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基于“从顺其宜”理论探讨参苓白术散通过SGLT1调控“糖偏好-肠-脑轴”干预肥胖2型糖尿病

辽宁中医杂志 2024年

作者：朱连连路童杨可威战丽彬辽宁中医药大学中医脏象理论及应用教育部重点实验室辽宁省中医脾脏象现代研究重点实验室辽宁中医药大学附属医院

肥胖（Obesity）和2型糖尿病（Type 2 Diabetes Mellitus，T2DM）等代谢疾病的防治已经成为全球医学界的重大和疑难课题。研究发现，大多数肥胖T2DM患者表现出明显的甘味偏嗜是肠-脑轴信号传导的结果，钠-葡萄糖共转运蛋白1（SGLT1）在... 详细信息

肥胖（Obesity）和2型糖尿病（Type 2 Diabetes Mellitus，T2DM）等代谢疾病的防治已经成为全球医学界的重大和疑难课题。研究发现，大多数肥胖T2DM患者表现出明显的甘味偏嗜是肠-脑轴信号传导的结果，钠-葡萄糖共转运蛋白1（SGLT1）在其中作为肠道识别糖的分子起关键作用。根据文献报道和课题组前期证实中药复方通过调节肠道功能对肥胖T2DM的防治具有突出作用，在此基础上，根据“从顺其宜”的中医理论，探究以甘味药物为主的参苓白术散通过调控肠道糖偏好分子SGLT1，基于肠-脑轴干预肥胖T2DM的糖代谢和糖偏好信号传导环路，进而干预肥胖T2DM的疗效机制，为进一步阐述中医从肠-脑轴治疗肥胖T2DM的生物学机制奠定基础，对中医药防治糖尿病有现实的指导意义。

关键词：参苓白术散肥胖2型糖尿病肠脑轴糖偏好钠-葡萄糖共转运蛋白1

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基于非靶向代谢组学的高脂血症大鼠肝脏和血清脂代谢异常相关生物标志物发现及人参皂苷Rb_(1)干预机制研究

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中国中药杂志 2023年第14期48卷 3922-3933页

作者：冷雪马艺鑫辽宁中医药大学中西医结合学院辽宁沈阳110847 辽宁中医药大学中医脏象理论及应用教育部重点实验室辽宁沈阳110847

通过对高脂血症大鼠肝脏及血清内源性物质进行非靶向代谢组学研究,发现高脂血症大鼠脂代谢异常的相关生物标志物,并探寻人参皂苷Rb_(1)(ginsenoside Rb_(1))改善高脂血症的作用靶点并阐明其作用机制。全自动生化仪检测各组大鼠血清内生... 详细信息

通过对高脂血症大鼠肝脏及血清内源性物质进行非靶向代谢组学研究,发现高脂血症大鼠脂代谢异常的相关生物标志物,并探寻人参皂苷Rb_(1)(ginsenoside Rb_(1))改善高脂血症的作用靶点并阐明其作用机制。全自动生化仪检测各组大鼠血清内生化指标含量;通过液相色谱-质谱联用技术(HPLC-MS)对大鼠的肝脏组织和血清代谢质谱进行分析,利用主成分分析(PCA)、正交偏最小二乘法判别分析(OPLS-DA)对比正常组、高脂血症组、人参皂苷Rb_(1)组的代谢数据,筛选潜在的生物标志物,并进一步通过KEGG数据库分析构建相关代谢通路。结果表明高脂引起大鼠血脂紊乱,而人参皂苷Rb_(1)治疗缓解了大鼠血脂紊乱情况;非靶向代谢组学结果显示高脂血症大鼠肝组织中含有297种差异代谢物,血清样本中含有294种差异代谢物,人参皂苷Rb_(1)干预高脂血症大鼠的差异性代谢物共有560种,其中回调肝脏和血清样本共同代谢物是紫苏酸(perillic acid)和N-鸟氨酰基-L-牛磺酸(N-ornithyl-L-taurine),二者可作为人参皂苷Rb_(1)改善高脂血症的潜在生物标志物;通过对其肝脏和血清的通路富集发现人参皂苷Rb_(1)可以共同参与肝脏和血清中胆碱代谢通路,此外还通过参与ABC转运蛋白,丙氨酸、天冬氨酸与谷氨酸代谢,蛋白质消化和吸收,β-丙氨酸代谢,牛磺酸和亚牛磺酸代谢,咖啡因代谢,缬氨酸、亮氨酸和异亮氨酸生物合成,花生四烯酸代谢,蛋氨酸及半胱氨酸代谢等10条通路改善大鼠血脂紊乱。

关键词：人参皂苷Rb_(1) 非靶向代谢组学高脂血症血清肝脏

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茯苓多糖通过调控Akt/mTOR/SREBP-1c信号通路对非酒精性脂肪性肝病小鼠的改善作用

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中成药 2025年第1期47卷 58-65页

作者：黄诗瑶孔亮王佳华王莉艳孙朝渭刘鑫程董禹何谷丽艳辽宁中医药大学中医学院辽宁沈阳110847 辽宁中医药大学药学院辽宁大连116600 辽宁中医药大学中医脏象理论及应用教育部重点实验室辽宁沈阳110847

目的探讨茯苓多糖对非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)小鼠的改善作用。方法48只C57BL/6小鼠随机分为空白组、模型组、辛伐他汀组(4 mg/kg)和茯苓多糖高、中、低剂量组(200、100、50 mg/kg),每组8只,采用高脂高胆固醇饮食饲喂16周复制NAFLD模型... 详细信息

目的探讨茯苓多糖对非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)小鼠的改善作用。方法48只C57BL/6小鼠随机分为空白组、模型组、辛伐他汀组(4 mg/kg)和茯苓多糖高、中、低剂量组(200、100、50 mg/kg),每组8只,采用高脂高胆固醇饮食饲喂16周复制NAFLD模型,分别灌胃给予相应药物,连续8周。观察各组小鼠体质量、肝脏系数,检测肝组织游离脂肪酸(FFA)水平,血清总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)、γ-谷氨酰转移酶(γ-GT)、丙二醛(MDA)、白细胞介素-1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平和超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性;HE染色、NAFLD活动评分(NAS)及油红O染色观察肝组织病理变化、脂质沉积情况;Western blot法检测肝组织Akt、mTOR、p-Akt、p-mTOR、SREBP-1c蛋白表达。结果与空白组比较,模型组小鼠体质量、肝脏系数、肝组织FFA水平,以及血清TC、TG、LDL-C、AST、ALT、γ-GT、MDA、IL-1β、TNF-α水平均升高(P<0.05,P<0.01),HDL-C水平及SOD、GSH-Px活性降低(P<0.05,P<0.01),肝组织存在明显的病理损伤,NAS评分升高(P<0.01),脂质沉积面积增加(P<0.01),肝组织p-Akt、p-mTOR、SREBP-1c蛋白表达升高(P<0.05);与模型组比较,辛伐他汀组和茯苓多糖高、中剂量组小鼠体质量、肝脏系数、肝组织FFA水平、血清TC、TG、LDL-C、AST、ALT、γ-GT、MDA、IL-1β、TNF-α水平降低(P<0.05,P<0.01),HDL-C水平及SOD、GSH-Px活性升高(P<0.05,P<0.01),肝组织病理损伤减轻,NAS评分降低(P<0.05,P<0.01),脂质沉积面积减少(P<0.05,P<0.01),肝组织p-Akt、p-mTOR、SREBP-1c蛋白表达降低(P<0.05)。结论茯苓多糖能改善小鼠非酒精性脂肪性肝病,其作用机制可能与抑制Akt/mTOR/SREBP-1c信号通路、逆转脂质异常代谢有关。

关键词：茯苓多糖非酒精性脂肪性肝病(NAFLD) 脂质代谢 Akt/mTOR/SREBP-1c信号通路

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基于miRNA-29c/白血病抑制因子轴探讨针刺调节脾虚大鼠肠道炎症机制研究

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中华中医药学刊 2024年第5期42卷 98-102,I0024-I0027页

作者：张家豪王建波薛亚楠曲怡董佳梓王天朗金璐刘继东辽宁中医药大学辽宁沈阳110847 辽宁中医药大学中医脏象理论及应用教育部重点实验室辽宁沈阳110847

目的观察针刺调节miRNA-29c/白血病抑制因子(leukemia inhibitory factor,LIF)轴改善脾虚大鼠结肠炎症机制,探讨“健脾益气”针刺疗法改善脾虚便溏症状现代作用机理。方法将60只SD雄性大鼠以随机数字表法分为正常组、模型组、非经非穴... 详细信息

目的观察针刺调节miRNA-29c/白血病抑制因子(leukemia inhibitory factor,LIF)轴改善脾虚大鼠结肠炎症机制,探讨“健脾益气”针刺疗法改善脾虚便溏症状现代作用机理。方法将60只SD雄性大鼠以随机数字表法分为正常组、模型组、非经非穴组、针刺组,每组15只。除正常组外,其余3组采用劳倦过度和不规律饮食复合方法建立脾虚证大鼠模型。造模成功后,针刺组电针“足三里”穴及“脾俞”穴干预治疗,非经非穴组给予电针尾尖作为对照干预,每日1次/20 min,共治疗14 d。治疗结束后,取大鼠结肠组织及全血。qPCR检测大鼠结肠组织miRNA-29/LIF轴相关基因的表达;Western blot检测大鼠白介素-6(interleukin6,IL-6)、肿瘤坏死因子α(tumornecrosisfactor-α,TNF-α)的表达;ELISA检测结肠组织中白介素-1β(interleukin1β,IL-1β)、白介素-18(interleukin18,IL-18)的含量;HE染色法观察大鼠结肠组织病理形态变化;TUNEL染色观察各组结肠组织凋亡情况;流式细胞术观察外周血单个核细胞(PBMC)凋亡状况。结果与正常组相比,模型组大鼠结肠组织LIF的表达水平明显下降(P<0.05),miRNA-29、IL-1β、IL-6、白介素-8(interleukin18,IL-8)、TNF-αmRNA表达以及IL-6、TNF-α蛋白表达水平有所升高(P<0.05);与模型组相比,针刺组大鼠结肠组织LIF表达水平明显升高(P<0.05),miRNA-29c、IL-1β、IL-6、IL-8、TNF-αmRNA表达以及IL-6、TNF-α蛋白表达水平有所降低(P<0.05),非经非穴组差异无统计学意义(P>0.05);与正常组相比,模型组大鼠结肠组织中促炎因子IL-1β、IL-18表达水平明显升高(P<0.05),与模型组相比,针刺组大鼠结肠组织中促炎因子IL-1β、IL-18的表达水平有所降低(P<0.05)。另外HE染色结果显示,针刺治疗可有效减轻结肠黏膜组织中炎症细胞浸润和杯状细胞的损失;TUNEL染色结果显示,针刺可以抑制miRNA-29c/LIF轴,改善脾虚大鼠结肠炎症,抑制结肠黏膜细胞凋亡;流式细胞术结果显示与正常组相比,模型组、非经非穴组大鼠PBMC凋亡率明显升高(P<0.05),与模型组相比,针刺组大鼠PBMC细胞凋亡率有所降低(P<0.05)。结论电针“足三里”“脾俞”穴可以调节miRNA-29c/LIF轴,抑制肠道炎症和促炎症介质的表达,进而抑制血液、结肠黏膜细胞凋亡,提高机体免疫力,从而改善脾虚便溏症状。

关键词：足三里脾俞脾虚肠道炎症 miRNA-29c/LIF

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从痰湿探讨胰岛素抵抗致代谢相关脂肪性肝病合并多囊卵巢综合征的发病机理

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中华中医药学刊 2024年

作者：柳美华卢秉久丛培玮郑佳连辽宁中医药大学辽宁中医药大学附属医院辽宁中医药大学(中医脏象理论及应用国家教育部重点实验室)

代谢相关脂肪性肝病（Metabolic associated fatty liver disease，MAFLD）为肝脂肪沉积并伴有肥胖、2型糖尿病或合并代谢相关疾病。是目前常见的肝脏疾病，其疾病谱不仅仅局限在代谢相关脂肪性肝炎、肝纤维化、肝硬化、肝细胞癌等肝脏... 详细信息

代谢相关脂肪性肝病（Metabolic associated fatty liver disease，MAFLD）为肝脂肪沉积并伴有肥胖、2型糖尿病或合并代谢相关疾病。是目前常见的肝脏疾病，其疾病谱不仅仅局限在代谢相关脂肪性肝炎、肝纤维化、肝硬化、肝细胞癌等肝脏疾病本身，还常常合并一些肝外并发症，涉及多个系统，尤其是对女性内分泌系统的危害较为严重，常常合并多囊卵巢综合征（Polycystic ovarian syndrome，PCOS），即代谢相关脂肪性肝病合并多囊卵巢综合征（MAFLD合并PCOS）。MAFLD合并PCOS 虽被认为是一种良性病变，但随着病情不断的进展，最终发展为肝硬化，甚至走向肝胞癌，不孕等疾病，严重危害女性健康，MAFLD 合并 PCOS发病机制尚不明确，吾师认为MAFLD合并PCOS的发生与脾肝肾三脏有关，痰湿贯穿 MAFLD合并PCOS疾病发展始终，从现代医学角度，目前认为可能与胰岛素抵抗（insulin Resistance，IR）有关。IR与中医“痰湿”理论高度吻合。故本文从痰湿出发探讨胰岛素抵抗在本病中发挥的重要作用进行阐述，病位在脾，温阳化气为主；病位在肝，疏肝祛湿为要；病位在肾，补肾祛湿为本，基于祛痰利湿法调控胰岛素抵抗改善MAFLD合并PCOS，为MAFLD合并PCOS的治疗打开新的思路。

关键词：痰湿胰岛素抵抗代谢相关脂肪性肝病多囊卵巢综合征祛痰利湿

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加味涤痰汤对非酒精性脂肪肝病大鼠生物节律相关基因的影响及机制

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中国实验方剂学杂志 2025年第6期31卷 115-124页

作者：庞智文刘玉宋囡王杰朱敬轩滑振裴宇鹏王群河南中医药大学郑州450046 辽宁中医药大学沈阳110847 山东中医药大学附属医院济南250011 辽宁中医药大学中医药创新工程技术中心沈阳110847 辽宁中医药大学中医脏象理论及应用教育部重点实验室沈阳110847

目的:探讨加味涤痰汤对非酒精性脂肪肝病(NAFLD)大鼠生物节律正负转录/翻译反馈回路(TTFL)相关基因的影响及其防治NAFLD的作用机制。方法:65只健康SPF雄性SD大鼠随机分为正常组(20只)、模型组(15只)、加味涤痰汤低剂量组(10只)、加味涤... 详细信息

目的:探讨加味涤痰汤对非酒精性脂肪肝病(NAFLD)大鼠生物节律正负转录/翻译反馈回路(TTFL)相关基因的影响及其防治NAFLD的作用机制。方法:65只健康SPF雄性SD大鼠随机分为正常组(20只)、模型组(15只)、加味涤痰汤低剂量组(10只)、加味涤痰汤中剂量组(10只)、加味涤痰汤高剂量组(10只)。模型组和加味涤痰汤低、中、高剂量组采用高脂饲料饲喂12周,并于第9周开始,加味涤痰汤低剂量组给予加味涤痰汤煎液2.68 g·kg^(-1)·d^(-1)、加味涤痰汤中剂量组给予加味涤痰汤煎液5.36 g·kg^(-1)·d^(-1)、加味涤痰汤高剂量组给予加味涤痰汤煎液10.72 g·kg^(-1)·d^(-1),灌胃4周,正常组和模型组给予等体积生理盐水灌胃4周。全自动生化分析仪检测大鼠血清中甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)水平,TG、游离脂肪酸(NEFA)测定试剂盒检测肝脏TG、NEFA水平,苏木素-伊红(HE)染色法观察大鼠下丘脑、肝脏病理形态学表现,油红O染色法观察大鼠肝脏脂质沉积情况,免疫组化染色法检测下丘脑、肝脏芳香烃受体核转运蛋白的类似蛋白1(BMAL1/ARNTL)水平,实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)及蛋白免疫印迹法(Western blot)检测大鼠下丘脑、肝脏BMAL1、时钟基因(CLOCK)、周期蛋白2(PER2)和隐花色素1(Cry1)mRNA和蛋白水平。结果:与正常组比较,模型组大鼠血清中TG、TC、LDL-C、AST、ALT水平显著升高(P<0.01),HDL-C水平明显降低(P<0.05),肝脏中TG、NEFA水平显著升高(P<0.01),下丘脑神经元细胞固缩深染,脑区见大量空泡,肝脏见明显脂质沉积,下丘脑和肝脏中CLOCK、BMAL1 mRNA和蛋白表达显著升高(P<0.01),Cry1、PER2 mRNA和蛋白表达显著降低(P<0.01);给予加味涤痰汤治疗后,加味涤痰汤低、中、高剂量组大鼠血清中TG、TC、LDL-C、ALT、AST水平明显降低(P<0.05,P<0.01),HDL-C水平明显升高(P<0.05),肝脏中TG、NEFA水平明显降低(P<0.05,P<0.01),下丘脑神经元细胞核固缩深染有所改善,肝脏脂质沉积状况减轻,下丘脑、肝脏中CLOCK、BMAL1 mRNA和蛋白表达明显降低(P<0.05,P<0.01),Cry1、PER2 mRNA和蛋白表达明显升高(P<0.05,P<0.01)。结论:加味涤痰汤可减轻NAFLD大鼠肝脏脂质沉积,并影响NAFLD大鼠生物节律TTFL中相关基因CLOCK、BMAL1、Cry1、PER2表达。

关键词：非酒精性脂肪肝病加味涤痰汤生物节律下丘脑脾主四时

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高内涵分析系统联合激光扫描共聚焦显微镜观察细胞间隧道纳米管

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生物化学与生物物理进展 2023年第7期50卷 1742-1754页

作者：潘鹏宇赵秋宇王英王建波李想刘春英王淳辽宁中医药大学中西医结合学院沈阳110847 辽宁中医药大学中医脏象理论及应用教育部重点实验室沈阳110847 珀金埃尔默企业管理(上海)有限公司上海201203

目的隧道纳米管(tunneling nanotubes,TNTs)是存在于细胞间的膜管样结构,具有直接且远距离的生物信息交换功能。TNTs因结构易破坏、存在时间短以及形成后不稳定,故观察其动态形成与功能存在一定难度。而本研究采用高内涵分析系统(HCA)... 详细信息

目的隧道纳米管(tunneling nanotubes,TNTs)是存在于细胞间的膜管样结构,具有直接且远距离的生物信息交换功能。TNTs因结构易破坏、存在时间短以及形成后不稳定,故观察其动态形成与功能存在一定难度。而本研究采用高内涵分析系统(HCA)联合激光扫描共聚焦显微镜(LSCM)尝试观察TNTs形成的动态过程及其对囊泡物质的转运功能。方法荧光探针标记人肺腺癌A549及顺铂耐药A549/DDP细胞,分别利用HCA观察TNTs形成过程、LSCM观察TNTs三维结构、HCA联合LSCM分析TNTs囊泡物质转运功能。结果同种肿瘤细胞(A549或A549/DDP)间、不同亚型肿瘤细胞(A549与A549/DDP)间均可形成TNTs结构;与A549细胞相比,A549/DDP细胞间TNTs结构长且粗、形成指数高(A549和A549/DDP细胞TNTs长度、直径和形成指数分别为14.71μm、2.27μm、4和25.44μm、2.59μm、11);肿瘤细胞间通过细胞接触-膜融合-细胞反向易位-胞膜融合区拉长变细,以及细胞膜凸起-膜凸起丝状伪足样拉长-膜凸起与其他细胞膜/膜凸起融合两种方式形成TNTs;TNTs囊泡转运功能具有双向性,囊泡转运速率及数量因转运阶段和供体细胞不同而存在差异,A549/DDP细胞向A549细胞进行囊泡转运过程中表现为囊泡转运速率初始快、末期慢,A549作为供体细胞向受体A549/DDP细胞转运的囊泡数量和比例高于A549/DDP作为供体细胞的反向转运。结论HCA联合LSCM可有效观察、分析TNTs动态形成过程及囊泡物质转运功能。

关键词：高内涵分析激光扫描共聚焦显微镜隧道纳米管细胞间交流细胞间转运肿瘤

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苓桂术甘汤调控自噬对多柔比星抗非酒精性脂肪肝病相关肝细胞癌的增效作用

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中国药房 2023年第19期34卷 2316-2322页

作者：曹慧敏孔亮隋国媛吴瑾贾连群辽宁中医药大学中医脏象理论及应用教育部重点实验室沈阳110847 辽宁中医药大学药学院辽宁大连116600

目的探讨苓桂术甘汤(LGZG)通过调控自噬增强多柔比星(DOX)的抗非酒精性脂肪肝病相关肝细胞癌(NAFLD-HCC)的作用及机制。方法将C57BL/6小鼠采用随机数字表法分为空白组、NAFLD-HCC组、LGZG组、DOX组、DOX+LGZG组,每组10只。采用腹腔注射... 详细信息

目的探讨苓桂术甘汤(LGZG)通过调控自噬增强多柔比星(DOX)的抗非酒精性脂肪肝病相关肝细胞癌(NAFLD-HCC)的作用及机制。方法将C57BL/6小鼠采用随机数字表法分为空白组、NAFLD-HCC组、LGZG组、DOX组、DOX+LGZG组,每组10只。采用腹腔注射二乙基亚硝胺溶液(50mg/kg)和喂养高脂饲料相结合的方法建立NAFLD-HCC小鼠模型;空白组小鼠注射等量生理盐水,给予普通饲料喂养。建模后,各给药组分别灌胃LGZG水提液(20g/kg)和/或腹腔注射DOX溶液(8mg/kg),空白组、NAFLD-HCC组灌胃等量生理盐水,每日1次,连续4周。在模型建立及药物干预期间,监测小鼠的一般情况。药物干预结束后,检测小鼠体重、肝重及肝脏系数;观察小鼠肝脏组织病理形态和纤维化程度;检测小鼠血脂水平[甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)和高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)的水平],血清中甲胎蛋白(AFP)、癌胚抗原(CEA)含量,肝脏组织中增殖标志物Ki-67、B细胞淋巴瘤2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)的表达水平,以及微管相关蛋白1A/1B-轻链3(LC3)、苄氯素1(Beclin1)、选择性自噬接头蛋白P62的蛋白表达水平。结果与空白组比较,NAFLD-HCC组小鼠随着给药时间延长活动逐渐减少,精神萎靡,毛发蓬乱无光泽,体重显著降低(P<0.05),肝重有上升趋势,肝脏系数显著增加(P<0.05);小鼠肝脏组织炎症细胞大量浸润,部分细胞出现气球样变及小细胞性增生的病变,肝脏纤维化程度加重;血清中TC、TG、LDL-C水平及AFP、CEA含量均显著升高,HDL-C水平显著降低(P<0.05);肝脏组织中Ki-67、Bcl-2蛋白表达水平均显著升高(P<0.05),Bax蛋白表达水平有降低趋势;肝脏组织中Beclin1蛋白表达水平显著降低(P<0.05),LC3Ⅱ/LC3Ⅰ比值有所降低,P62蛋白表达水平有所升高。与NAFLD-HCC组比较,DOX组、LGZG组及DOX+LGZG组小鼠上述指标均有不同程度改善,且DOX联合LGZG的干预效果优于DOX。结论LGZG联合DOX能够协同促进肿瘤细胞的凋亡,增强NAFLD-HCC化疗敏感性,有效减缓NAFLD-HCC的发生发展,其机制可能与调节肿瘤细胞自噬的发生有关。

关键词：苓桂术甘汤非酒精性脂肪肝病相关肝细胞癌自噬多柔比星化疗增敏

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基于IRE1α/ASK1/JNK通路探讨补阳还五汤对缺血性脑卒中大鼠神经功能恢复作用及机制

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中国中药杂志 2025年

作者：张馨蓉王天朗张家豪金璐王建波薛亚楠曲怡辽宁中医药大学辽宁中医药大学中医脏象理论及应用教育部重点实验室辽宁中医药大学心脑合病中西医结合防治技术国家地方联合工程实验室辽宁中医药大学针灸推拿学院

该研究旨在探讨补阳还五汤调节内质网应激肌醇依赖性激酶1α（IRE1α）/凋亡信号调节激酶1（ASK1）/c-Jun氨基末端激酶（JNK）通路，改善脑缺血/再灌注损伤（CIRI）大鼠神经功能的作用及机制。SPF级雄性SD大鼠，随机分为假手术组、模型... 详细信息

该研究旨在探讨补阳还五汤调节内质网应激肌醇依赖性激酶1α（IRE1α）/凋亡信号调节激酶1（ASK1）/c-Jun氨基末端激酶（JNK）通路，改善脑缺血/再灌注损伤（CIRI）大鼠神经功能的作用及机制。SPF级雄性SD大鼠，随机分为假手术组、模型组、补阳还五汤组、依达拉奉组。除假手术组外，其余各组采用改良线栓法制备大脑中动脉栓塞再灌注（MCAO/R）模型。治疗结束后，通过Zea Longa神经功能评分检测大鼠神经功能；步态分析检测运动功能；2，3，5-三苯基氯化四氮唑（TTC）染色检测脑组织相对梗死面积；尼式染色观察神经元细胞结构；蛋白免疫印迹法（Western blot）及实时荧光定量PCR（RT-qPCR）检测脑组织IRE1α、ASK1、JNK、B细胞淋巴瘤-2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、半胱天冬氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)蛋白及mRNA表达水平；免疫组化检测脑组织IRE1α、ASK1、JNK阳性表达；免疫荧光检测脑组织Bax、Bcl-2、Caspase-3表达水平。结果显示，与假手术组相比，模型组大鼠神经功能评分增高（P＜0.01），双上肢触地面积及强度比值增高（P＜0.01），脑组织相对梗死面积增加（P＜0.05），尼式阳性细胞数减少（P＜0.01），脑组织IRE1α、ASK1、JNK、Bax、Caspase-3蛋白及mRNA表达水平升高（P＜0.05），Bcl-2蛋白及mRNA表达水平降低（P＜0.05）；与模型组相比，补阳还五汤组与依达拉奉组神经功能评分降低（P＜0.05），双上肢触地面积及强度比值降低（P＜0.05），脑组织相对梗死面积减小（P＜0.05），神经元细胞损伤减轻，尼式染色阳性细胞数升高（P＜0.05），脑组织IRE1α、ASK1、JNK、Bax、Caspase-3蛋白及mRNA表达水平降低（P＜0.05），Bcl-2蛋白及mRNA表达水平升高（P＜0.05）。结果表明，补阳还五汤能够有效改善CIRI大鼠脑损伤，其作用机制可能与调控内质网应激IRE1α/ASK1/JNK通路有关。

关键词：脑缺血/再灌注损伤 IRE1α/ASK1/JNK 补阳还五汤内质网应激

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化瘀祛痰方调控MAPK通路对AS小鼠主动脉巨噬细胞的影响及机制研究

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时珍国医国药 2024年第6期35卷 1357-1360页

作者：刘继东樊程程王天朗李阳王建波薛亚楠曲怡辽宁中医药大学辽宁沈阳110032 辽宁中医药大学中医脏象理论及应用教育部重点实验室辽宁沈阳110847

目的通过观察MAPK炎性信号通路的改变,探讨化瘀祛痰方抗AS的具体作用机制。方法将60只SPF级雄性ApoE^(-/-)小鼠随机分为空白组、模型组、西药组、中药低、中、高剂量组,除空白组外,其余小鼠高脂饲料喂养90d制备动脉粥样硬化模型,90d后... 详细信息

目的通过观察MAPK炎性信号通路的改变,探讨化瘀祛痰方抗AS的具体作用机制。方法将60只SPF级雄性ApoE^(-/-)小鼠随机分为空白组、模型组、西药组、中药低、中、高剂量组,除空白组外,其余小鼠高脂饲料喂养90d制备动脉粥样硬化模型,90d后西药组每日予辛伐他汀灌胃,中药低、中、高剂量予化瘀祛痰方灌胃,其余两组给予同体积生理盐水。采用HE染色观察小鼠主动脉组织形态;采用生化法检测小鼠血清甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)含量;蛋白免疫印迹法(Western Blot)检测各组小鼠主动脉JNK、p-JNK、P38、p-P38蛋白的磷酸化表达;酶联免疫吸附测定(ELISA)测定各组小鼠血清中VCAM-1和ICAM-1含量;采用流式细胞术检测小鼠血液中巨噬细胞百分比;采用免疫组化法检测主动脉血小板-内皮细胞粘附分子(CD31)的蛋白表达。结果与空白组比较,模型组小鼠主动脉内膜细胞增生,有大量泡沫细胞沉积,血清TG、TC、LDL-C、VCAM-1、ICAM-1含量升高(P<0.05),HDL-C含量降低(P<0.05),血液中巨噬细胞百分比上升(P<0.05),主动脉组织p38,JNK磷酸化程度、CD31阳性表达升高;与模型组比较,化瘀祛痰方组和辛伐他汀组小鼠主动脉斑块面积减少,血清TG、TC、LDL-C、VCAM-1、ICAM-1含量降低(P<0.05),HDL-C含量升高(P<0.05),血液中巨噬细胞百分比下降(P<0.05),主动脉组织p38,JNK磷酸化程度、CD31阳性表达降低(P<0.05)。结论化瘀祛痰方可以降低血液巨噬细胞百分比,减轻巨噬细胞泡沫化程度,减少斑块新生血管数量,从而稳定斑块,其机制与调控MAPK炎性信号通路有关。

关键词：化瘀祛痰方动脉粥样硬化 MAPK通路巨噬细胞血管新生

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