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解剖学报 2008年第5期39卷 738-741页

作者：谢怡许舸刘孝云蔡家春张晓丽杨戎魏莎莉重庆医科大学公共卫生学院生殖生理学教研室重庆400016 重庆医科大学电镜室重庆400016 重庆医科大学公共卫生学院中心实验室重庆400016

目的研究禁止交配对成年雌性大鼠乳腺组织雌二醇(E2)水平、雌激素受体α(ERα)表达的影响。方法12只成年雌性SD大鼠随机分为对照组(交配组)和禁止交配组,实验第61天终止实验后在间情期采集标本,光镜下观察各组大鼠乳腺组织结构,透射电... 详细信息

目的研究禁止交配对成年雌性大鼠乳腺组织雌二醇(E2)水平、雌激素受体α(ERα)表达的影响。方法12只成年雌性SD大鼠随机分为对照组(交配组)和禁止交配组,实验第61天终止实验后在间情期采集标本,光镜下观察各组大鼠乳腺组织结构,透射电镜下观察乳腺组织超微结构;采用放射免疫法检测外周血及乳腺组织E2浓度;采用免疫组织化学染色和Western blotting技术检测乳腺组织ERα的表达变化。结果禁止交配60d后,成年雌性大鼠乳腺组织E2水平下降,与对照组比较P<0.05;同时乳腺组织上皮细胞、基质细胞细胞核ERα表达下调,与对照组比较P<0.05;光镜、电镜下各组大鼠乳腺组织未见明显异常。结论禁止交配可下调雌性大鼠乳腺组织E2水平和ERα的表达。

关键词：交配乳腺雌二醇雌激素受体α 放射免疫法免疫组织化学免疫印迹法大鼠

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早孕小鼠子宫内膜中凋亡蛋白抑制因子Survivin表达及对胚胎着床的作用

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中国组织工程研究与临床康复 2009年第33期13卷 6474-6477页

作者：覃致远魏莎莉孟君王庆跃杜芳重庆医科大学公共卫生学院生殖生理教研室重庆市400016

背景:有研究表明Survivin作为一种凋亡蛋白抑制蛋白,在胚胎植入过程中可能起到抑制子宫内膜凋亡及诱导子宫内膜蜕膜化和促使滋养层细胞入侵的作用,但是目前关于Survivin在胚胎着床方面的报道较少。目的:观察凋亡蛋白抑制因子Survivin在... 详细信息

背景:有研究表明Survivin作为一种凋亡蛋白抑制蛋白,在胚胎植入过程中可能起到抑制子宫内膜凋亡及诱导子宫内膜蜕膜化和促使滋养层细胞入侵的作用,但是目前关于Survivin在胚胎着床方面的报道较少。目的:观察凋亡蛋白抑制因子Survivin在早孕小鼠子宫内膜中的表达及对胚胎着床的作用。设计、时间及地点:随机分组设计,实验于2008-03/06在重庆医科大学医学检验中心完成。材料:6～8周龄清洁级NIH小鼠76只,体质量20～25g;兔抗人Survivin多克隆抗体为美国Santacruz公司产品。方法:①根据阴道涂片结果鉴别雌鼠的动情周期,动情后期雌鼠设为未孕组,记为妊娠第0天。雌雄鼠按2∶1比例自然合笼,次晨7时检查雌鼠阴栓阳性者即为妊娠,定为妊娠第1天,依次计算妊娠天数。②取妊娠4d的小鼠20只随机抽签法分为2组,每组10只。对照组:双侧子宫角均注射5μL正常兔血清IgG;实验组:左侧子宫角注射Survivin1∶80比例抗体5μL,右侧子宫角正常兔血清IgG5μL对照。妊娠第8天剖腹取出子宫,大体观察并统计胚胎着床数。主要观察指标:①免疫组织化学检测Survivin在未孕及妊娠第2,3,4,5,6,7天各组小鼠子宫内膜的表达。②子宫角注入Survivin抗体,统计胚胎着床数。结果:①免疫组织化学检测妊娠组Survivin蛋白的表达明显高于未孕组(P<0.05),且随着妊娠天数的增加,子宫内膜Survivin蛋白的表达逐渐增加,到孕第6天达到高峰,随后下降,但孕第7天仍明显高于未孕组(P<0.05)。②实验组左右侧子宫胚胎着床数分别为1.4000±0.5164和6.4000±1.0750;对照组左右侧子宫胚胎着床数为6.5000±1.0801和6.2000±0.9189;实验组注射抗体的左侧胚胎着床数较右侧明显下降(P<0.05);对照组左右侧子宫胚胎着床数差异无显著性意义(P>0.05)。结论:Survivin在早孕小鼠子宫内膜持续表达,并参与胚胎的着床调控过程。

关键词： Survivin 子宫内膜免疫组织化学小鼠着床

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地塞米松上调禁欲的发情雄性小鼠睾丸间质细胞芳香化酶表达

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生殖与避孕 2007年第6期27卷 369-373页

作者：谢怡蔡家春杨戎魏莎莉刘孝云王应雄重庆医科大学公共卫生学院生殖生理教研室重庆400016 重庆医科大学公共卫生学院中心实验室重庆400016 重庆医科大学公共卫生学院遗传优生教研室重庆400016

目的:探讨地塞米松对禁欲的发情雄性小鼠睾丸组织芳香化酶表达的影响。方法:发情昆明雄性小鼠随机分成3组,每组10只:性表达组(A组)、禁欲组(B组)、地塞米松+禁欲组(C组,皮下给地塞米松16.66mg/kg),采用放射免疫法检测各组血清睾酮(T)、... 详细信息

目的:探讨地塞米松对禁欲的发情雄性小鼠睾丸组织芳香化酶表达的影响。方法:发情昆明雄性小鼠随机分成3组,每组10只:性表达组(A组)、禁欲组(B组)、地塞米松+禁欲组(C组,皮下给地塞米松16.66mg/kg),采用放射免疫法检测各组血清睾酮(T)、雌二醇(E2)水平以及睾丸组织E2含量;采用化学发光法检测血清皮质醇水平;采用原位杂交和免疫组织化学技术检测睾丸组织芳香化酶(P450arom)的表达。结果:C组睾丸间质细胞芳香化酶表达增强(P<0.01),睾丸组织、血清E2水平升高(P<0.01),而血清皮质醇水平降低(P<0.01)。结论:地塞米松可能通过抑制禁欲的发情雄性小鼠肾上腺皮质醇分泌而上调睾丸间质细胞P450arom表达。

关键词：地塞米松睾丸间质细胞芳香化酶(P450arom) 皮质醇雌二醇(E2)

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重庆市企事业单位职工血脂水平及分布特征

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中华心血管病杂志 2012年第5期40卷 432-435页

作者：高雅钟晓妮杨艳红田考聪重庆医科大学公共卫生学院统计教研室 400016

目的了解重庆市企事业单位职工的血脂水平和分布特征。方法2009年1月至10月，采用整群抽样的方法，纳入年龄在18～60岁的重庆市企事业单位职工20000名作为调查对象，对其进行问卷调查、体格检验及血脂检测。将调查对象分为18～29岁组、3... 详细信息

目的了解重庆市企事业单位职工的血脂水平和分布特征。方法2009年1月至10月，采用整群抽样的方法，纳入年龄在18～60岁的重庆市企事业单位职工20000名作为调查对象，对其进行问卷调查、体格检验及血脂检测。将调查对象分为18～29岁组、30～39岁组、40～49岁组和50～60岁组。分析血脂异常情况及分布特征。结果总胆固醇（TC）、甘油三酯（TG）、高密度脂蛋白胆固醇（HDL．C）、低密度脂蛋白胆固醇（LDL—C）水平在不同年龄人群之间的差异均有统计学意义（P均〈0．01）。30岁及以上人群各项血脂指标均显著高于18～29岁组（P均〈0．01）。40—49岁组与50—60岁组的TG水平差异无统计学意义（P〉0．05）。男性的TC、TG、HDL—C、LDL—C水平均高于女性（P均〈0．01）。血脂异常的标化患病率为35．01％，男性的血脂异常患病率显著高于女性（58．27％比11．01％，P〈0．01）。高TC血症、高TG血症、低HDL—C血症和高LDL—C血症的患病率均随着年龄的增加而升高，趋势性检验显示差别均有统计学意义（P均〈0．01）。结论重庆市企事业单位职工血脂异常的患病率较高，男性血脂异常患病率高于女性，30岁及以上职工的各项血脂指标均高于30岁以下职工。

关键词：血脂异常流行病学研究重庆

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血清总胆固醇与高密度脂蛋白胆固醇比值对重庆市中青年人群高血压的预测价值

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上海交通大学学报（医学版） 2012年第1期32卷 96-100页

作者：邱蕾钟晓妮宋文丰田考聪重庆医科大学公共卫生学院卫生统计教研室重庆400016

目的探讨不同血脂指标对重庆市中青年人群高血压的预测价值。方法采集2009年在重庆医科大学附属第一医院体检中心体检的20 000例数据,分析三酰甘油(TG)、血清总胆固醇(TC)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)以及... 详细信息

目的探讨不同血脂指标对重庆市中青年人群高血压的预测价值。方法采集2009年在重庆医科大学附属第一医院体检中心体检的20 000例数据,分析三酰甘油(TG)、血清总胆固醇(TC)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)以及非高密度脂蛋白胆固醇(Non-HDL-C)与血压(收缩压/舒张压,SBP/DBP)的相关性以及各项血脂指标之间的相关性;再选择与血压相关性较强的血脂指标,分析这些指标及其不同组合在预测高血压受试者工作特征曲线(ROC)的曲线下面积中的价值。结果体检结果显示高血压患者3 102例(总患病率为15.51%),其中男性2 294例,女性808例;男性患病率高于女性,差异有统计学意义(20.43%和9.21%,P<0.05)。调整高血压患者的年龄和性别后,TC/HDL-C与血压的相关性最强,其次为LDL-C/HDL-C和Non-HDL-C;TC/HDL-C与LDL-C/HDL-C、Non-HDL-C、HDL-C、TG及LDL-C均呈强相关(r分别为0.926、0.784、-0.753、0.724及0.715),与TC也呈正相关(r=0.642),均P<0.001。TC/HDL-C、LDL-C/HDL-C、Non-HDL-C、TG及其不同组合预测的高血压ROC曲线下面积均>0.5,其中TC/HDL-C预测的ROC曲线下面积最大;对于同一项血脂指标或其组合的预测结果显示,女性高血压患者的ROC曲线下面积均大于男性患者,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论 TC/HDL-C可能是预测高血压的最佳血脂指标,尤其能反映高血脂对重庆市中青年女性高血压的影响。

关键词：高血压血脂指标胆固醇/高密度脂蛋白 ROC曲线

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难免流产蜕膜组织遗传印记基因PEG10的表达

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遗传 2008年第6期30卷 735-740页

作者：梁小妍刘学庆丁裕斌陈雪梅王应雄何俊琳重庆医科大学公共卫生学院生殖生物学研究室遗传优生教研室重庆400016

采用半定量逆转录聚合酶反应(RT-PCR)、原位杂交、免疫印记(Western blot)及免疫组织化学技术检测了36例难免流产患者蜕膜组织PEG10(Paternally expressed gene10)mRNA及蛋白的表达与分布,并以36例同期正常早孕妇女为对照,研究遗传印记... 详细信息

采用半定量逆转录聚合酶反应(RT-PCR)、原位杂交、免疫印记(Western blot)及免疫组织化学技术检测了36例难免流产患者蜕膜组织PEG10(Paternally expressed gene10)mRNA及蛋白的表达与分布,并以36例同期正常早孕妇女为对照,研究遗传印记基因在难免流产蜕膜组织中的表达,探讨其在自然流产中的作用。RT-PCR结果显示,PEG10在两组蜕膜组织中均有表达,正常妊娠组平均表达水平为0.5994±0.049,难免流产组为0.1783±0.037,两组比较具有显著性差异(P<0.05)。原位杂交、免疫组化及Western blot分析也显示PEG10的表达规律与RT-PCR结果相吻合。研究结果表明,遗传印记基因PEG10维持一定水平的表达对早期胚胎发育和正常妊娠的维持有重要意义,而其表达下调可能是导致难免流产的原因之一。

关键词：遗传印记 PEG10 蜕膜难免流产

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PCNA在小鼠胚胎着床过程中的作用

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重庆医科大学学报 2009年第10期34卷 1354-1357页

作者：孟君魏莎莉覃致远张谭杜芳王庆跃重庆医科大学公共卫生学院生殖生理教研室重庆400016

目的:探讨增殖细胞核抗原(Proliferating cell nuclear antigen,PCNA)在小鼠胚胎着床过程中的作用。方法:实时荧光定量聚合酶链反应(Real-time Fluorescence Quantitative PCR,Real-time FQ-PCR)技术检测未孕及孕2、3、4、5、6、7 d(分别记为d0、d2、d3、d4、d5、d6、d7)小鼠子宫内膜PCNA mRNA的表达;子宫角注射PCNA单克隆抗体观察胚泡着床数。结果:FQ-PCR测得随着小鼠妊娠天数的增加,PCNA mRNA表达量也逐渐增高,在孕d4、d5达到峰值,孕d6、d7逐渐下降。子宫角注射PCNA单克隆抗体后胚泡着床数明显减少。结论:PCNA在妊娠早期子宫内膜持续表达,可能参与了胚泡着床。

关键词： PCNA子宫内膜植入 FQ-PCR 子宫角注射

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饮水砷暴露对子代雌性大鼠海马组织神经生长因子、神经生长相关蛋白mRNA表达的影响

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四川大学学报（医学版） 2013年第1期44卷 53-56页

作者：范梅卿张志劬詹平重庆医科大学公共卫生学院劳动与环境卫生教研室重庆400016

目的探讨孕期和哺乳期大鼠亚砷酸钠暴露后,对第一子代雌性大鼠海马神经生长因子(NGF)和神经生长相关蛋白-43(GAP-43)mRNA表达的影响。方法 12只雌鼠于受孕后第6d开始以自由饮水方式分别暴露于0、10、50、100mg/L NaAsO2水溶液,连续染毒... 详细信息

目的探讨孕期和哺乳期大鼠亚砷酸钠暴露后,对第一子代雌性大鼠海马神经生长因子(NGF)和神经生长相关蛋白-43(GAP-43)mRNA表达的影响。方法 12只雌鼠于受孕后第6d开始以自由饮水方式分别暴露于0、10、50、100mg/L NaAsO2水溶液,连续染毒直到仔鼠出生后第21d,取子代雌性大鼠脑海马组织进行HE、尼氏体染色观察海马CA1、CA3、DG区神经元的形态及数目改变;应用RT-PCR检测各组仔鼠海马NGF、GAP-43mRNA的表达。结果 HE结果显示对照组仔鼠CA1、CA3区海马神经元细胞结构正常,各染砷组仔鼠可见海马神经元边缘欠清晰,胞体皱缩,有核固缩等凋亡征象。尼氏体染色:对照组海马神经元胞浆富含尼氏体,随着染毒剂量的增加,尼氏体减少,其中以CA1区损伤最为明显。RT-PCR结果显示,各剂量组仔鼠NGF、GAP-43mRNA表达降低,与对照组相比差异有统计学意义(P<0.01)。各砷暴露组之间NGF、GAP-43mRNA的表达随砷剂量增高而下降(P均<0.05)。结论大鼠孕期和哺乳期砷暴露,可以损伤第一子代雌性大鼠海马神经元细胞,抑制海马区NGF、GAP-43mRNA的表达,从而损害学习记忆能力。

关键词：砷第一子代神经生长因子神经生长相关蛋白-43

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妊娠早期绒毛组织HAI-1的表达

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四川大学学报（医学版） 2006年第4期37卷 602-605页

作者：范才波何俊琳王应雄刘学庆陈雪梅李红梅丁裕斌重庆医科大学公共卫生学院遗传优生学教研室

目的研究肝细胞生长因子激活物抑制因子-1（hepatocyte growth factor activator inhibitor-1，HAI-1）在胚胎着床后绒毛组织中的动态表达，探讨其对胚胎早期发育的调控作用。方法取妊娠第6～10周正常人工流产绒毛组织50例，各孕周各10... 详细信息

目的研究肝细胞生长因子激活物抑制因子-1（hepatocyte growth factor activator inhibitor-1，HAI-1）在胚胎着床后绒毛组织中的动态表达，探讨其对胚胎早期发育的调控作用。方法取妊娠第6～10周正常人工流产绒毛组织50例，各孕周各10例。采用RT-PCR和免疫组织化学法检测绒毛组织HAI-1的表达。结果RT-PCR测得HAI-1 mRNA在各组绒毛组织中均有表达，且其表达量随妊娠周数增加而逐渐上调，在妊娠第6周HAI-1基因表达量极低（0．3142），随后表达量逐渐升高（第7周0．3476、第8周0．3910），至第9周达高峰（0．4876），且高峰持续至第10周（0．4909）。第9、10孕周组间HAI-1 mRNA表达值差异无统计学意义（P≥0．05），其余各孕周组HAI-1 mRNA表达值两两相比差异有统计学意义（P〈0．01），第10周与第9周分别同其余各孕周组间差异有统计学意义（P〈0．01）。免疫组织化学法显示HAI-1蛋白表达随妊娠周数增加呈递增趋势，与RT-PCR结果吻合。结论HAI-1基因可能参与了人胚胎早期发育。

关键词： HAI-1 绒毛 RT-PCR 免疫组织化学

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nm23-M2cDNA的克隆、表达及抗体制备

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生殖与避孕 2006年第2期26卷 67-71,120页

作者：李茂萍何俊琳王应雄翁亚光刘学庆陈雪梅重庆医科大学公共卫生学院遗传优生教研室

目的:通过基因工程技术表达和纯化重组nm23-M2蛋白,进而制备高效价、高特异性的抗血清。方法:构建在大肠杆菌中高效表达pQE30/nm23-M2表达质粒,Ni+-NTA亲和层析纯化;用纯化蛋白免疫兔,制备抗血清并纯化,琼脂双向扩散法测效价,免疫组织... 详细信息

目的:通过基因工程技术表达和纯化重组nm23-M2蛋白,进而制备高效价、高特异性的抗血清。方法:构建在大肠杆菌中高效表达pQE30/nm23-M2表达质粒,Ni+-NTA亲和层析纯化;用纯化蛋白免疫兔,制备抗血清并纯化,琼脂双向扩散法测效价,免疫组织化学法比较它与抗NM23-H2抗体的特异性。结果:nm23-M2cDNA序列完全正确,表达的17kD可溶性融合蛋白占菌体总蛋白45%,纯化后纯度97%以上,抗血清效价为1∶64-128,提纯后纯度在90%以上,特异性高于抗NM23-H2抗体。结论:成功构建了pQE30/nm23-M2质粒,获得高纯度重组nm23-M2蛋白(rNM23-M2),并制备了高效价、高度特异性的抗血清,为进一步研究nm23-M2基因功能和蛋白作用奠定了基础。

关键词： rim23-M2 克隆表达抗体

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