检索结果-内蒙古大学图书馆

基于Ghrelin水平调控探讨玉液汤改善过氧化氢诱导SHSY-5Y细胞氧化应激损伤机制研究

中南药学 2025年第4期23卷 935-940页

作者：朱宏喆张瑞华张雨涵王欣史磊磊安宇宇肖杨孙怡萱刘继平陕西中医药大学陕西咸阳712046 陕西省中医药管理局中药药效机制与物质基础重点研究室陕西咸阳712046 中医药脑健康产业陕西省高校工程研究中心陕西咸阳712046 陕西省食品药品安全监测重点实验室陕西咸阳712046

目的基于Ghrelin水平调控探讨玉液汤改善过氧化氢诱导人神经母细胞瘤细胞SHSY-5Y氧化应激损伤机制研究。方法采用分化型SHSY-5Y细胞,用过氧化氢诱导构建氧化应激损伤细胞模型。实验分6组:空白组、模型组、玉液汤低剂量组(YYT-L,4.575 g&... 详细信息

目的基于Ghrelin水平调控探讨玉液汤改善过氧化氢诱导人神经母细胞瘤细胞SHSY-5Y氧化应激损伤机制研究。方法采用分化型SHSY-5Y细胞,用过氧化氢诱导构建氧化应激损伤细胞模型。实验分6组:空白组、模型组、玉液汤低剂量组(YYT-L,4.575 g·kg^(-1))、玉液汤中剂量组(YYT-M,9.15 g·kg^(-1))、玉液汤高剂量组(YYT-H,18.3 g·kg^(-1))和[D-Lys3]-GHRP-6(DLS)抑制剂组。通过CCK-8法检测细胞活力;免疫荧光法检测细胞线粒体膜电位(MMP);流式细胞技术检测细胞活性氧(ROS)含量;Westernblot法检测细胞中相关蛋白表达,进行线粒体功能综合评价。结果CCK-8结果显示玉液汤各剂量组能显著增加细胞活力(P<0.01),DLS抑制剂组明显降低细胞活力(P<0.01);免疫荧光和流式细胞检测结果显示模型组细胞MMP显著降低(P<0.01),ROS显著增加(P<0.01),玉液汤含药血清处理恢复了MMP(P<0.01),降低了ROS(P<0.01);Western blot结果表明玉液汤各剂量组能不同程度上调细胞GHS-R1α/p-AMPK/PGC-1α/UCP2的蛋白表达,而DLS抑制剂显著抑制这些蛋白表达(P<0.01);结论玉液汤能提高SHSY-5Y细胞活力,减轻过氧化氢诱导的氧化应激损伤,可能与Ghrelin和GHS-R1α相互作用,激活了UCP2蛋白表达,减少细胞中ROS含量、增加MMP进而改善线粒体功能有关。

关键词：玉液汤 Ghrelin 氧化应激线粒体功能

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槲皮素对黄药子致肝损伤小鼠的保护作用及其机制

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中草药 2024年第10期55卷 3345-3353页

作者：王欣张雨涵史磊磊上官惠子宋佳莲安宇宇谢允东刘继平陕西中医药大学陕西咸阳712046 陕西省食品药品安全监测重点实验室陕西咸阳712046 陕西省中医药管理局中药药效机制与物质基础重点研究室陕西咸阳712046

目的探究槲皮素对黄药子致肝损伤的保护作用及其机制。方法将48只昆明小鼠随机分为对照组、模型组、水飞蓟宾(100 mg/kg)组和槲皮素高、中、低剂量(80、50、20 mg/kg)组。对照组ig 0.5%羧甲基纤维素钠溶液,其余各组小鼠ig相应药物及黄... 详细信息

目的探究槲皮素对黄药子致肝损伤的保护作用及其机制。方法将48只昆明小鼠随机分为对照组、模型组、水飞蓟宾(100 mg/kg)组和槲皮素高、中、低剂量(80、50、20 mg/kg)组。对照组ig 0.5%羧甲基纤维素钠溶液,其余各组小鼠ig相应药物及黄药子醇提物(2 g/kg),1次/d,连续30 d。实验结束后称定小鼠体质量和肝脏质量,计算肝脏指数;测定血浆中天冬氨酸氨基转移酶(aspartate aminotransferase,AST)、丙氨酸氨基转移酶(alanine aminotransferase,ALT)、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)活性及丙二醛(malonaldehyde,MDA)、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、白细胞介素-10(interleukin-10,IL-10)、IL-1β水平;苏木素-伊红(hematoxylin-eosin staining,HE)染色观察肝脏组织病理学变化;TUNEL染色法检测肝脏细胞凋亡情况;采用Western blotting检测肝脏核因子E2相关因子2(nuclear factor erythroid 2-related factor 2,Nrf2)、磷酸化核因子-κB p65(phosphorylated nuclear factor-κB p65,p-NF-κB p65)、血红素加氧酶-1(heme oxygenase-1,HO-1)、B淋巴细胞瘤-2(B-cell lymphoma-2,Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bcl-2 associated X protein,Bax)、多药耐药相关蛋白2(multidrug resistance-associated protein 2,MRP2)、尿苷二磷酸葡萄糖醛酸基转移酶1A1(uridine diphosphate-glucuronosyltransferase 1A1,Ugt1a1)、P-糖蛋白(P-glycoprotein,P-gp)表达;采用qRT-PCR检测肝脏MRP2、P-gp、Ugt1a1的mRNA表达。结果与模型组比较,槲皮素显著降低小鼠肝脏指数及肝功能(P<0.05、0.01),减轻肝脏组织病理变化,降低血浆中MDA水平(P<0.05、0.01),升高SOD活性(P<0.01),降低TNF-α、IL-1β水平(P<0.05、0.01),升高IL-10水平(P<0.01),抑制肝脏p-NF-κB p65、Bax蛋白表达(P<0.05、0.01),促进Nrf2、HO-1及药物转运体蛋白表达(P<0.05、0.01),并上调MRP2、P-gp、Ugt1a1的mRNA表达(P<0.01)。结论槲皮素对黄药子诱导的肝损伤有一定保护作用,其作用机制可能与减轻炎症、抑制细胞凋亡、调控Nrf2及药物转运体的表达相关。

关键词：槲皮素黄药子肝损伤炎症凋亡核因子E2相关因子2 药物转运体

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基于网络药理学和分子对接方法的寒湿阻肺方治疗新型冠状病毒肺炎(COVID-19)的作用机制及活性成分研究

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中药药理与临床 2020年第5期36卷 38-44页

作者：张盼王川邹俊波刘继平王斌王征张珍陕西中医药大学药理教研室/陕西省中医药管理局中药药效机制与物质基础重点研究室/陕西省中药基础与新药研究重点实验室咸阳712046 陕西省中药资源产业化协同创新中心咸阳712046

目的:基于网络药理学和分子对接方法研究寒湿阻肺方治疗新型冠状肺炎(COVID-19)的活性成分及作用机制。方法:通过TCMSP数据库检索寒湿阻肺方中中药的化学成分和各成分作用靶点,使用GeneCards数据库对疾病靶点进行检索,使用Cytoscape构... 详细信息

目的:基于网络药理学和分子对接方法研究寒湿阻肺方治疗新型冠状肺炎(COVID-19)的活性成分及作用机制。方法:通过TCMSP数据库检索寒湿阻肺方中中药的化学成分和各成分作用靶点,使用GeneCards数据库对疾病靶点进行检索,使用Cytoscape构建药物-活性成分-交集靶点网络图,通过Metascape对药物和疾病的交集基因进行GO富集以及KEGG通路富集分析。使用Autodock Vina软件进行分子对接,选择最佳的结合靶点。结果:通过筛选,得到寒湿阻肺方共有31个活性成分以及266个相对应靶点,COVID-19疾病相关的基因272个,其中50个与药物密切相关。其中潜在活性成分为槲皮素、β-谷甾醇、汉黄芩素、葛花苷元、山柰酚,关键蛋白是IL-6、TNF、MAPK3、CASP3、TP53、MAPK8、MAPK1、IL-1β、PTGS2等。KEGG通路显示寒湿阻肺方主要用于抗炎、抗病毒、抗肿瘤、抗凋亡途径;分子对接结果显示寒湿阻肺方中的主要成分与COVID-19的ACE2和SARS-CoV-23CL水解酶有较好的亲和作用。结论:寒湿阻肺方可能主要通过抗炎,抗病毒等作用对COVID-19发挥潜在的防治作用。

关键词：寒湿阻肺方网络药理学分子对接新型冠状病毒肺炎

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基于网络药理学和体外实验探讨丹参-川芎药对治疗动脉粥样硬化的作用机制

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中药药理与临床 2022年第4期38卷 67-73页

作者：王钰莹王川胡锐刘继平王斌卫昊张珍陕西中医药大学药理教研室/陕西省中医药管理局中药药效机制与物质基础重点研究室/陕西省中药基础与新药研究重点实验室咸阳712046 陕西省中药资源产业化协同创新中心咸阳712083

目的:基于网络药理学和体外实验探讨丹参-川芎治疗动脉粥样硬化的主要化学成分及其作用机制。方法:TCMSP数据库筛选并收集丹参-川芎的化学成分及其对应靶标,使用Cytoscape 3.7.2软件绘制药物-活性成分-交集靶点网络图,利用Metascape数... 详细信息

目的:基于网络药理学和体外实验探讨丹参-川芎治疗动脉粥样硬化的主要化学成分及其作用机制。方法:TCMSP数据库筛选并收集丹参-川芎的化学成分及其对应靶标,使用Cytoscape 3.7.2软件绘制药物-活性成分-交集靶点网络图,利用Metascape数据库对丹参-川芎治疗动脉粥样硬化的潜在作用靶标进行GO分类富集分析和KEGG通路富集分析。使用UCSF CHIMERA软件进行分子对接,选择最佳的结合靶点。通过细胞实验验证丹参-川芎药对的抗动脉粥样硬化作用。结果:从丹参-川芎中共得到72个候选活性成分,包括木犀草素、丹参酮IIA、二氢丹参内酯、杨梅酮、丹参新醌等,与动脉粥样硬化相关的潜在作用靶标67个,包括AKT1、IL6、VEGFA、MAPK1、TP53等,主要的信号通路有癌症通路、PI3K-AKT信号通路、流体剪切应力与动脉粥样硬化通路、JAK-STAT信号通路、炎症性肠病、NF-κB信号通路、脂肪细胞脂解的调节等信号通路。细胞实验结果表明,丹参-川芎药对可减少巨噬细胞的泡沫化,降低AKT1、ERK1/2蛋白的磷酸化水平,抑制VEGFA的蛋白表达发挥抗动脉粥样硬化作用。结论:丹参-川芎治疗动脉粥样硬化具有多靶点、多通路的特点,其机制可能与调控AKT1、ERK1/2、VEGFA的蛋白表达有关。

关键词：丹参川芎药对动脉粥样硬化蛋白激酶血管内皮生长因子A 细胞外调节蛋白激酶

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阿司匹林抗人乳腺癌增殖的直接作用蛋白靶点的生物信息学分析

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南方医科大学学报 2019年第10期39卷 1141-1148页

作者：朱星枚杨嘉妮张恩户乔炜李学军陕西中医药大学药学院药理学教研室陕西省中医药管理局中药药效机制与物质基础重点研究室陕西省中药基础与新药研究重点实验室陕西咸阳712046 中国兵器工业五二一医院陕西西安710065 北京大学医学部药理学系北京100191

目的基于生物信息学分析大量公共数据库,探讨阿司匹林抑制人乳腺癌细胞增殖的分子机制。方法利用Drug Bank 5.1.3搜索确定阿司匹林的直接靶点蛋白(DPTs),STRING在线构建阿司匹林DPTs的蛋白-蛋白相互作用(PPI)网络和信号通路;使用cBio Po... 详细信息

目的基于生物信息学分析大量公共数据库,探讨阿司匹林抑制人乳腺癌细胞增殖的分子机制。方法利用Drug Bank 5.1.3搜索确定阿司匹林的直接靶点蛋白(DPTs),STRING在线构建阿司匹林DPTs的蛋白-蛋白相互作用(PPI)网络和信号通路;使用cBio Portal研究人乳腺癌中DPTs基因突变,并利用OncoPrint可视化;从TCGA数据库下载乳腺癌与正常组织中的转录组数据,利用DECenter分析差异过表达基因,对STRING分析得到的DPTs相互关联基因与TCGA中的差异过表达基因求交集,确认阿司匹林抑制人乳腺癌细胞增殖的潜在靶点,并利用Gene Ontology进行GO功能富集分析。最终通过蛋白免疫印迹实验验证阿司匹林抑制人乳腺癌细胞增殖的潜在靶点。结果搜索Drug Bank 5.1.3确定了11个阿司匹林DPTs,KEGG通路富集表明其中6个DPTs(EDNRA,IKBKB,NFKB2,NFKBIA,PTGS2和TP53)与癌症发生发展有关。通过分析TCGA数据库中乳腺癌与正常组织中的转录组数据获得10220个过表达差异基因,与STRING分析得到的6个阿司匹林DPTs的相互关联基因求交集,发现4个基因(CDC25C,TPX2,CDC20,PLK1)可能是阿司匹林抑制人乳腺癌细胞增殖的潜在靶点,其基因功能主要富集于细胞周期与细胞分裂。蛋白免疫印迹实验结果显示:阿司匹林可以降低人乳腺癌细胞中CDC25C,TPX2,CDC20,PLK1的蛋白表达。结论CDC25C,TPX2,CDC20和PLK1可能是阿司匹林抑制人乳腺癌细胞增殖的潜在靶点,其可能通过影响细胞周期和细胞分裂发挥抗肿瘤增殖作用。

关键词：阿司匹林人乳腺癌生物信息学细胞周期细胞分裂

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酶辅助超声法提取陕产黄精总黄酮及其抗氧化、抗A549细胞增殖活性研究

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天然产物研究与开发 2022年第4期34卷 630-638页

作者：郭凯丽刘继平赵重博史永恒王斌权利娜过晓芳朱星枚陕西中医药大学药学院陕西省中医药管理局中药药效机制与物质基础重点研究室陕西省中药基础与新药研究重点实验室咸阳712046 西安工业大学数理系西安710032

优化陕产黄精总黄酮提取工艺,体外考查黄精总黄酮的抗氧化、抗A549细胞增殖活性。以黄精总黄酮含量为指标,在单因素试验基础上,应用Box-Behnken响应面法优化陕产黄精总黄酮提取工艺,黄精总黄酮最优提取工艺:2%纤维素酶,90%乙醇,超声20 m... 详细信息

优化陕产黄精总黄酮提取工艺,体外考查黄精总黄酮的抗氧化、抗A549细胞增殖活性。以黄精总黄酮含量为指标,在单因素试验基础上,应用Box-Behnken响应面法优化陕产黄精总黄酮提取工艺,黄精总黄酮最优提取工艺:2%纤维素酶,90%乙醇,超声20 min,料液比1∶16(g/mL),该工艺下黄精总黄酮的得率为103.10±0.02μg/g,该法简便可行、重复性高。高效液相色谱(HPLC)法分析陕产黄精总黄酮,其中含槲皮素二水物6.43±0.25μg/g和黄芩素92.31±1.75μg/g。黄精总黄酮清除DPPH自由基、羟自由基和ABTS的EC_(50)分别是11.20、57.88和23.75μg/mL,说明黄精总黄酮具有较强的抗氧化能力。CCK-8法表明黄精总黄酮作用A549细胞24、48、72 h的IC_(50)分别是25.18、12.52和9.25μg/mL,黄精总黄酮可剂量和时间依赖性抗A549细胞增殖。

关键词：黄精总黄酮酶辅助超声高效液相抗氧化抗增殖

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硫化氢对胃肠道的“双相”调节作用及其介导的药物效-毒转化

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中国中药杂志 2022年第15期47卷 3986-3993页

作者：于金高李娜王征惠玉晶贺宇樊修和陕西中医药大学陕西中药资源产业化省部共建协同创新中心/秦药特色资源研究开发国家重点实验室(培育)/陕西省创新药物研究中心陕西咸阳712046 陕西中医药大学陕西省中医药管理局中药药效机制与物质基础重点研究室陕西咸阳712046

硫化氢是机体细胞重要的信号转导分子之一,其在胃肠道内的合成和分解代谢极为旺盛,在胃肠道生理病理过程中的作用也十分复杂。通过梳理近年来有关硫化氢和胃肠道相关的研究文献,提出硫化氢在胃肠道内发挥着“双相”调节作用,低浓度下可... 详细信息

硫化氢是机体细胞重要的信号转导分子之一,其在胃肠道内的合成和分解代谢极为旺盛,在胃肠道生理病理过程中的作用也十分复杂。通过梳理近年来有关硫化氢和胃肠道相关的研究文献,提出硫化氢在胃肠道内发挥着“双相”调节作用,低浓度下可促进胃肠道功能,而高浓度下则损害胃肠道。硫化氢供体药物或硫化氢代谢调节剂通过恢复硫化氢代谢稳态从而发挥治疗作用,并通过硫化氢相关的肠生物轴将药物作用范围扩大到全身组织;同时,药物可因性质不稳定、局部剂量过高、药理效应偏强等原因,使硫化氢代谢偏离稳态,从而诱发毒副作用或将治疗作用逐渐转化为毒副作用。相关认识可为硫化氢生理病理作用机制的深入研究以及硫化氢相关药物研发及其毒、效机制研究提供参考。

关键词：硫化氢代谢稳态胃肠道菌群供体毒性效-毒转化机制

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荧光探针法检测脏器硫化氢方法的建立及验证

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中国药理学通报 2023年第8期39卷 1592-1598页

作者：李娜樊修和王征胡伟杨浩东熊洋洋于金高陕西中医药大学陕西中药资源产业化省部共建协同创新中心秦药特色资源研究开发国家重点实验室(培育)陕西省创新药物研究中心陕西咸阳712046 陕西中医药大学陕西省中医药管理局中药药效机制与物质基础重点研究室陕西咸阳712046

目的快速制备并分离纯化硫化氢特异性荧光探针(Washington State Probe-5),建立动物组织中硫化氢的荧光探针测定法,并在癌性胸水模型中进行方法适用性验证。方法优化条件分离纯化WSP-5;对荧光探针反应液配制溶剂、DMSO加入体积、pH、反... 详细信息

目的快速制备并分离纯化硫化氢特异性荧光探针(Washington State Probe-5),建立动物组织中硫化氢的荧光探针测定法,并在癌性胸水模型中进行方法适用性验证。方法优化条件分离纯化WSP-5;对荧光探针反应液配制溶剂、DMSO加入体积、pH、反应液溶剂和反应液体积、样品前处理温度、研磨次数、研磨后静置时间等条件进行考察;以S-180腹水瘤细胞建立癌性胸水小鼠模型,测定小鼠各脏器中的硫化氢含量。结果以硅胶和葡聚糖凝胶为固定相,二氯甲烷-甲醇-甲酸(60∶1∶0.1,V/V/V)和二氯甲烷-甲醇(1∶1,V/V)为洗脱剂制备WSP-5纯品;动物组织样本和硫氢化钠标准溶液加入优化后的5倍量冰冷反应液,低温研磨、高速离心,上清液避光孵育12 h,测定荧光强度并计算硫化氢浓度;该方法检测限约0.6μmol·L^(-1),定量限1μmol·L^(-1),在硫氢化钠一定浓度范围内,浓度与荧光强度线性系数均大于0.99;在癌性胸水小鼠模型中,各脏器硫化氢含量随着注射癌细胞数量的增多均有不同程度的增加趋势。结论该方法操作简单、成本低、灵敏度高、特异性强,适合各类组织样本的高通量检测,可为硫化氢相关药效机制的深入研究和相关药物开发提供方法学参考。

关键词：硫化氢检测方法荧光探针 WSP-5 方法优化癌性胸水

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基于JAK2/ERK1/2/STAT3信号通路探讨滋水清肝饮对皮质酮代替饮水抑郁模型小鼠干预作用

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中药药理与临床 2024年第9期40卷 42-48页

作者：张雨涵曹珊珊史磊磊张佳萍史永恒王斌韩朝军刘继平陕西中医药大学药学院咸阳712046 陕西省中医药管理局中药药效机制与物质基础重点研究室咸阳712046 陕西省食品药品安全监测重点实验室咸阳712046 中医药脑健康产业陕西省高校工程研究中心咸阳712046

目的:通过酪氨酸激酶2(JAK2)/细胞外调节蛋白激酶1/2(ERK1/2)/信号转导和转录激活因子3(STAT3)信号通路探究滋水清肝饮对皮质酮(CORT)代替饮水小鼠抑郁模型的干预作用。方法:除正常对照组外,用皮质酮代替饮水建立抑郁模型,造模21 d后根... 详细信息

目的:通过酪氨酸激酶2(JAK2)/细胞外调节蛋白激酶1/2(ERK1/2)/信号转导和转录激活因子3(STAT3)信号通路探究滋水清肝饮对皮质酮(CORT)代替饮水小鼠抑郁模型的干预作用。方法:除正常对照组外,用皮质酮代替饮水建立抑郁模型,造模21 d后根据糖水偏好结果随机分为模型对照组、盐酸氟西汀0.01 g/kg组、滋水清肝饮8.84、17.67、35.34 g/kg组,各组分别灌胃给药14 d。每周给药结束后进行糖水偏好试验及行为学试验,HE染色观察小鼠海马形态学改变;免疫荧光染色检测小鼠海马小胶质细胞标志物离子钙结合衔接分子-1(Iba-1)荧光强度,并统计其数量;检测小鼠血清和海马中丙二醛(MDA)、5-羟色胺(5-HT)、去甲肾上腺素(NA)、CORT含量;qRT-PCR法检测小鼠海马组织中肿瘤坏死因子-α(Tnfα)、白细胞介素1β(Il1b)mRNA的表达;Western blot法检测小鼠海马组织JAK2、p-JAK2、ERK1/2、p-ERK1/2、STAT3和p-STAT3蛋白的表达。结果:与正常对照组相比,模型对照组小鼠糖水偏好率降低;小鼠不动时间延长,运动路程、运动时间和平均速度降低,在边缘区域停留时间增加(P<0.05或P<0.01),海马神经细胞变形,轮廓模糊;海马DG区Iba-1荧光强度增强,数量增加,血清和海马中的5-HT和NA含量降低,MDA和CORT含量升高,小鼠海马Tnfα、Il1b mRNA表达上调,p-JAK2和p-STAT3蛋白表达上调,p-ERK1/2蛋白表达下调(P<0.05或P<0.01);与模型对照组相比,给药各组小鼠糖水偏好率提高,小鼠的不动时间缩短,运动路程、运动时间和平均速度明显增加,在边缘区域的停留时间明显降低(P<0.05或P<0.01),神经细胞改善,形态基本恢复正常;海马DG区Iba-1荧光强度降低,数量减少;血清和海马中的5-HT和NA含量升高,MDA和CORT含量降低;小鼠海马Tnfα、Il1b mRNA表达下调,p-JAK2和p-STAT3蛋白表达下调,p-ERK1/2蛋白表达上调,其中以滋水清肝饮17.67 g/kg组最为明显(P<0.05或P<0.01)。结论:滋水清肝饮能显著改善皮质酮代替饮水小鼠的抑郁样行为,减轻炎症反应,改善HPA轴紊乱,其作用机制可能与调控小鼠海马JAK2/ERK1/2/STAT3信号通路有关。

关键词：滋水清肝饮抑郁症皮质酮替代饮水抑郁模型酪氨酸激酶2/细胞外调节蛋白激酶1/2/信号转导和转录激活因子3信号通路

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SARS-CoV-2刺突糖蛋白对神经细胞的损伤效应及机制

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中国药理学与毒理学杂志 2024年第5期38卷 375-383页

作者：王娇李佳佳肖文一韦冬晖蒋宁周文霞陕西中医药大学药学院陕西省中医药管理局中药药效机制与物质基础重点研究室中医药脑健康产业陕西省高校工程研究中心陕西咸阳712046 军事科学院军事医学研究院国家安全特需药品全国重点实验室北京100850

目的探讨严重急性呼吸综合征冠状病毒2(SARS-CoV-2)刺突糖蛋白(S蛋白)对人神经母细胞瘤细胞(SH-SY5Y)的损伤效应及其机制。方法用S蛋白0(细胞对照组),25,50,75和100 mg·L^(-1)处理SH-SY5Y 24 h,CCK-8法检测细胞活力;比色法检测乳... 详细信息

目的探讨严重急性呼吸综合征冠状病毒2(SARS-CoV-2)刺突糖蛋白(S蛋白)对人神经母细胞瘤细胞(SH-SY5Y)的损伤效应及其机制。方法用S蛋白0(细胞对照组),25,50,75和100 mg·L^(-1)处理SH-SY5Y 24 h,CCK-8法检测细胞活力;比色法检测乳酸脱氢酶(LDH)释放率;EdU试剂盒检测细胞增殖;荧光素酶发光法检测细胞内ATP含量;JC-1荧光探针法检测细胞线粒体膜电位(MMP);Seahorse XF检测细胞糖酵解及线粒体氧化磷酸化水平。结果与细胞对照组相比,S蛋白25,50,75和100 mg·L^(-1)组细胞活力显著降低(P<0.01),半数抑制浓度(IC_(50))为65.05 mg·L^(-1);LDH释放率显著增加(P<0.01);EdU阳性细胞比例显著降低(P<0.01);S蛋白75和100 mg·L^(-1)组细胞内ATP含量显著降低(P<0.01);S蛋白50和75 mg·L^(-1)组细胞内MMP显著降低(P<0.05,P<0.01);S蛋白50 mg·L^(-1)组基础糖酵解水平和糖酵解能力的最大值显著升高(P<0.05,P<0.01),S蛋白25和50 mg·L^(-1)组呼吸能力最大值显著升高(P<0.05,P<0.01)。SH-SY5Y细胞活力与细胞内ATP含量和MMP均呈正相关(r^(2)=0.9209,P=0.001;r^(2)=0.6170,P=0.0025);与反映细胞糖酵解水平的细胞基础糖酵解水平和糖酵解能力最大值呈负相关(r^(2)=0.5194,P=0.0285;r^(2)=0.6664,P=0.0073),与反映线粒体氧化磷酸化水平的ATP生成能力呈负相关(r^(2)=0.8204,P=0.0008)。结论S蛋白使SH-SY5Y细胞活力下降,抑制细胞增殖,其机制可能与干扰神经细胞内能量代谢密切相关。

关键词：严重急性呼吸综合征冠状病毒2(SARS-CoV-2) 刺突糖蛋白人神经母细胞瘤细胞神经损伤糖酵解能量代谢

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