阳550025

为了查明贵州省某地区4个规模化养鸭场6~54日龄鸭急性发病死亡的原因,试验采集A、B、C、D 4个养鸭场病死鸭的心脏、肝脏和脾脏等器官,通过病理剖检、细菌分离培养及鉴定、病毒病原核酸检测进行诊断并对检测数据整理分析。结果表明:病死... 详细信息

为了查明贵州省某地区4个规模化养鸭场6~54日龄鸭急性发病死亡的原因,试验采集A、B、C、D 4个养鸭场病死鸭的心脏、肝脏和脾脏等器官,通过病理剖检、细菌分离培养及鉴定、病毒病原核酸检测进行诊断并对检测数据整理分析。结果表明:病死鸭剖检病变主要为心包膜纤维素性渗出、肝脏肿大呈墨绿色、肝脏表面有灰白色包膜和脾脏肿大呈大理石外观等;仅分离到一种细菌,经革兰氏染色为阴性短小杆菌,细菌基因组PCR鉴定为鸭疫里默氏杆菌(Riemerella anatipesifer,RA);病毒病原核酸检测发现鸭圆环病毒(duck Circovirus, DuCV)、鹅细小病毒(goose Parvovirus, GPV)和新城疫病毒(Newcastle disease virus, NDV);4个养鸭场均以病毒感染为主,感染病原样品总数由高到低分别是DuCV、NDV、GPV和RA;在检测的养鸭场中存在单独感染、二重感染、三重感染和四重感染,并以三重感染的阳性率最高,达到42.86%。说明贵州省该地区引起鸭发病、死亡的病原种类繁多且感染情况复杂,给该地区鸭病的防控工作带来了一定挑战。

关键词：鸭圆环病毒鸭疫里默氏杆菌鹅细小病毒新城疫病毒调查

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柔嫩艾美耳球虫贵阳株对6种抗球虫药物的耐药性试验

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黑龙江畜牧兽医 2024年第15期 93-98页

作者：杜鹏向万江杨佳佳陈影韦泽慧陈联越王碧鲜思美贵州大学动物科学学院贵阳550025 贵州省动物疫病研究室贵阳550025 贵州省动物生物制品工程技术研究中心贵阳550025

为探究柔嫩艾美耳球虫(Eimeria tenella,***)贵阳株对6种抗球虫药物的耐药性,试验将1日龄黄羽蛋鸡144只随机分为地克珠利组(D组)、妥曲珠利组(T组)、莫能菌素组(M组)、盐酸氯苯胍组(Y组)、癸氧喹酯组(G组)和磺胺氯吡嗪钠组(H组)6个给药... 详细信息

为探究柔嫩艾美耳球虫(Eimeria tenella,***)贵阳株对6种抗球虫药物的耐药性,试验将1日龄黄羽蛋鸡144只随机分为地克珠利组(D组)、妥曲珠利组(T组)、莫能菌素组(M组)、盐酸氯苯胍组(Y组)、癸氧喹酯组(G组)和磺胺氯吡嗪钠组(H组)6个给药组及感染模型组(C组)和空白对照组(K组),每组18只鸡,在14日龄时,对6个给药组分别连续给药8 d;15日龄时,除K组外,其余各组一次口服接种***贵阳株孢子化卵囊2×10^(4)个,观察各组雏鸡临床症状,计算雏鸡增重、相对增重率、料肉比、盲肠病变记分、每克盲肠内容物卵囊数和存活率、最适抗球虫活性百分数、盲肠病变记分减少率、相对卵囊产量和抗球虫指数(ACI),综合判断***贵阳株对6种抗球虫药物的耐药性。结果表明:口服接种***贵阳株孢子化卵囊3 d后,除K组外,各组雏鸡均表现出食欲下降、排血便等临床症状;D组、G组和Y组雏鸡的食欲、饮水及精神状态等较C组稍好,症状较轻。D组增重和相对增重率最大,增重显著高于C组(P<0.05);且料肉比最低,显著低于C组(P<0.05)。D组、Y组和G组盲肠病变记分显著低于C组和H组(P<0.05);D组、T组、M组、Y组和G组每克盲肠内容物中的卵囊数显著低于C组和H组(P<0.05)。M组存活率为90%,其他各组均为100%;D组、G组、Y组ACI>180,D组最佳(ACI=196.60)。***贵阳株对地克珠利无耐药性,对盐酸氯苯胍和癸氧喹酯轻度耐药,对妥曲珠利中度耐药,对磺胺氯吡嗪钠和莫能菌素完全耐药。说明贵阳地区在防治***病时,应将地克珠利作为首选药物,盐酸氯苯胍和癸氧喹酯作为备选药物(抑制球虫在体内增殖的效果较好),停止使用妥曲珠利、磺胺氯吡嗪钠和莫能菌素,并注意轮换、交叉、联合用药,避免产生耐药性。

关键词：蛋鸡柔嫩艾美耳球虫病变值卵囊值抗球虫指数化学抗球虫药物耐药性

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