检索结果-内蒙古大学图书馆

重庆医科大学学报 2018年第5期43卷 624-628页

作者：向进庹琳高庆祝杨翼梁利夏杰唐霓汪凯重庆医科大学感染性疾病分子生物学教育部重点实验室重庆400016 重庆医科大学基础医学院病原生物学教研室重庆400016

目的:构建编码磷酸烯醇丙酮酸羧化激酶(phosphoenolpyruvate carboxykinase,PEPCK)的基因PCK1重组腺病毒和基因敲除2种细胞模型,并初步观察PCK1过表达和敲除后对肝癌细胞迁移能力的影响。方法:PCK1 c DNA克隆到p AdTrackTO4载体,构建重... 详细信息

目的:构建编码磷酸烯醇丙酮酸羧化激酶(phosphoenolpyruvate carboxykinase,PEPCK)的基因PCK1重组腺病毒和基因敲除2种细胞模型,并初步观察PCK1过表达和敲除后对肝癌细胞迁移能力的影响。方法:PCK1 c DNA克隆到p AdTrackTO4载体,构建重组腺病毒质粒,在HEK293细胞中包装、扩增成高滴度重组腺病毒AdPCK1;利用CRISPR/Cas9系统在PLC/PRF/5肝癌细胞系中筛选出PCK1基因敲除的稳定细胞株。首先,在过表达模型将Huh7细胞设为2组:AdGFP组和AdPCK1组,AdGFP组为感染腺病毒AdGFP的对照组,AdPCK1组为感染腺病毒AdPCK1的实验组。在敲除模型设Parental组和KO组,Parental组是PLC/PRF/5细胞作为对照组,KO组是PCK1基因敲除稳定细胞株作为实验组。Western blot技术检测2种模型蛋白表达量,采用划痕实验观察细胞迁移能力,进一步经q RT-PCR检测影响肝癌细胞的迁移关键分子。结果:重组腺病毒AdPCK1构建成功,经Western blot鉴定PCK1在Huh7细胞中的表达。向导RNA(single guide RNA,sg RNA)寡核苷酸双链成功插入酶切后的Lenti CRISPR-V2质粒载体中且测序正确;经Western blot鉴定PCK1敲除的细胞株筛选成功。划痕结果显示,PCK1过表达模型在48 h的细胞迁移率为(66.300±0.383)%,与AdGFP组[(42.900±3.833)%]相比明显增加(t=10.540,P=0.000);PCK1敲除KO组在48 h的细胞迁移率为(59.40±5.68)%,与亲本细胞组[(79.00±5.20)%]相比明显减少(t=4.420,P=0.012)。q RT-PCR结果显示,PCK1过表达后,相较于对照组AdGFP,Cdh1相对表达量为2.733±0.501(t=5.989,P=0.004),相对表达增高;PCK1敲除后,相较于亲本细胞组,Cdh1相对表达量为0.664±0.017(t=34.290,P=0.000),相对表达减少。结论:PCK1过表达后可明显抑制肝癌细胞的迁移能力,而敲除后促进其迁移,证实PCK1可能作为抑癌基因参与肝癌的发生和发展。

关键词： PCK1 重组腺病毒 CRISPR/Cas9 肝癌迁移

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TGM1基因过表达可抑制乳腺癌细胞的上皮-间质转化

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肿瘤 2018年第7期38卷 670-679页

作者：宋喻姚尧夏雷肖潇刘务玲杨珏刘唐婧君宋晶睿宋佳蕾王宁刘杰麟 YAACOV Ben-David 贵州医科大学基础医学院免疫教研室贵州贵阳550025 贵州省中国科学院天然产物化学重点实验室贵州贵阳550014 贵州医科大学省部共建药用植物功效与利用国家重点实验室贵州贵阳550025 贵州医科大学基础医学院药理学教研室贵州贵阳550025 重庆大学生物工程学院重庆400044

目的 :探究转谷氨酰胺酶1(transglutaminase 1,TGM1)基因过表达对乳腺癌细胞上皮-间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)的影响。方法 :采用实时荧光定量PCR法检测鼠源性乳腺癌FE1.2和FE1.3细胞中TGM1 m RNA的表达水平。采... 详细信息

目的 :探究转谷氨酰胺酶1(transglutaminase 1,TGM1)基因过表达对乳腺癌细胞上皮-间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)的影响。方法 :采用实时荧光定量PCR法检测鼠源性乳腺癌FE1.2和FE1.3细胞中TGM1 m RNA的表达水平。采用脂质体法将携带有TGM1基因全长序列的重组载体质粒p CMV3-TGM1-GFPspark转染至FE1.2细胞中,构建TGM1基因过表达的FE1.2细胞株(FE1.2-TGM1)。光学显微镜下观察FE1.2细胞形态的变化,FCM法测量细胞粒径的大小;MTT法检测TGM1基因过表达对鼠乳腺癌细胞增殖能力的影响;实时荧光定量PCR法和蛋白质印迹法分别检测EMT相关分子标志物上皮型钙黏蛋白(E-cadherin)、波形蛋白(vimentin)、β-链蛋白(β-catenin)以及细胞周期调节蛋白D1(cyclin D1)m RNA和蛋白的表达水平。最后,采用细胞划痕愈合实验检测TGM1过表达对细胞迁移能力的影响。结果 :FE1.3细胞中TGM1 m RNA的表达水平明显高于FE1.2细胞(P<0.001)。将重组载体p CMV3-TGM1-GFPspark转入FE1.2细胞后,FE1.2细胞中TGM1 m RNA和蛋白的表达水平明显上调(P<0.001和P<0.01),细胞形态发生明显改变,细胞的粒径增大(P<0.01),而FE1.2细胞的增殖能力明显降低(P<0.001)。TGM1基因过表达的E1.2细胞中E-cadherin m RNA的表达水平明显上调(P<0.01),vimentin m RNA及蛋白的表达水平均明显下调(P值均<0.001),cyclin D1 m RNA的表达水平明显上调(P<0.05),而cyclin D1蛋白表达水平无明显变化(P>0.05),β-catenin m RNA的表达水平无明显变化(P>0.05),β-catenin蛋白的表达水平明显下调(P<0.01);TGM1过表达后FE1.2细胞的迁移能力明显减弱(P<0.05)。结论 :TGM1基因过表达能抑制乳腺癌细胞的EMT。

关键词：乳腺肿瘤基因,肿瘤抑制转谷氨酰胺酶1 上皮-间质转化

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重庆市耐多药肺结核可疑患者药敏结果分析

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重庆医科大学学报 2018年第7期43卷 923-926页

作者：胡彦杨春卢楠刘洁刘英余锋平沈静朱大冕冯鑫王晓英重庆市结核病防治所结核病参比实验室重庆400050 重庆医科大学基础医学院病原生物学教研室重庆400016

目的:通过分析重庆市耐多药肺结核(multidrug-resistant tuberculosis,MDR-TB)可疑患者药敏结果,为重庆市耐多药结核病的发现及控制提供参考和依据。方法:2014年7月至2016年2月重庆市39个区县573例MDR-TB可疑患者痰培养阳性分离株,采用... 详细信息

目的:通过分析重庆市耐多药肺结核(multidrug-resistant tuberculosis,MDR-TB)可疑患者药敏结果,为重庆市耐多药结核病的发现及控制提供参考和依据。方法:2014年7月至2016年2月重庆市39个区县573例MDR-TB可疑患者痰培养阳性分离株,采用比例法进行4种一线抗结核药物和6种二线抗结核药物的药敏试验,对药敏结果进行统计分析。结果:573例MDR-TB可疑患者的MDR-TB检出率为25.0%,明显高于单耐药结核病(single drug-resistant tuberculosis,SDR-TB)检出率(9.6%)及多耐药结核病(poly drug-resistant tuberculosis,PDR-TB)检出率(8.0%)(P<0.001)。高危人群MDR-TB检出率为26.6%(130/488),明显高于新患者的15.3%(13/85)(P=0.026)。高危人群中,复治失败患者MDR-TB检出率最高,为42.1%(16/38),其次为初治失败患者,为40.0%(18/45)。结论:重庆市耐多药肺结核可疑患者MDR-TB检出率高,耐多药肺结核防控形势严峻。高危人群尤其是复治失败和初治失败患者应该作为耐多药肺结核筛查的重点人群。

关键词：结核分枝杆菌耐多药高危人群药敏试验重庆市

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Dax1剪接体在小鼠胚胎干细胞多能性维持中的作用研究

Dax1剪接体在小鼠胚胎干细胞多能性维持中的作用研究

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中国解剖学会2019年年会

作者：刘高科何建荣阮艳张俊磊王嘉丽田衍平黄河肖岚蹇锐陆军军医大学基础医学院组织学与胚胎学教研室重庆医科大学附属第二医院麻醉科

可变剪接体是真核细胞调节基因表达和产生蛋白质组多样性的重要方式。孤核受体Dax1是维持小鼠胚胎干细胞(mESC)自我更新和多能性稳态的关键转录抑制因子。但是,mESC中Dax1的剪接体的表达形式和功能均不清楚。我们利用cDNA末端快速扩增法... 详细信息

可变剪接体是真核细胞调节基因表达和产生蛋白质组多样性的重要方式。孤核受体Dax1是维持小鼠胚胎干细胞(mESC)自我更新和多能性稳态的关键转录抑制因子。但是,mESC中Dax1的剪接体的表达形式和功能均不清楚。我们利用cDNA末端快速扩增法,以mESC及其分化细胞中的cDNA为模板,对Dax1剪接体的表达谱进行分析,发现Dax1在mESC中存在至少6个可以正常编

关键词：多能性小鼠胚胎干细胞剪接体作用研究

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形态选择性卵细胞胞质内单精子注射对比卵细胞胞质内单精子注射治疗男性因素不育症的Meta分析

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中华男科学杂志 2018年第3期24卷 254-262页

作者：何帆王美姣李桑琳张觇宇胡丽娜重庆医科大学附属第二医院妇产科生殖医学中心重庆400010 重庆医科大学附属第二医院妇产科重点实验室重庆400016 四川大学华西基础医学与法医学院生理学教研室四川成都610041

目的:评价形态选择性卵细胞胞质内单精子注射(IMSI)对比卵细胞胞质内单精子注射(ICSI)治疗男性因素不育症的效果和安全性。方法:采用Cochrane系统评价方法,检索MEDLINE、EMBASE、CENTRAL、Clinical ***和Sino Med数据库,检索时限为1992... 详细信息

目的:评价形态选择性卵细胞胞质内单精子注射(IMSI)对比卵细胞胞质内单精子注射(ICSI)治疗男性因素不育症的效果和安全性。方法:采用Cochrane系统评价方法,检索MEDLINE、EMBASE、CENTRAL、Clinical ***和Sino Med数据库,检索时限为1992年至2017年7月,并手工检索相关参考文献,纳入比较IMSI和ICSI的随机对照试验(RCT)。应用Rev Man 5.3软件进行Meta分析。由于单纯男性因素和合并男性因素的不育症患者具有明显的临床异质性,故行亚组分析。结果:检索到文献280篇,纳入8个RCT,合计1 741个周期(IMSI=842,ICSI=899)。在单纯男性因素亚组,无证据证明IMSI周期和ICSI周期的活产率具有差异[RR=1.31,95%CI(0.68,2.51),1个RCT,77个周期,极低质量证据];IMSI能提高临床妊娠率[RR=1.46,95%CI(1.02,2.07),4个RCT,813个周期,低质量证据]。在合并男性因素亚组,均无证据证明IMSI周期和ICSI周期的活产率[RR=0.88,95%CI(0.60,1.31),1个RCT,255个周期,低质量证据]和临床妊娠率[RR=1.03,95%CI(0.86,1.23),3个RCT,851个周期,中等质量证据]具有差异。结论:尽管IMSI能提高单纯男性因素不育症患者体外受精周期的临床妊娠率,但证据质量等级较低,尚不足以支持将IMSI常规应用于该类患者。

关键词：形态选择性卵细胞胞质内单精子注射卵细胞胞质内单精子注射男性因素不育症 Meta分析

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流程讨论式教学在病原生物学实验中的应用

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基础医学教育 2018年第6期20卷 458-460页

作者：陆合涂增张静邹晓毅郭亚楠武卫华重庆医科大学基础医学院病原生物教研室重庆400010

病原生物学是连接基础医学和临床医学的重要桥梁,实验教学更是体现其桥梁作用的重要手段。实验教学围绕尽快培养学生临床思维能力为中心,通过改革实验教学方法,引入流程讨论式教学,使学生从被动教育转变为主动学习、主动思维,培养了学... 详细信息

病原生物学是连接基础医学和临床医学的重要桥梁,实验教学更是体现其桥梁作用的重要手段。实验教学围绕尽快培养学生临床思维能力为中心,通过改革实验教学方法,引入流程讨论式教学,使学生从被动教育转变为主动学习、主动思维,培养了学生的自我学习能力、临床思维能力,为学生尽快适应临床工作奠定了坚实基础。

关键词：病原生物学实验教学流程讨论式教学

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关于氨基酸分离的创新层析实验的探究

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教育教学论坛 2019年第1期 274-278页

作者：朱彩瑜赵雨彤刘先俊朱勇汪长东重庆医科大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室分子医学与肿瘤研究中心重庆400016 美国加州大学欧文分校医学院微生物与分子遗传实验室美国加利福尼亚92697

通过对创新层析实验的结果分析,对实验中出现的异常现象的讨论,给出了对该创新层析实验合理性的评价以及提高实验可行性的相关建议,可为其他物质的分离提供参考。

关键词：氨基酸层析异常现象

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天麻素对脊髓损伤模型大鼠神经功能恢复和胶质纤维酸性蛋白表达的影响

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中国组织工程研究 2018年第4期22卷 558-563页

作者：肖雪飞李娟娟黄辉张翔黄鹞李经辉余化霖昆明医科大学第一附属医院神经外二科云南省昆明市650032 重庆医科大学第一附属医院璧山医院重庆市402760 昆明医科大学基础医学院组胚教研室云南省昆明市650500

背景:研究表明,天麻素在体外可以抑制无血清损伤后星形胶质细胞活化,改善脊髓损伤微环境,减轻继发损伤。目的:观察天麻素对钳夹型大鼠脊髓损伤模型神经功能恢复、胶质纤维酸性蛋白的影响。方法:48只成年SD大鼠随机分为3组,脊髓损伤组建... 详细信息

背景:研究表明,天麻素在体外可以抑制无血清损伤后星形胶质细胞活化,改善脊髓损伤微环境,减轻继发损伤。目的:观察天麻素对钳夹型大鼠脊髓损伤模型神经功能恢复、胶质纤维酸性蛋白的影响。方法:48只成年SD大鼠随机分为3组,脊髓损伤组建立钳夹型大鼠脊髓损伤模型;假手术组仅切除椎板;天麻素组造模后给予天麻素100 mg/(kg·d)治疗;假手术组和脊髓损伤组给予等量生理盐水。术后分别于1,3,7,14,21,28 d采用BBB运动功能评分和Rivlin斜板实验评估脊髓功能恢复情况,术后28 d进行灌注、取材,观察损伤节段脊髓形态变化、免疫荧光观察胶质纤维酸性蛋白表达变化、尼氏染色观察尼氏小体变化情况。结果与结论:(1)造模后各组大鼠BBB评分和Rivlin斜板实验评分均下降,随着时间推移各组评分逐渐升高,假手术组评分于各时相点均高于其余各组(P<0.05),天麻素组在术后3 d及其后各时相点评分均明显均高于脊髓损伤组(P<0.05);(2)术后28 d,天麻素组和脊髓损伤组胶质纤维酸性蛋白表达较假手术组均明显增加(P<0.05),天麻素组胶质纤维酸性蛋白表达较脊髓损伤组明显降低(P<0.05);(3)天麻素组和脊髓损伤组Nissl小体计数均较假手术组少(P<0.05),染色较浅,部分Nissl小体溶解,天麻素组Nissl小体计数较脊髓损伤组明显增多(P<0.05);(4)假手术组脊髓组织结构完整,脊髓损伤组脊髓结构形态紊乱,脊髓空洞形成,灰白质界限不清,天麻素组脊髓空洞较小,灰白质界限尚清晰;(5)结果表明,天麻素可以在脊髓损伤后抑制星形胶质细胞活化增生和保护神经元,改善肢体运动功能。

关键词：天麻素神经损伤与修复动物模型钳夹型脊髓损伤运动功能星形胶质细胞神经元尼氏小体运动功能组织构建

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microRNA-221及白细胞介素-17在甲状腺乳头状癌中的表达及相关性

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中华病理学杂志 2017年第3期46卷 160-165页

作者：姜兴莲张徽陈晏林彭莉重庆医科大学基础医学院病理学教研室 400016

目的检测microRNA-221（miR-221）及白细胞介素（IL）-17在甲状腺乳头状癌中的表达并分析其相关性,探讨其在甲状腺乳头状癌发生发展中的作用及相关机制.方法用real-time逆转录聚合酶链反应（real-time RT-PCR）、Western blot及免疫... 详细信息

目的检测microRNA-221（miR-221）及白细胞介素（IL）-17在甲状腺乳头状癌中的表达并分析其相关性,探讨其在甲状腺乳头状癌发生发展中的作用及相关机制.方法用real-time逆转录聚合酶链反应（real-time RT-PCR）、Western blot及免疫组织化学EnVision法检测40例甲状腺乳头状癌、20例结节性甲状腺肿和20例癌旁正常甲状腺组织中miR-221及IL-17的表达并分析其相关性.结果（1）miR-221在甲状腺乳头状癌组织中的表达明显高于结节性甲状腺肿和癌旁正常甲状腺组织,并且与肿瘤TNM分期、包膜侵犯及淋巴结转移相关（P〈0.05）,而与患者年龄、性别、肿瘤大小及个数、腺内播散和脉管侵犯无关,而结节性甲状腺肿和癌旁正常甲状腺组织比较,差异无统计学意义（P〉0.05）;（2）real-time RT-PCR及Western blot结果显示甲状腺乳头状癌组织中IL-17 mRNA及IL-17蛋白的表达量也明显高于结节性甲状腺肿和癌旁正常甲状腺组织（P〈0.05）,而结节性甲状腺肿和癌旁正常甲状腺组织比较,差异无统计学意义（P〉0.05）;免疫组织化学染色结果显示IL-17在甲状腺乳头状癌组织中阳性表达,而在结节性甲状腺肿及癌旁正常甲状腺组织中为阴性,并且IL-17的表达与患者的年龄、性别、肿瘤大小及个数、腺内播散和脉管侵犯无关,而与肿瘤TNM分期、包膜侵犯及淋巴结转移相关;（3）在甲状腺乳头状癌中microRNA-221与IL-17的表达呈显著正相关（r=0.524,P=0.001）.结论 miR-221可能通过影响多种细胞因子和炎性细胞调控IL-17的表达,参与甲状腺乳头状癌的发生、发展及侵袭等过程,不仅可以作为判断甲状腺乳头状癌预后的新指标,而且可作为一种潜在的分子靶点,为甲状腺乳头状癌的治疗提供一种新的思路,从而改善患者的预后.

关键词：甲状腺肿瘤微RNAs 白细胞介素17

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搭建工作室平台,助力青年教师教学能力提升

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基础医学教育 2018年第6期20卷 512-514页

作者：贾雪梅许功林谢芬芬李菲菲吕正梅王盛花黄大可桂丽安徽医科大学基础医学院组织学与胚胎学教研室合肥230032 安徽医科大学基础医学院生化教研室安徽医科大学基础医学院病生教研室

基于目前高校青年教师教学能力薄弱的现状,通过名师工作室平台,开展了示范教学、说课评课、听课反思、教学讲座、教改活动、参加比赛及学术交流等一系列教学学术活动。探讨并实践青年教师教学能力培养的渠道,以期为提升青年教师教学能... 详细信息

基于目前高校青年教师教学能力薄弱的现状,通过名师工作室平台,开展了示范教学、说课评课、听课反思、教学讲座、教改活动、参加比赛及学术交流等一系列教学学术活动。探讨并实践青年教师教学能力培养的渠道,以期为提升青年教师教学能力助力,为提高教学质量提供支撑和保障。

关键词：青年教师教学能力名师工作室

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