检索结果-内蒙古大学图书馆

现代生物医学进展 2016年第30期16卷 5833-5838页

作者：苑艳艳郭菲菲孟祥璐孙向荣公衍玲栾晓杨丹丹张孟玲徐珞青岛大学基础医学院病理生理学教研室山东青岛266021 郓城县人民医院肿瘤血液科山东菏泽274700 郓城县人民医院山东菏泽274700 青岛科技大学化工学院山东青岛266042

目的：研究化疗后止呕药联合侧脑室注射orexin能否改善顺铂诱导的异食癖与食欲减退,进一步探索吡嘧司特联合orexin抗呕吐的机制。方法：1腹腔注射止呕药并侧脑室置管给予orexin,观察大鼠高岭土摄取及摄食改变。2EIA法测量脑脊液中P物质... 详细信息

目的：研究化疗后止呕药联合侧脑室注射orexin能否改善顺铂诱导的异食癖与食欲减退,进一步探索吡嘧司特联合orexin抗呕吐的机制。方法：1腹腔注射止呕药并侧脑室置管给予orexin,观察大鼠高岭土摄取及摄食改变。2EIA法测量脑脊液中P物质含量。结果：1顺铂中高剂量组高岭土摄入增加、摄食和体重减少,呈量效依赖关系（P〈0.05~0.01）。2恩丹西酮早期抑制高岭土摄入（P〈0.05）。联合用药后延长该效应且晚期增加摄食（P〈0.05）。3阿瑞吡坦晚期抑制高岭土摄入,呈量效依赖关系（P〈0.05~0.01）,联合用药后第4天,高岭土摄取减少、摄食增加（P〈0.05）。4吡嘧司特晚期抑制高岭土摄入,呈量效依赖关系（P〈0.05~0.01）。高剂量吡嘧司特晚期增加摄食（P〈0.05）。联合用药后第4、5天,高岭土摄入减少,第1、4、5天摄食增加（P〈0.05）。5注射顺铂脑脊液中P物质浓度升高（P〈0.05）。联合用药能够降低P物质浓度（P〈0.05）。结论：联合应用orexin能够延长止呕药作用期并改善顺铂引起的食欲减退。吡嘧司特通过减少P物质的含量,抑制高岭土摄入。

关键词： Orexin P物质顺铂异食癖大鼠

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Orexin和P物质对顺铂诱发大鼠异食癖的影响

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现代生物医学进展 2016年第30期16卷 5814-5818页

作者：张颖韩波郭菲菲孙向荣公衍玲张孟玲杨丹丹徐珞青岛大学基础医学院病理生理学教研室山东青岛266021 济南市明水眼科医院山东章丘250200 章丘市明水街道办事处社区卫生服务中心山东章丘250200 青岛科技大学化工学院山东青岛266042

目的:观察食欲素(Orexin)和P物质(SP)对顺铂诱发大鼠异食癖的影响。方法:雄性Wistar大鼠被随机分为对照组和顺铂处理组,顺铂处理组给予大鼠顺铂(3或6 mg/kg,腹腔注射),对照组给予等量生理盐水。记录顺铂大鼠摄食高岭土量、摄食量的改变;... 详细信息

目的:观察食欲素(Orexin)和P物质(SP)对顺铂诱发大鼠异食癖的影响。方法:雄性Wistar大鼠被随机分为对照组和顺铂处理组,顺铂处理组给予大鼠顺铂(3或6 mg/kg,腹腔注射),对照组给予等量生理盐水。记录顺铂大鼠摄食高岭土量、摄食量的改变;Real-time PCR法观察顺铂对大鼠下丘脑Orexin和延髓中SP前体-前速激肽原A(PPT-A)m RNA表达的影响;分别和联合应用SP受体(NK1受体)拮抗剂阿瑞匹坦和Orexin-A对顺铂大鼠异食癖和摄食量的作用。结果:皮下注射3 mg/kg(低剂量组)的顺帕后大鼠高岭土摄入量和摄食量与对照组相比无明显差异(P>0.05),而注射6 mg/kg(高剂量组)顺铂后,大鼠高岭土摄入量与对照组和低剂量组相比显著增加(P<0.05);高剂量的顺铂作用12 h时,大鼠延髓内PPT-A的m RNA表达有轻微增加,但无统计学差异(P>0.05),24 h后,延髓内PPT-A的m RNA表达量显著增加(P<0.05)。在此后持续观察的5天中,顺铂可持续引起延髓中PPT-A的mRNA表达增高,在第5天时PPT-A的m RNA仍维持166.23±16.92%的高表达。高剂量顺铂抑制大鼠下丘脑中Orexin的mRNA表达,24 h时Orexin降低幅度最明显,为对照组的34.81±7.22%(P<0.05)。此后检测的5天,Orexin浓度均低于对照组;将阿瑞匹坦和orexin联合应用,大鼠高岭土摄入量较单独应用阿瑞匹坦或orexin明显减少,摄食量显著增加(P<0.05)。结论:P物质和orexin通路对顺铂化疗大鼠的异食癖和摄食量调控具有协同作用。

关键词： Orexin P物质顺铂异食癖大鼠

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结核分枝杆菌抗毒素higA的原核表达及多克隆抗体制备

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细胞与分子免疫学杂志 2015年第7期31卷 972-976,981页

作者：刘丹伊正君付玉荣李书轻杨珊珊潍坊医学院临床检验诊断学教研室山东潍坊261053 潍坊医学院附属医院检验科山东省临床检验诊断学高校重点实验室山东潍坊261031 潍坊医学院基础医学院病原生物学教研室山东潍坊261053 菏泽市第三人民医院检验科山东菏泽274031 中国人民解放军第401医院检验科山东青岛266000

目的克隆编码结核分枝杆菌抗毒素基因hig A并在大肠杆菌中表达,纯化hig A蛋白后,制备兔抗hig A的多克隆抗体。方法利用PCR法从结核分枝杆菌H37Rv基因组扩增hig A基因;构建重组表达质粒p ET-32a(+)-hig A;筛选出阳性重组质粒后,转化大肠... 详细信息

目的克隆编码结核分枝杆菌抗毒素基因hig A并在大肠杆菌中表达,纯化hig A蛋白后,制备兔抗hig A的多克隆抗体。方法利用PCR法从结核分枝杆菌H37Rv基因组扩增hig A基因;构建重组表达质粒p ET-32a(+)-hig A;筛选出阳性重组质粒后,转化大肠杆菌BL21,异丙基硫代-β-D-半乳糖苷诱导目的蛋白表达;利用SDS-PAGE与Western blot法鉴定目的蛋白的表达;以纯化的hig A蛋白免疫新西兰大白兔,制备抗hig A的多克隆抗体并进行效价及特异性鉴定。结果成功扩增出了hig A基因,克隆于载体p ET-32a(+)质粒中,PCR筛选和酶切鉴定获得阳性克隆,测序证实正确;转化大肠杆菌BL21后能成功诱导hig A蛋白[相对分子质量(Mr)36 630]的表达;利用纯化的hig A蛋白免疫新西兰大白兔后,能有效地刺激特异性hig A抗体的产生,抗体的效价达到1∶3200以上。结论成功在大肠杆菌中表达出hig A蛋白,并制备出效价及特异性良好的兔抗hig A多克隆抗体。

关键词：结核分枝杆菌毒素抗毒素系统 higA 多克隆抗体

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细胞培养中的异常凋亡

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中国组织工程研究 2015年第B05期19卷 119-121页

作者：王兰吴梅潘旭东徐平平刘璐青岛大学医学院组织学与胚胎学教研室山东省青岛市266071 青岛大学基础医学实验中心人体显微结构学实验室山东省青岛市266071 青岛大学医学院附属医院神经内科山东省青岛市266000 青岛大学医学院生物化学系山东省青岛市266071

背景：在细胞培养过程中，某些细胞在没有外部刺激的情况下也会发生凋亡。目的：观察细胞培养时出现异常凋亡。方法：将人乳腺癌细胞mcf-7，mda-mb-231，人神经母细胞瘤SH—SY5Y，qddq—nml，qddq-nm2，人肝癌细胞HepG2和人脐静脉内皮... 详细信息

背景：在细胞培养过程中，某些细胞在没有外部刺激的情况下也会发生凋亡。目的：观察细胞培养时出现异常凋亡。方法：将人乳腺癌细胞mcf-7，mda-mb-231，人神经母细胞瘤SH—SY5Y，qddq—nml，qddq-nm2，人肝癌细胞HepG2和人脐静脉内皮细胞采用常规传代方法（方法1）、传代时间调节的方法（方法2）和离心时间调整的方法（方法3）进行培养。结果与结论：在正常情况下，HepG2和人脐静脉内皮细胞易分裂，其他少见分裂，方法1和方法2培养的人脐静脉内皮细胞和HepG2细胞均出现死亡，但方法3可以使细胞恢复正常状态。此种细胞凋亡现象以目前的细胞凋亡通路无法合理解释，似乎不是通过单一信号诱导的细胞凋亡通路，而更像是细胞内外的信号同时作用的结果。

关键词：细胞凋亡细胞裂解传代培养细胞培养

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新城疫病毒通过上调小鼠NK细胞TRAIL表达杀伤Novikoff小鼠肝癌细胞

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细胞与分子免疫学杂志 2015年第5期31卷 599-604页

作者：宋德志梁莹樊晓晖殷君宫金伶赖振屏高灵茜广西医科大学基础医学院微生物学教研室广西南宁530021 广西中医药大学第一附属医院检验科广西南宁530023 青岛市疾病预防控制中心山东青岛266033

目的观察经腹腔注射的新城疫病毒(NDV)对小鼠脾脏NK细胞表达肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)及杀伤Novikoff小鼠肝癌细胞的影响,并探讨其与γ干扰素(IFN-γ)的关系。方法给予BALB/c小鼠和IFN-γR-/-B6.129S7小鼠腹腔注射NDV,12 h后... 详细信息

目的观察经腹腔注射的新城疫病毒(NDV)对小鼠脾脏NK细胞表达肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)及杀伤Novikoff小鼠肝癌细胞的影响,并探讨其与γ干扰素(IFN-γ)的关系。方法给予BALB/c小鼠和IFN-γR-/-B6.129S7小鼠腹腔注射NDV,12 h后,用ELISA检测小鼠外周血IFN-γ浓度;分离小鼠脾脏NK细胞,用反转录PCR法检测NK细胞中TRAIL mRNA转录水平,Western blot法检测脾脏NK细胞中TRAIL蛋白水平,用乳酸脱氢酶(LDH)释放法检测NK细胞对Novikoff肝癌细胞的杀伤作用。结果腹腔注射NDV可以提高BALB/c小鼠外周血IFN-γ浓度,上调小鼠脾脏NK细胞TRAIL mRNA和蛋白表达水平,增强小鼠脾脏NK细胞体外条件下对Novikoff肝癌细胞的杀伤活性。TRAIL中和抗体能抑制NK细胞对Novikoff肝癌细胞的杀伤作用。IFN-γR-/-B6.129S7小鼠接受NDV注射后脾脏NK细胞的TRAIL表达无显著增加,NDV激活的NK细胞对Novikoff肝癌细胞的杀伤活性显著低于IFN-γ受体正常的BALB/c小鼠。结论腹腔注射NDV可增强脾脏NK细胞的体外抗肿瘤活性,其机制之一是通过IFN-γ受体途径上调NK细胞表面TRAIL蛋白表达来发挥作用。

关键词：新城疫病毒 NK细胞肿瘤坏死因子相关凋亡配体肝癌细胞

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阿托伐他汀通过下调核因子-κB减轻载脂蛋白E基因缺陷小鼠颈总动脉粥样硬化

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国际脑血管病杂志 2015年第8期23卷 611-616页

作者：孙清琳吴梅潘旭东马爱军王婷肖星王兰青岛大学医学院组织胚胎学教研室 266071 青岛大学基础医学实验中心人体显微结构学实验室 266071 青岛大学附属医院神经内科 266071

目的探讨阿托伐他汀抗颈总动脉粥样硬化形成作用及其可能机制。方法36只雄性载脂蛋白E（apolipoprotein E，ApoE）基因敲除（ApoE^-/-）小鼠随机分为对照组、模型组和阿托伐他汀组。对照组饲以普通饲料做假手术，模型组和阿托伐他汀组... 详细信息

目的探讨阿托伐他汀抗颈总动脉粥样硬化形成作用及其可能机制。方法36只雄性载脂蛋白E（apolipoprotein E，ApoE）基因敲除（ApoE^-/-）小鼠随机分为对照组、模型组和阿托伐他汀组。对照组饲以普通饲料做假手术，模型组和阿托伐他汀组均给予高脂饮食并做右侧颈总动脉套管术，术后第5周开始分别予生理盐水和阿托伐他汀（10mg／kg，1次／d）灌胃。术后第8周末经股动脉取血进行生化检测，并取右侧颈总动脉进行组织病理学检查。实时荧光定量聚合酶链反应（polymerase chain reaction，PCR）检测斑块内NF—κB mRNA表达，蛋白质印迹法检测磷酸化NF-κBp65蛋白表达。结果模型组和阿托伐他汀组血脂水平均显著高于对照组（P均〈0．05），阿托伐他汀组血脂水平低于模型组，但差异无统计学意义。组织病理学观察显示，模型组可见明显斑块形成，斑块内可见坏死核心区和新生微血管；阿托伐他汀组血管内膜明显增厚，但管壁可见较完整的内皮细胞。模型组和阿托伐他汀组斑块负荷均显著高于对照组（P均〈0．001），而阿托伐他汀组斑块负荷显著小于模型组（P〈0．001）。实时荧光定量PCR检测显示，模型组和阿托伐他汀组NF—κB mRNA表达水平均显著高于对照组（P均〈0．001），阿托伐他汀组NF—κB mRNA表达水平显著低于模型组（P=0．022）。蛋白质印迹分析显示，模型组磷酸化NF—κBp65表达水平显著高于对照组（P〈0．001），阿托伐他汀组磷酸化NF-κBp65表达水平显著低于模型组（P〈0．001）。结论阿托伐他汀可通过下调核因子-κB减轻颈总动脉粥样硬化。

关键词：动脉粥样硬化颈总动脉羟甲基戊二酰基CoA还原酶抑制剂 NF-κB 炎症载脂蛋白E类疾病模型动物小鼠阿托伐他汀

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阿托伐他汀对ApoE-/-小鼠颈动脉粥样硬化斑块NF-κB表达的影响

阿托伐他汀对ApoE-/-小鼠颈动脉粥样硬化斑块NF-κB表达的影响

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中华医学峰会暨中华医学会神经病学分会第八届全国中青年神经病学学术会议

作者：潘旭东吴梅孙清琳杨绍楠马爱军王婷青岛大学医学院附属医院(东区)神经内科青岛大学基础医学实验中心人体显微结构学实验室青岛大学医学院组织胚胎学教研室

目的建立载脂蛋白E基因敲除(ApoE-/-)小鼠颈动脉粥样硬化模型,探讨阿托伐他汀抗动脉粥样硬化炎症作用。方法36只雄性ApoE-/-小鼠随机分为3组:对照组、模型组;阿托伐他汀组(他汀组)。对照组饲以普通饲料并做假手术。模型组、他汀组均给... 详细信息

目的建立载脂蛋白E基因敲除(ApoE-/-)小鼠颈动脉粥样硬化模型,探讨阿托伐他汀抗动脉粥样硬化炎症作用。方法36只雄性ApoE-/-小鼠随机分为3组:对照组、模型组;阿托伐他汀组(他汀组)。对照组饲以普通饲料并做假手术。模型组、他汀组均给予高脂饮食并做右颈总动脉套管术,术后第5周模型组予生理盐水灌胃,他汀组予阿托伐他汀(10mg·kg-1·d-1)灌胃。三组小鼠于术后第8周末股动脉取血做血生化检测,并取右侧颈总动脉,HE染色观察血管组织病理学变化,实时荧光定量PCR

关键词：阿托伐他汀颈动脉粥样硬化斑块

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TNF-α对小鼠骨髓间充质干细胞免疫抑制作用影响

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青岛大学医学院学报 2015年第2期51卷 169-171,174页

作者：亓俊华吴梅徐祥黄宏刘晓萍青岛大学医学院组织与胚胎学教研室山东青岛266071 青岛大学基础医学实验中心人体显微结构学实验室第三军医大学野战外科研究所干细胞移植&细胞治疗中心

目的探讨肿瘤坏死因子-α(TNF-α)对小鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)免疫抑制作用影响。方法采用全骨髓贴壁培养法分离培养小鼠的BMSCs,观察其细胞形态学的变化。应用免疫荧光法检测小鼠BMSCs CXCR4的表达;应用油红O和阿尔新蓝染色分别鉴定... 详细信息

目的探讨肿瘤坏死因子-α(TNF-α)对小鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)免疫抑制作用影响。方法采用全骨髓贴壁培养法分离培养小鼠的BMSCs,观察其细胞形态学的变化。应用免疫荧光法检测小鼠BMSCs CXCR4的表达;应用油红O和阿尔新蓝染色分别鉴定BMSCs成脂和成软骨诱导情况;应用ELISA试剂盒检测细胞培养上清液中白细胞介素-10(IL-10)和前列腺素2(PGE2)的表达;应用免疫印迹实验检测培养细胞环氧化物水解酶2(COX-2)和核因子-κB(NF-κB)蛋白的表达。结果体外培养的小鼠BMSCs贴壁呈现克隆性生长,大部分细胞呈圆形,部分呈梭形。BMSCs CXCR4的阳性表达率为100%。BMSCs可分化为脂肪细胞及软骨细胞。TNF-α处理组上清液中IL-10和PGE2的表达明显高于对照组(t=14.235、12.005,P<0.05),细胞COX-2和NF-κB蛋白的表达明显高于对照组(t=8.557、4.301,P<0.05)。结论 TNF-α可能通过NF-κB信号通路,明显增强小鼠BMSCs的免疫抑制作用。

关键词：骨髓间质干细胞肿瘤坏死因子-α 免疫抑制小鼠

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HMGB1和sRAGE与煤工尘肺通气功能的相关性

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中国工业医学杂志 2014年第3期27卷 224-225页

作者：祝丽丽梁园园曲晨菲万文娟李素平山西医科大学公共卫生学院山西太原030001 青岛滨海学院医学院医学检验教研室山东青岛266000

通过检测煤工尘肺(CWP)患者与健康对照者血清中高迁移率族蛋白Ⅰ(HMGB1)、可溶性晚期糖基化终末产物受体(sRAGE)的表达水平及肺通气功能,探讨HMGB1、sRAGE与肺通气功能的相关性。结果表明,CWP患者肺功能损伤类型以限制型为主,且随CWP期... 详细信息

通过检测煤工尘肺(CWP)患者与健康对照者血清中高迁移率族蛋白Ⅰ(HMGB1)、可溶性晚期糖基化终末产物受体(sRAGE)的表达水平及肺通气功能,探讨HMGB1、sRAGE与肺通气功能的相关性。结果表明,CWP患者肺功能损伤类型以限制型为主,且随CWP期别的增加,肺通气功能呈进行性下降。HMGB1表达量与CWP患者肺通气功能在壹期、贰期具有一定的平行关系,叁期时表达量下降;sRAGE表达量随CWP期别的增加而升高。

关键词：煤工尘肺 HMGB1 sRAGE 肺通气功能

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Akt/mTOR信号通路介导低浓度过氧化氢对小鼠表皮干细胞的促增殖作用

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感染．炎症．修复 2015年第3期16卷 138-144页

作者：亓俊华聂刚吴梅刘晓萍陈民佳朱明袁培松张娅宋昱庆郭韡邢伟李向云罗东林黄宏徐祥第三军医大学大坪医院野战外科研究所创伤烧伤与复合伤国家重点实验室第一研究室重庆400042 青岛大学医学院组织胚胎学教研室山东青岛266071 温州医科大学附属第一医院皮肤科浙江温州325000 青岛大学基础医学实验中心人体显微结构学实验室山东青岛266071

目的:探讨低浓度过氧化氢(H_2O_2)对小鼠表皮干细胞(mESCs)体外促增殖作用及其机制。方法:以酶消化法分离培养mESCs。免疫荧光技术鉴定第3代mESCsβ1整合素和角蛋白19(K19)表达,流式细胞术鉴定CD34的表达;以不同低浓度H_2O_2(0、25、50... 详细信息

目的:探讨低浓度过氧化氢(H_2O_2)对小鼠表皮干细胞(mESCs)体外促增殖作用及其机制。方法:以酶消化法分离培养mESCs。免疫荧光技术鉴定第3代mESCsβ1整合素和角蛋白19(K19)表达,流式细胞术鉴定CD34的表达;以不同低浓度H_2O_2(0、25、50、100、150和200μmol/L)处理mESCs 48 h和72h。同时,另一组实验中在用不同浓度H_2O_2刺激的同时加入或不加入雷帕霉素(50 ng/ml)培养48 h。甲氮甲唑蓝(MTT)法检测细胞增殖;Western Blot法检测H_2O_2刺激小鼠mESCs 48 h Akt/mTOR信号通路关键蛋白mTOR、Akt、P70s6k、e IF4E、4E-BP1、p-mTOR、p-Akt、p-P70s6k、p-eIF4E、p-4E-BP1和细胞增殖相关蛋白Cyclin D1、增殖细胞核抗原(PCNA)的表达。结果:免疫荧光技术检测分离培养的mESCs细胞100%表达β1整合素和K19;流式细胞术检测99.8%的mESCs表达CD34;MTT检测结果显示,48 h和72 h时25μmol/L和50μmol/L的H_2O_2可以有效地促进mESCs的增殖(P<0.05),而雷帕霉素能拮抗这一效应;但当H_2O_2浓度为200μmol/L时,则显著抑制mESCs增殖(P<0.05);免疫印迹结果显示低浓度H_2O_2处理mESCs 48 h后,Akt/mTOR信号通路关键蛋白mTOR、Akt、eIF4E、4E-BP1水平及其磷酸化水平(p-mTOR、p-eIF4E、p-4E-BP1)显著增加(P<0.05或P<0.01),当H_2O_2浓度为200μmol/L时则抑制其表达(P<0.05或P<0.01)。此外,50μmol/L的H_2O_2能上调细胞周期蛋白Cyclin D1和PCNA的表达,而雷帕霉素能拮抗这一作用。结论:低浓度的H_2O_2对mESCs有明显的促增殖作用,并且能激活Akt/mTOR通路。而低浓度H_2O_2对mESCs的促增殖作用至少部分是通过活化Akt/mTOR信号通路介导的。

关键词：表皮干细胞过氧化氢 Akt/mTOR信号通路细胞增殖

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