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郑州大学学报（医学版） 2005年第5期40卷 833-834页

作者：冯若张娓杨继要刘国红张钦宪郑州大学基础医学院组织学与胚胎学教研室河南省分子医学重点实验室郑州450052

目的:检测二硫苏糖醇(DTT)诱导Eca109细胞凋亡及磷酸化P38(PP38)水平。方法:取对数生长期Eca109细胞分为3组:2mmol/L DTT处理组、PP38抑制剂SB203580孵育细胞2h后再加DTT处理组及对照组。应用流式细胞仪检测各组细胞凋亡率;采用免疫组... 详细信息

目的:检测二硫苏糖醇(DTT)诱导Eca109细胞凋亡及磷酸化P38(PP38)水平。方法:取对数生长期Eca109细胞分为3组:2mmol/L DTT处理组、PP38抑制剂SB203580孵育细胞2h后再加DTT处理组及对照组。应用流式细胞仪检测各组细胞凋亡率;采用免疫组织化学技术检测P38的磷酸化水平。结果:DTT组、SB203580+DTT组及对照组的细胞凋亡率分别为16.8%、7.8%和3.1%。DTT组和DTT+SB203580组细胞凋亡率均高于对照组(P<0.01);与DTT组相比,SB203580+DTT组凋亡率下降(P<0.01)。DTT组PP38水平高于对照组(P<0.01)。结论:DTT可诱导人食管癌Eca109细胞凋亡,P38磷酸化起促进凋亡的作用。

关键词： P38 凋亡二硫苏糖醇 Eca109细胞

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食管癌组织中hMSH2基因启动子区甲基化检测

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中华肿瘤杂志 2005年第9期27卷 541-543页

作者：张功员马春晓刘秋亮乐晓平丁一张钦宪河南省分子医学重点学科开放实验室郑州大学基础医学院组织学与胚胎学教研室郑州450052 平顶山市第一人民医院郑州大学第一附属医院

目的检测食管癌组织中hMSH2基因启动子区甲基化状态,探讨与食管癌发生、发展的关系.方法 32例食管癌患者术前均未接受放疗、化疗等其他治疗,手术切除后30 min内,在癌组织及正常食管黏膜组织各取约1.0 cm×1.0 cm×1.0 cm大小的... 详细信息

目的检测食管癌组织中hMSH2基因启动子区甲基化状态,探讨与食管癌发生、发展的关系.方法 32例食管癌患者术前均未接受放疗、化疗等其他治疗,手术切除后30 min内,在癌组织及正常食管黏膜组织各取约1.0 cm×1.0 cm×1.0 cm大小的组织块标本,立即储存于-80℃冰箱中,冻存备提DNA.采用甲基化特异PCR法(MSP法)检测食管癌及正常食管黏膜组织中错配修复基因hMSH2启动子区甲基化的表达.结果 32例食管癌组织中,hMSH2启动子区甲基化发生率为34.4% (11/32),正常食管黏膜组织未发现甲基化,两组甲基化阳性率相比较,差异有统计学意义(P﹤0.01).高龄患者(≥70岁)癌组织中启动子区hMSH2甲基化发生率(85.7%)明显高于较低龄患者(﹤70岁,20.0%;P<0.05).病理组织学Ⅲ～Ⅳ级食管癌组织中,hMSH2启动子区甲基化发生率(70.0%)明显高于Ⅰ～Ⅱ级(18.2%,P<0.05).结论食管癌组织中,hMSH2基因启动子区甲基化与年龄和病理组织学分级可能有关.

关键词：食管肿瘤 hMSH2基因启动子甲基化基因启动子区甲基化食管癌组织 hMSH2 检测病理组织学黏膜组织

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雷公藤多甙对局灶性脑缺血再灌注大鼠脑组织单胺类递质含量的影响mwilfo

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郑州大学学报（医学版） 2005年第6期40卷 1061-1064页

作者：张艳贾丹辉刘宗文何美霞张钦宪郑州大学基础医学院药理学教研室郑州450052 河南省肿瘤病理重点实验室郑州450052 河南省医学科学研究所药理室郑州450003 郑州大学基础医学院组织学与胚胎学教研室郑州450052

目的:观察雷公藤多甙(TWP)对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤脑组织单胺类神经递质含量的影响。方法:Wistar大鼠60只,随机均分为6组。假手术组、缺血再灌注组每d灌胃生理盐水,尼莫地平(Nim)组、雷公藤多甙高、中、低剂量组,分别给予Nim10mg/... 详细信息

目的:观察雷公藤多甙(TWP)对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤脑组织单胺类神经递质含量的影响。方法:Wistar大鼠60只,随机均分为6组。假手术组、缺血再灌注组每d灌胃生理盐水,尼莫地平(Nim)组、雷公藤多甙高、中、低剂量组,分别给予Nim10mg/kg,TWP45mg/kg、30mg/kg、15mg/kg,灌胃给药,1次/d,连用5d。末次给药后1h,采用线栓法制作大鼠大脑中动脉局灶性缺血再灌注模型,用荧光分光光度计测定缺血2h再灌注1h时各组大鼠大脑皮层及纹状体去甲肾上腺素(NE)、多巴胺(DA)、5羟色胺(5HT)含量。结果:缺血再灌注组大鼠大脑皮层及纹状体NE、DA、5HT含量均较假手术组降低;与缺血再灌注组比较,雷公藤多甙各组及尼莫地平组大鼠大脑皮层及纹状体NE、DA、5HT含量均升高(P<0.05)。结论:雷公藤多甙可减少缺血再灌注期间单胺类神经递质的释放。

关键词：雷公藤多甙脑缺血再灌注去甲肾上腺素多巴胺 5-羟色胺大鼠

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胃腺癌组织中血管内皮生长因子的表达

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郑州大学学报（医学版） 2005年第6期40卷 1109-1112页

作者：王怀生张钦宪陈奎生高冬玲河南省肿瘤病理重点实验室郑州大学第一附属医院病理科郑州大学基础医学院组织学与胚胎学教研室郑州450052

目的:探讨胃腺癌组织中血管内皮生长因子(VEGF)的表达。方法:应用免疫组织化学SP方法,对56例胃腺癌组织,其中男32例,女24例,年龄31～75(56.38±12.1)岁;组织学分级为Ⅰ级15例,Ⅱ级29例,Ⅲ级12例;TNM分期Ⅰ期4例,Ⅱ期16例,Ⅲ期24例,... 详细信息

目的:探讨胃腺癌组织中血管内皮生长因子(VEGF)的表达。方法:应用免疫组织化学SP方法,对56例胃腺癌组织,其中男32例,女24例,年龄31～75(56.38±12.1)岁;组织学分级为Ⅰ级15例,Ⅱ级29例,Ⅲ级12例;TNM分期Ⅰ期4例,Ⅱ期16例,Ⅲ期24例,Ⅳ期12例;高分化腺癌11例,中等分化腺癌25例,低分化腺癌20例;浸润至黏膜下层以内15例,肌层27例,浆膜层14例;有淋巴结转移者34例,无淋巴结转移者22例;40例癌旁不典型增生组织和56例正常胃组织中VEGF的表达情况进行检测,并分析其与临床病理特征的关系。结果:胃腺癌组织、癌旁不典型增生组织及正常胃黏膜组织中VEGF的阳性表达率分别为69.64%、45.00%和23.21%,3组间两两比较,差异均有统计学意义(P<0.01);VEGF与胃腺癌的浸润深度、淋巴结转移、组织学分级、临床病理分期有关(P<0.05或0.01),与患者年龄、性别及胃腺癌的分化程度无关(P>0.05)。结论:VEGF与胃腺癌的发生发展及浸润转移有关。

关键词：血管内皮生长因子胃肿瘤浸润转移

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胃腺癌组织中胰岛素样生长因子-Ⅰ的表达

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郑州大学学报（医学版） 2005年第6期40卷 1117-1119页

作者：夏惠丽张钦宪陈奎生高冬玲樊振军河南省肿瘤病理重点实验室郑州大学基础医学院组织学与胚胎学教研室郑州450052 平顶山市第一人民医院消化科平顶山467001

目的:探讨胃腺癌组织中胰岛素样生长因子Ⅰ(IGFⅠ)的表达及其与胃腺癌发生发展的关系。方法:应用免疫组织化学方法,检测56例胃腺癌组织(浸润至黏膜层3例,黏膜下层12例,肌层27例,浆膜层14例;有淋巴结转移者34例,无淋巴结转移者22例;TNM... 详细信息

目的:探讨胃腺癌组织中胰岛素样生长因子Ⅰ(IGFⅠ)的表达及其与胃腺癌发生发展的关系。方法:应用免疫组织化学方法,检测56例胃腺癌组织(浸润至黏膜层3例,黏膜下层12例,肌层27例,浆膜层14例;有淋巴结转移者34例,无淋巴结转移者22例;TNM分期Ⅰ期4例,Ⅱ期16例,Ⅲ期24例,Ⅳ期12例)、40例癌旁不典型增生组织和56例正常胃组织中IGFⅠ的表达,并分析IGFⅠ表达与胃腺癌临床病理特征的关系。结果:胃癌组织、癌旁不典型增生组织及正常胃黏膜组织中IGFⅠ的阳性表达率分别为85.71%、55.00%和17.86%,3组间两两比较,差异均有统计学意义(P<0.05);IGFⅠ与胃腺癌的浸润深度、淋巴结转移、病理分期及分化程度有关(P<0.05或0.01)。结论:IGFⅠ在胃腺癌组织中高表达与胃腺癌的发生发展及浸润转移有关。

关键词：胰岛素样生长因子-1 胃肿瘤浸润转移

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乳清酸蛋白启动子克隆及其乳腺特异性表达载体的构建

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郑州大学学报(医学版) 2004年第3期39卷 388-391页

作者：丁一王萍刘书漫朱晓燕张钦宪郑州大学基础医学院组织学与胚胎学教研室河南省分子医学重点实验室郑州大学基础医学院组织学与胚胎学教研室郑州450052

目的 :克隆乳清酸蛋白基因 (WAP)启动子并构建其载体。方法 :以PCR技术克隆WAP启动子 2 .4kbDNA片段和加polyA信号 0 .37kbDNA片段 ;应用体外连接技术 ,连接pBluescript质粒、WAP启动子和加polyA信号DNA片段 ;转化连接产物 ,以内切酶酶... 详细信息

目的 :克隆乳清酸蛋白基因 (WAP)启动子并构建其载体。方法 :以PCR技术克隆WAP启动子 2 .4kbDNA片段和加polyA信号 0 .37kbDNA片段 ;应用体外连接技术 ,连接pBluescript质粒、WAP启动子和加polyA信号DNA片段 ;转化连接产物 ,以内切酶酶切、琼脂糖电泳鉴定阳性克隆 ,对插入片段进行序列分析。结果 :琼脂糖电泳显示 ,WAP启动子和加polyA信号DNA片段克隆成功 ;内切酶酶切鉴定阳性克隆 ,酶切片段与预期长度一致。插入片段序列分析与文献报道一致。结论 :WAP启动子克隆及其乳腺特异性表达载体pWA构建成功

关键词：乳腺生物反应器表达载体乳清酸蛋白启动子

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组织型纤溶酶原激活剂cDNA克隆及其乳腺特异性表达载体的构建

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郑州大学学报（医学版） 2004年第3期39卷 391-393页

作者：丁一刘书漫王萍朱晓燕张钦宪郑州大学基础医学院组织学与胚胎学教研室郑州450052 河南省分子医学重点实验室郑州450052

目的 :克隆组织型纤溶酶原激活剂 (tissue typeplasminogenactivator,tPA)基因及构建其乳腺特异性表达载体。方法 :以PCR技术克隆 2 .1kbtPAcDNA片段 ;应用体外连接技术 ,连接乳腺特异性表达载体pWA和 2 .1kbtPAcDNA片段 ;转化连接产物 ... 详细信息

目的 :克隆组织型纤溶酶原激活剂 (tissue typeplasminogenactivator,tPA)基因及构建其乳腺特异性表达载体。方法 :以PCR技术克隆 2 .1kbtPAcDNA片段 ;应用体外连接技术 ,连接乳腺特异性表达载体pWA和 2 .1kbtPAcDNA片段 ;转化连接产物 ,以内切酶酶切、琼脂糖电泳及插入片段序列分析鉴定阳性克隆。结果 :琼脂糖电泳显示 ,2 .1kbtPAcDNA片段克隆成功 ;内切酶酶切片段与预期片段长度一致 ;插入片段序列与文献报道一致。结论

关键词：组织型纤溶酶原激活剂乳腺生物反应器表达载体

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MCF-7细胞中组织型纤溶酶原激活剂乳腺特异性表达载体的瞬时表达

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郑州大学学报（医学版） 2004年第3期39卷 394-396页

作者：丁一张娓王萍刘书漫张钦宪郑州大学基础医学院组织学与胚胎学教研室郑州450052 河南省分子医学重点实验室郑州450052

目的 :验证所构建的组织型纤溶酶原激活剂 (tPA)乳腺特异性表达载体pWTA在乳癌细胞系MCF 7中的瞬时表达。方法 :用脂质转染胺试剂LipofectamineTM2 0 0 0 将pWTADNA转染入乳癌细胞系MCF 7和食管癌细胞系Eca 1 0 9。应用原位杂交技术 ,... 详细信息

目的 :验证所构建的组织型纤溶酶原激活剂 (tPA)乳腺特异性表达载体pWTA在乳癌细胞系MCF 7中的瞬时表达。方法 :用脂质转染胺试剂LipofectamineTM2 0 0 0 将pWTADNA转染入乳癌细胞系MCF 7和食管癌细胞系Eca 1 0 9。应用原位杂交技术 ,以地高辛标记的tPAcDNA为探针 ,观察PWTA的瞬时表达。结果 :不同浓度LipofectamineTM2 0 0 0MCF 7细胞原位杂交均为阳性 ;Eca 1 0 9细胞及未加转染液者未见阳性信号。结论 :载体pWTA为tPA乳腺特异性表达载体。

关键词：组织型纤溶酶原激活剂瞬时表达乳腺生物反应器表达载体

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小鼠乳腺组织中组织型纤溶酶原激活剂乳腺特异性表达载体的瞬时表达

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郑州大学学报（医学版） 2004年第3期39卷 396-398页

作者：丁一王峰乐晓萍马开颜张钦宪郑州大学基础医学院组织学与胚胎学教研室　　郑州河南省分子医学重点实验室郑州大学基础医学院组织学与胚胎学教研室

目的:验证所构建的组织型纤溶酶原激活剂(tPA)乳腺特异性表达载体pWTA能否在小鼠乳腺组织中瞬时表达.方法:采用直接注射法将pWTA DNA、pWTA DNA/脂质转染胺试剂LipofectamineTM2000复合物及PBS分别注射入妊娠末期小鼠乳腺组织.应用原位... 详细信息

目的:验证所构建的组织型纤溶酶原激活剂(tPA)乳腺特异性表达载体pWTA能否在小鼠乳腺组织中瞬时表达.方法:采用直接注射法将pWTA DNA、pWTA DNA/脂质转染胺试剂LipofectamineTM2000复合物及PBS分别注射入妊娠末期小鼠乳腺组织.应用原位杂交技术,以地高辛标记的tPA cDNA为探针,观察pWTA在小鼠乳腺组织中的瞬时表达.结果:tPA表达阳性细胞散在分布于pWTA DNA及pWTA DNA/LipofectamineTM2000复合物注射小鼠部分乳腺腺泡,PBS注射组无阳性细胞.结论:载体pWTA能够在小鼠乳腺组织中特异性表达tPA.

关键词：组织型纤溶酶原激活剂小鼠乳腺瞬时表达表达载体

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乳腺肿瘤细胞核形态的分形分析

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郑州大学学报（医学版） 2002年第4期37卷 431-433页

作者：张红新赵培荣高冬玲尹玉惠赵阿红郑州大学第一附属医院病理科河南省肿瘤病理学重点实验室郑州450052 郑州大学基础医学院组织学与胚胎学教研室郑州450052

目的 :探索形态定量在肿瘤病理学诊断中的有效指标参数。方法 :将分形分析理论引入乳腺肿瘤的研究中 ,应用自行研制的“分形分析系统” ,选取乳腺癌 6 9例 ,乳腺纤维腺瘤 38例 ,分别观察其细胞核分形维数的变化。结果 :乳腺纤维腺瘤细... 详细信息

目的 :探索形态定量在肿瘤病理学诊断中的有效指标参数。方法 :将分形分析理论引入乳腺肿瘤的研究中 ,应用自行研制的“分形分析系统” ,选取乳腺癌 6 9例 ,乳腺纤维腺瘤 38例 ,分别观察其细胞核分形维数的变化。结果 :乳腺纤维腺瘤细胞分维值为 (1.0 6 73± 0 .0 5 6 2 ) ,乳腺癌细胞核分维值 (1.1831± 0 .0 2 47) ,均大于其拓扑维数 ,即它们都具有分形特征 ,相互间分维值的差异也具有统计学意义 (P <0 .0 1)。结论 :分形维数可以定量地描述细胞核形态的不规则程度 ,分形维数为乳腺肿瘤的鉴别诊断提供了一种定量参考指标。

关键词：乳腺癌细胞核分形形态定量

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