检索结果-内蒙古大学图书馆

食品工业 2014年第3期35卷 99-101页

作者：张岩黄晓君王英叶文才遵义医学院珠海校区化学教研室珠海519041 暨南大学药学院中药及天然药物研究所广州510632 暨南大学中药药效物质基础及创新药物研究广东省高校重点实验室广州510632

研究黑水银莲花根茎的化学成分。采用硅胶、ODS、Sephadex LH-20及RP-HPLC等色谱技术对黑水银莲花根茎化学成分进行分离纯化,并根据理化性质及波谱数据鉴定化合物的结构。结果表明,从黑水银莲花根茎的95%乙醇提取物中分离得到6个化合物... 详细信息

研究黑水银莲花根茎的化学成分。采用硅胶、ODS、Sephadex LH-20及RP-HPLC等色谱技术对黑水银莲花根茎化学成分进行分离纯化,并根据理化性质及波谱数据鉴定化合物的结构。结果表明,从黑水银莲花根茎的95%乙醇提取物中分离得到6个化合物,分别鉴定为4'-O-methylequisetumpyrone(1)、α-D-呋喃果糖甲酯(2)、β-D-葡萄糖(3)、α-D-葡萄糖(4)、半乳糖醇(5)、胡萝卜苷(6)。

关键词：黑水银莲花化学成分非皂苷类成分

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Nix和miR-520h对神经胶质瘤发生的影响及相互作用

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中国临床解剖学杂志 2014年第5期32卷 590-594页

作者：胡晓芳王永魁邱小忠王国保遵义医学院珠海校区人体解剖与组织胚胎学教研室广东珠海519041 南方医科大学临床解剖学研究所广东省组织构建与检测重点实验室广州510515 南方医科大学南方医院肾内科广州510515

目的通过综合分析肿瘤标本中基因和蛋白表达,及体外生物学作用的检测,来评价胶质瘤中Nix蛋白的作用以及Nix蛋白与miR-520h的关系。方法选取46例胶质瘤标本,RT-PCR检测miR-520h基因的表达,Western blotting检测Nix蛋白的表达;培养U251胶... 详细信息

目的通过综合分析肿瘤标本中基因和蛋白表达,及体外生物学作用的检测,来评价胶质瘤中Nix蛋白的作用以及Nix蛋白与miR-520h的关系。方法选取46例胶质瘤标本,RT-PCR检测miR-520h基因的表达,Western blotting检测Nix蛋白的表达;培养U251胶质瘤细胞,Western blotting检测Nix蛋白的表达;构建靶向Nix基因的shRNA敲除U251细胞中Nix基因(Nix-kn),Western blotting检测Nix,IKKα,i-κBα和p-NF-κB/p65等蛋白的表达水平;has-miR-520h抑制剂转染U251细胞,Western blotting检测Nix,IKKα,i-κBα和p-NF-κB/p65等蛋白的表达水平。结果胶质瘤标本的基因和蛋白检测表明,miR-520h的高表达伴随着Nix蛋白的高表达;体外实验结果表明,与正常培养的U251相比,缺氧培养的U251细胞Nix表达较高;与Nix-kn组相比,Nix-wt组胶质瘤细胞Nix和p-NF-κB/p65表达均明显增高,而NF-κB活性抑制剂蛋白i-κBα表达降低;200 nmol/L的has-miR-520h抑制剂处理细胞后,与正常对照组比较,Nix蛋白表达显著减少,而p-NF-kappaB/p65蛋白表达显著增加。结论在神经胶质瘤的发生发展中miR-520h与Nix蛋白的表达相关;miR-520h可能通过促进Nix合成,从而成为一个强大的肿瘤激活剂。

关键词：胶质瘤 Nix microRNA-520h NF-κB

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靶向UL27shRNA抑制Ⅱ型单纯疱疹病毒在HEK293细胞中的复制

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中国生物化学与分子生物学报 2013年第8期29卷 759-766页

作者：吕延成潘晓瑜周丹丹袁俊杰黄畅遵义医学院珠海校区生化教研室广东省珠海519040

按照shRNA(small hairpin RNA)设计原则,针对Ⅱ型单纯疱疹病毒(herpes simplex virus type2,HSV-2)的UL27基因序列保守区域筛选设计、合成4条干扰靶序列并构建表达UL27序列特异性siRNA(short interfering RNA)的质粒载体pGPU6/GFP/Neo.通过脂质体介导重组表达载体转染HEK293细胞(human embryonic kidney 293 cell)再接种HSV-2.采用实时荧光定量PCR(real-timefluorescent quantitative PCR)技术检测UL27各组的mRNA转录水平,终点滴定法检测细胞上清液中的病毒滴度,四甲基偶氮唑盐(four methyl thiazolyl tetrazolium,MTT)法测定细胞存活率,Western印迹法检测蛋白表达效果.结果显示,UL27shRNA75组对UL27基因mRNA表达抑制效果最佳,同时能显著抑制感染细胞的CPE(cytopathic effect,CPE),降低上清液中的病毒感染滴度,提高细胞的生存率,抑制UL27基因的蛋白表达.提示本研究构建的pGPU6/GFP/Neo-UL27表达载体能在细胞水平上不同程度地干扰HSV-2 UL27基因表达,抑制HSV-2在HEK293细胞中复制.

关键词： RNA干扰 Ⅱ型单纯疱疹病毒 UL27基因

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满族传统体育发展研究

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体育文化导刊 2013年第9期 118-122页

作者：蔺雪莲遵义医学院珠海校区体育教研室广东珠海519041

采用文献资料法等研究满族传统体育形成、发展与完善的历史进程,探究其特有的健身价值。主要结论:满族传统体育的形成以自然环境为基础、以生活方式为内容、以提高战斗能力为手段、以满足娱乐为目的,满族传统体育的价值主要有促进体质... 详细信息

采用文献资料法等研究满族传统体育形成、发展与完善的历史进程,探究其特有的健身价值。主要结论:满族传统体育的形成以自然环境为基础、以生活方式为内容、以提高战斗能力为手段、以满足娱乐为目的,满族传统体育的价值主要有促进体质健康、缓解心理压力、培养坚韧不拔的意志品质。建议:合理挖掘、优先发展、有效整合满族传统体育项目,在构建具有中国特色的全民健身体系的进程中发挥其特有的社会职能。

关键词：民族传统体育体育史满族

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携带hTERT基因的重组慢病毒载体的构建及鉴定

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遵义医学院学报 2014年第2期37卷 165-169页

作者：张青峰张芳婷申慧芳高书颖遵义医学院珠海校区生物化学与分子生物学教研室广东珠海519041 北京大学深圳医院中心实验室广东深圳518036

目的构建携带人端粒酶逆转录酶(hTERT)基因的重组慢病毒载体,并鉴定其在HeLa细胞中的表达。方法采用Gateway技术使克隆载体pENTR221-hTERT与慢病毒表达载体pLenti6.3/V5-DEST进行重组反应,构建重组慢病毒载体pLenti6.3/V5-hTERT;将重组... 详细信息

目的构建携带人端粒酶逆转录酶(hTERT)基因的重组慢病毒载体,并鉴定其在HeLa细胞中的表达。方法采用Gateway技术使克隆载体pENTR221-hTERT与慢病毒表达载体pLenti6.3/V5-DEST进行重组反应,构建重组慢病毒载体pLenti6.3/V5-hTERT;将重组慢病毒载体与病毒包装质粒混合物pLP1、pLP2和pLP/VSVG共转染人胚肾293FT细胞,制备重组慢病毒颗粒;将重组慢病毒感染HeLa细胞,利用杀稻瘟菌素筛选阳性细胞克隆,PCR法检测外源hTERT基因在阳性细胞中的染色体整合状况,RT-PCR检测重组慢病毒感染对细胞hTERT基因mRNA表达的影响。结果经鉴定,重组慢病毒载体pLenti6.3/V5-hTERT携带hTERT基因,hTERT基因包装至病毒颗粒。重组慢病毒感染HeLa细胞后,得到具有杀稻瘟菌素抗性的细胞克隆,其染色体DNA整合有外源hTERT基因,细胞内hTERT基因mRNA的表达水平高于未感染慢病毒的对照细胞。结论成功构建了携带hTERT基因的重组慢病毒载体,能够提高HeLa细胞hTERT基因mRNA的表达量。

关键词：人端粒酶逆转录酶基因重组慢病毒共转染

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葡萄籽原花青素对肾血管性高血压大鼠血压和TNF-α水平的影响

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中药药理与临床 2013年第4期29卷 70-73页

作者：张先杰郭荣年张妍孙柳青唐剑涛靳俊峰吴秀香遵义医学院珠海校区病理学与病理生理学教研室珠海519090 遵义医学院珠海校区计算机教研室珠海519090

目的:探讨葡萄籽原花青素(GSP)对肾血管性高血压(RH)大鼠动态血压和血清中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)含量、腹主动脉、肾皮质和海马组织中TNF-α蛋白表达的影响。方法:采用两肾一夹(2K1C)法建立RH大鼠模型,并设立假手术组(n=7)。术后2周,... 详细信息

目的:探讨葡萄籽原花青素(GSP)对肾血管性高血压(RH)大鼠动态血压和血清中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)含量、腹主动脉、肾皮质和海马组织中TNF-α蛋白表达的影响。方法:采用两肾一夹(2K1C)法建立RH大鼠模型,并设立假手术组(n=7)。术后2周,选取鼠尾动脉收缩压(SBP)超过130mmHg的大鼠28只为RH大鼠,并随机分为4组(n=7):高血压模型组;低剂量葡萄籽原花青素治疗组(50mg/kg/d);高剂量葡萄籽原花青素治疗组(200mg/kg/d)及卡托普利阳性对照治疗组(30mg/kg/d),观察各组大鼠尾动脉SBP的动态变化,治疗6周后,分别采用ELISA和Western blotting法检测各组大鼠血清和腹主动脉、肾皮质及海马组织中TNF-α水平。结果:应用葡萄籽原花青素治疗后,与假手术组相比,高血压模型组大鼠尾动脉SBP一直明显升高;治疗6周后,高血压模型组大鼠血清中TNF-α含量和腹主动脉、肾皮质及海马组织中TNF-α的蛋白表达水平均较假手术组明显升高。与高血压模型组相比,用葡萄籽原花青素治疗2周即可使RH大鼠尾动脉SBP降低,用药6周后降压效果更明显。同时亦能显著降低RH大鼠血清中TNF-α含量和腹主动脉、肾皮质及海马组织中TNF-α的蛋白表达水平,其中以高剂量葡萄籽原花青素治疗组的作用尤为明显,与卡托普利治疗组的作用相当。结论:葡萄籽原花青素可以通过减少RH大鼠体内促炎介质TNF-α的生成而发挥降压和抗炎作用。

关键词：葡萄籽原花青素肾血管性高血压 TNF-α

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Ad-IL-24联合DDP对A549细胞体外生长的影响

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中国现代医药杂志 2014年第7期16卷 1-4页

作者：郭锦锦王少慧孙万邦杨吉成盛伟华缪竞诚遵义医学院珠海校区贵州省免疫学研究生教育创新基地广东珠海519041 苏州大学细胞与分子生物学教研室

目的探讨白细胞介素24基因腺病毒载体(Ad-IL-24)联合顺铂体外对人肺腺癌的抑制效应及诱导人肺腺癌的细胞凋亡机制。方法用Ad-IL-24、DDP、Ad-IL-24联合DDP分别体外作用于A549细胞12h、24h、48h,采用CCK8法及流式细胞术(FCM)分别检测细... 详细信息

目的探讨白细胞介素24基因腺病毒载体(Ad-IL-24)联合顺铂体外对人肺腺癌的抑制效应及诱导人肺腺癌的细胞凋亡机制。方法用Ad-IL-24、DDP、Ad-IL-24联合DDP分别体外作用于A549细胞12h、24h、48h,采用CCK8法及流式细胞术(FCM)分别检测细胞增殖抑制率和细胞凋亡率。结果 Ad-IL-24作用于A549细胞48h后细胞增殖抑制率为27.7%,Ad-IL-24联合DDP作用于A549细胞48h后细胞增殖抑制率为45.2%;Ad-IL-24作用于A549细胞48h细胞凋亡率为22.9%,联合用药后细胞凋亡率为35.9%。结论 Ad-IL-24对A549细胞具有生长抑制作用,能引起A549细胞凋亡,联合DDP用药后效果更佳,Ad-IL-24具有化疗增敏效应。

关键词：腺病毒白细胞介素24 顺铂肺腺癌基因治疗

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MTHFR基因(C677T)多态性与NTDs关系Meta分析

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中国公共卫生 2013年第9期29卷 1324-1329页

作者：刘俊何俊峰李佩珍遵义医学院营养与食品卫生学教研室贵州遵义563003 遵义医学院珠海校区预防医学教研室

目的运用Meta分析方法综合评价亚甲基四氢叶酸还原酶(MTHFR)基因C677T多态性与神经管畸形的关系。方法检索PubMed、CNKI等多个中英文数据库的相关文献,收集所有关于MTHFR基因C677T多态性与神经管畸形关系的病例对照研究,提取所需数据应... 详细信息

目的运用Meta分析方法综合评价亚甲基四氢叶酸还原酶(MTHFR)基因C677T多态性与神经管畸形的关系。方法检索PubMed、CNKI等多个中英文数据库的相关文献,收集所有关于MTHFR基因C677T多态性与神经管畸形关系的病例对照研究,提取所需数据应用SPSS 13.0和RevMan 5.0软件进行Meta分析。结果共有27篇符合条件的文献纳入分析,包括2 245例病例人群和3 678名对照人群;Meta分析表明,母亲携带CT基因型者子代发生神经管畸形(NTDs)的风险为母亲携带CC基因型者子代的1.41倍(OR=1.41,95%CI=1.16～1.71),其中国内母亲携带CT基因型者子代发生NTDs的风险为母亲携带CC基因型者子代的2.06倍(OR=2.06,95%CI=1.44～2.95);母亲携带TT基因型者子代发生NTDs的风险为母亲携带CC基因型者子代的1.97倍(OR=1.97,95%CI=1.49～2.61),其中国内和国外母亲携带TT基因型者子代发生NTDs的风险分别为母亲携带CC基因型者子代的3.12倍(OR=3.12,95%CI=1.50～6.51)和1.61倍(OR=1.61,95%CI=1.30～1.98)。结论 MTHFR C677T位点基因多态性与神经管畸形的易感性密切相关,但其病因关联性仍有待于在人群中进行大规模队列研究加以论证。

关键词：神经管畸形(NTDs) 亚甲基四氢叶酸还原酶(MTHFR) 基因多态性 Meta分析

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3种中成药中西红花苷-1和栀子苷的UPLC含量测定

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遵义医学院学报 2014年第6期37卷 650-652页

作者：国佳莹陈阳邓亮郝顺蔡仕宁王雅溶遵义医学院珠海校区药剂学教研室广东珠海519041 昆明医科大学药学院暨云南省天然药物药理重点实验室云南昆明650500

目的分别测定妇科分清丸、黄连上清丸和芎菊上清片中栀子苷和西红花苷-1的含量。方法以前期分离的栀子苷和西红花苷-1为对照品,采用超高效液相色谱法（UPLC）对3家中药厂生产的含栀子的中成药中栀子苷和西红花苷-1的含量进行测定。结果 ... 详细信息

目的分别测定妇科分清丸、黄连上清丸和芎菊上清片中栀子苷和西红花苷-1的含量。方法以前期分离的栀子苷和西红花苷-1为对照品,采用超高效液相色谱法（UPLC）对3家中药厂生产的含栀子的中成药中栀子苷和西红花苷-1的含量进行测定。结果 UPLC法准确度和精密度高,方法稳定,3种中成药中栀子苷含量为0.19%-0.47%,而西红花苷-1含量在0.014%-0.56%。结论所建方法准确、简便、快速,可用于以上3种中成药中栀子苷和西红花苷-1的含量控制方法。

关键词：栀子苷红花苷-1 妇科分清丸黄连上清丸芎菊上清片超高效液相色谱

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Ras、MAPK、Cyclin D1与皮肤瘢痕癌的相关性研究

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临床与实验病理学杂志 2013年第4期29卷 393-397页

作者：郭瑞珍王海青欧小波遵义医学院珠海校区病理学教研室珠海519041

目的探讨Ras/Raf/MAPK信号通路和通路下游靶基因Cyclin D1与皮肤瘢痕癌的相关性。方法 (1)用激光扫描共聚焦显微技术对病理性瘢痕和瘢痕癌进行K-ras、H-ras、N-ras免疫荧光双标记;(2)提取DNA,检测病理性瘢痕和瘢痕癌组织中K-ras、H-ras... 详细信息

目的探讨Ras/Raf/MAPK信号通路和通路下游靶基因Cyclin D1与皮肤瘢痕癌的相关性。方法 (1)用激光扫描共聚焦显微技术对病理性瘢痕和瘢痕癌进行K-ras、H-ras、N-ras免疫荧光双标记;(2)提取DNA,检测病理性瘢痕和瘢痕癌组织中K-ras、H-ras、N-ras第12、13位密码子的突变;(3)采用免疫组化SP法检测正常皮肤、病理性瘢痕和瘢痕癌组织中MAPK、Cyc-lin D1蛋白的表达;(4)采用原位杂交技术检测3组组织中MAPK mRNA、Cyclin D1 mRNA的表达。结果 (1)免疫荧光双标记K-ras、H-ras、N-ras在病理性瘢痕上皮中呈较弱荧光为弱阳性,在瘢痕癌组织中呈较强荧光为强阳性;(2)在病理性瘢痕和瘢痕癌中未发现K-ras、H-ras、N-ras第12、13位密码子突变;(3)MAPK和Cyclin D1的蛋白及mRNA在正常皮肤表皮均呈阴性或弱阳性,在皮肤病理性瘢痕上皮中呈弱阳性,在瘢痕癌组织中呈强阳性。瘢痕癌组表达水平(阳性面积)、表达强度(平均光密度)与正常皮肤、病理性瘢痕组比较,差异均有统计学意义(P<0.01),正常皮肤组与病理性瘢痕组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论 (1)Ras、MAPK、Cyclin D1基因的高表达与瘢痕癌的发生密切相关,各种基因共同发挥了协同作用;(2)K-ras、H-ras、N-ras第12、13位密码子突变与瘢痕癌的发生无相关性。

关键词：瘢痕癌信号传导通路 Cyclin D1 免疫荧光基因突变免疫组织化学

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