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平喘颗粒对哮喘小鼠肺泡灌洗液中外泌体的分泌及miR-23b介导的气道平滑肌细胞增殖的影响

中华中医药杂志 2019年第5期34卷 2007-2011页

作者：袁星星田春燕师留杰王婷马建李竹英黑龙江中医药大学哈尔滨150040 黑龙江省中医药科学院南岗分院哈尔滨150001 黑龙江中医药大学附属第一医院哈尔滨150040 黑龙江中医药大学北药基础与应用研究省部共建教育部重点实验室哈尔滨150040

目的:观察平喘颗粒对外泌体的分泌及miR-23b介导的气道平滑肌细胞增殖的影响。方法:通过构建哮喘小鼠模型并以空白小鼠为对照组,观察不同处理方式下小鼠肺泡灌洗液中外泌体的分泌及外泌体中miR-23b的表达;通过外泌体干预气道平滑肌细胞... 详细信息

目的:观察平喘颗粒对外泌体的分泌及miR-23b介导的气道平滑肌细胞增殖的影响。方法:通过构建哮喘小鼠模型并以空白小鼠为对照组,观察不同处理方式下小鼠肺泡灌洗液中外泌体的分泌及外泌体中miR-23b的表达;通过外泌体干预气道平滑肌细胞,分别检测平滑肌细胞的增殖、凋亡,及细胞中TβRⅡ蛋白的表达。结果:与空白组比较,模型组外泌体数量、标记蛋白Alix、TSG101、CD9、CD63的表达、平滑肌细胞的增殖及TβRⅡ蛋白的表达显著增加,miR-23b的表达和ASMCs的凋亡显著降低(P<0.01);与模型组比较,平喘颗粒显著降低外泌体数量、Alix、TSG101、CD9、CD63的表达、平滑肌细胞的增殖及TβRⅡ蛋白的表达,增加miR-23b的表达和ASMCs的凋亡(P<0.01)。结论:平喘颗粒能够促进外泌体中miR-23b的表达,进而下调ASMCs中TβRⅡ蛋白的表达,调控ASMCs增殖和凋亡,阻止哮喘气道重塑。

关键词：平喘颗粒外泌体 miR-23b 气道平滑肌细胞哮喘

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以提高自主学习能力为导向的天然药物化学思维导图知识体系的构建与应用

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中国医药导报 2020年第36期17卷 189-192页

作者：孟永海杨春娟王知斌关枫周媛媛翟春梅刘一畅杨炳友黑龙江中医药大学药学院教育部北药基础与应用研究重点实验室黑龙江省中药及天然药物药效物质基础研究重点实验室黑龙江哈尔滨150040 哈尔滨医科大学药学院黑龙江哈尔滨150040

随着现代信息化的巨大变革,中医药人才的培养方法和模式也迫切需要与时俱进、跟上时代的步伐,现代教学理念与方法必然要引入课堂和教学进程中,以适应新时代学生的学习观念和满足社会和经济的发展需求。思维导图作为一种全新的学习形式... 详细信息

随着现代信息化的巨大变革,中医药人才的培养方法和模式也迫切需要与时俱进、跟上时代的步伐,现代教学理念与方法必然要引入课堂和教学进程中,以适应新时代学生的学习观念和满足社会和经济的发展需求。思维导图作为一种全新的学习形式已经得到广泛使用,尤其是结合互联网技术的使用,使之作用发挥到了更高的水平。本文结合天然药物化学课堂教学实践,系统总结了思维导图在药学专业天然药物化学的应用特点,形成了比较完整成熟的教学模式和方法、建立了以提高学生自主学习能力为主线的思维导图知识体系。希望能提高药学专业学生的自主学习的能力,为社会培养更多的高素质的药学人才,服务于社会和人类的健康。

关键词：自主学习天然药物化学思维导图构建与应用

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基于UPLC/Q-TOF-MS分析白术炮制前后差异性成分

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中国食品添加剂 2019年第4期30卷 145-153页

作者：孟永海马智超张振朋董永亮孟祥瑛翟春梅黑龙江中医药大学教育部北药基础与应用研究重点实验室哈尔滨150040

目的:本文基于超高效液相色谱串联四级杆飞行时间(UPLC/Q-TOF-MS)建立白术麸炒白术、清炒白术的化学成分图谱,结合多元的统计分析数据技术,对白术生品与各炮制品的化学成分以及差异性成分进行考察,为白术炮制原理研究提供依据。方法:在... 详细信息

目的:本文基于超高效液相色谱串联四级杆飞行时间(UPLC/Q-TOF-MS)建立白术麸炒白术、清炒白术的化学成分图谱,结合多元的统计分析数据技术,对白术生品与各炮制品的化学成分以及差异性成分进行考察,为白术炮制原理研究提供依据。方法:在正离子模式下,采用Acquity UPLC BEH C18色谱柱(100 mm×2.1 mm,1.7μm,Waters),流动相0.1%甲酸水溶液-乙腈作为洗脱溶剂,电喷雾离子源,采集数据。并通过主成分分析法(PCA)寻找生品与各炮制品间的成分差异。结果:经PCA分析对比,发现6种化合物在生品与各炮制品间存在差异。分别是:7-Hydroxycoumarin、Atractylenolide VI、Atractylenolide II、Atractylenolide III、Atractylenolide I、8-β-methoxy atractylenolide I。结论:白术生品与各炮制品间在化学成分上存在明显差异,此实验为白术炮制前后化学成分变化规律分析提供数据基础。

关键词：白术炮制化学成分差异

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HPLC法同时测定不同采收年限及部位杜仲中5种黄酮类成分

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黑龙江医药 2020年第6期33卷 1267-1270页

作者：张威鹏朱雯张良付冬梅张子东张琳祖元刚东北林业大学化学化工与资源利用学院/森林植物生态学教育部重点实验室/林业生物制剂教育部工程研究中心黑龙江哈尔滨150040 黑龙江中医药大学教育部北药基础与应用研究重点实验室/黑龙江省中药及天然药物药效物质基础研究重点实验室黑龙江哈尔滨150040 黑龙江中医药大学附属第二医院南院黑龙江哈尔滨150060

目的:利用高效液相色谱仪器中测定杜仲不同样品中5种黄酮类化合物中活性成分的含量。方法:色谱柱选择HiQSilC18(250mm×4.6mm,5μm),流动相A为浓度为0.02%甲酸,流动相B为乙腈。高效液相色谱仪器梯度洗脱程序设置条件:0~15min,20%B;1... 详细信息

目的:利用高效液相色谱仪器中测定杜仲不同样品中5种黄酮类化合物中活性成分的含量。方法:色谱柱选择HiQSilC18(250mm×4.6mm,5μm),流动相A为浓度为0.02%甲酸,流动相B为乙腈。高效液相色谱仪器梯度洗脱程序设置条件:0~15min,20%B;15~40min,40%B,流速1.0mL/min,检测波长360nm,柱温25℃,进样量5μL。结果:5种黄酮类化合物中活性成分分别在1×10-4~1(R2=0.9994)、1×10-5~1(R2=0.9992)、1×10-4~1(R2=0.9996)、1×10-4~1(R2=0.9992)、1×10-5~1(R2=0.9993)范围内,表明线性关系考察结果良好。高效液相色谱法测定的杜仲5种活性成分的精密度、重复性、稳定性和加样回收率的相对标准偏差值均在5%以内。结论:通过高效液相色谱仪器中建立的方法,符合方法学考察的要求,可用来对杜仲叶、杜仲枝皮、杜仲干皮中5种黄酮类成分(芦丁、山奈酚、槲皮素、紫云英苷、金丝桃苷)进行含量测定。

关键词：杜仲黄酮类成分高效液相色谱

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牵牛子药理作用最新研究进展

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辽宁中医杂志 2020年第5期47卷 201-204页

作者：钮婧杰孙延平王秋红杨炳友姜海王知斌匡海学黑龙江中医药大学教育部北药基础与应用研究重点实验室黑龙江省中药及天然药物药效物质基础研究重点实验室黑龙江哈尔滨150040 广东药科大学中药学院中药炮制学教研室广东广州512000

牵牛子为旋花科植物,性寒,具有一定毒副作用。近十年来,已从牵牛子中提取分离出化学成分主要有酚酸类、树脂苷类、萜类、木脂素类等,并通过实验研究初步发现这些化学成分具有抗炎、介导细胞凋亡和自噬、促进骨细胞分化、兴奋子宫平滑肌... 详细信息

牵牛子为旋花科植物,性寒,具有一定毒副作用。近十年来,已从牵牛子中提取分离出化学成分主要有酚酸类、树脂苷类、萜类、木脂素类等,并通过实验研究初步发现这些化学成分具有抗炎、介导细胞凋亡和自噬、促进骨细胞分化、兴奋子宫平滑肌、促进大肠推进等多方面的药理作用。文章通过文献综述,从牵牛子的提取物、有效部位和组分、化学成分的新角度对牵牛子的药理作用及其作用机制进行了总结和探讨,为牵牛子进一步的研究奠定了基础。

关键词：牵牛子药理活性机制

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基于网络药理学的分心木总黄酮抗2型糖尿病作用机制研究及关于AKT/FoxO1信号通路的细胞实验验证

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药物评价研究 2019年第1期42卷 30-40页

作者：李国艳程艳刚曾桐春李明杰孙芮芮李慧峰孔祥鹏裴妙荣山西中医药大学中药学院黑龙江中医药大学教育部北药基础与应用研究重点实验室山西振东健康产业集团有限公司太原工程技术中心

目的通过网络药理学研究预测分心木总黄酮(TFDJF)的主要活性成分和作用靶点,探讨其多成分-多靶点-多通路的抗2型糖尿病(T2DM)的作用机制;并选取AKT/FoxO1信号通路进行细胞实验验证。方法基于文献检索构建分心木黄酮类成分的化学成分数据... 详细信息

目的通过网络药理学研究预测分心木总黄酮(TFDJF)的主要活性成分和作用靶点,探讨其多成分-多靶点-多通路的抗2型糖尿病(T2DM)的作用机制;并选取AKT/FoxO1信号通路进行细胞实验验证。方法基于文献检索构建分心木黄酮类成分的化学成分数据库,并以"类药五原则"筛选潜在的活性成分,采用PharmMapper服务器反向药效团匹配方法预测活性成分可能的作用靶标,并根据TTD、OMIM数据库中与T2DM相关的靶点,筛选分心木黄酮类成分抗T2DM的作用靶标,通过对靶标的基因本体(GO)功能富集分析和KEGG通路分析,构建活性成分-抗T2DM作用靶点-代谢通路网络图,探讨TFDJF抗T2DM的作用机制。采用系统对接网站进行GSK3B和AKT1对山柰酚的分子对接。并进一步采用细胞实验进行验证:选取HepG2细胞,运用高浓度胰岛素诱导胰岛素抵抗(IR)模型,150μg/mL TFDJF处理细胞36 h,氧化酶法检测各组细胞的葡萄糖消耗量,Western blotting法检测AKT-FoxO信号通路相关蛋白的表达。结果共获得分心木潜在的黄酮类活性成分10个,预测成分作用靶标共104个,筛选出与抗T2DM相关的关键靶点15个,KEGG通路富集分析发现TFDJF抗T2DM的作用机制可能与胰岛素、FoxO、AMPK和PI3K-AKT等信号通路有关。山柰酚与GSK3B有强烈的结合活性,与AKT1有较好的结合活性。进一步通过细胞实验验证,TFDJF可显著提高HepG2细胞IR模型葡萄糖消耗量(P<0.01),显著升高AKT蛋白磷酸化水平(P<0.01),显著降低FoxO1蛋白表达水平(P<0.01),验证了网络药理学的部分预测结果。结论 TFDJF抗T2DM的作用机制可能与胰岛素、FoxO、AMPK和PI3K-AKT等信号通路有关。

关键词：网络药理学 2型糖尿病分心木总黄酮分子对接胰岛素抵抗 AKT-FoxO信号通路

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川牛膝多糖对H_2O_2诱导PC12细胞氧化损伤保护作用的研究

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化学工程师 2019年第2期33卷 68-70,49页

作者：吴丽红怀雪马智超孟永海黑龙江中医药大学教育部北药基础与应用研究重点实验室黑龙江哈尔滨150040

目的:探讨川牛膝多糖组分对H_2O_2诱导PC12细胞产生的氧化和凋亡作用,并对其机制进行深入研究。方法:通过H_2O_2诱导PC12细胞,建立神经氧化损伤模型,通过MTT法测定PC12细胞存活率,丙二醛(MDA)、活性氧(ROS)和超氧化物歧化酶(SOD)检测氧... 详细信息

目的:探讨川牛膝多糖组分对H_2O_2诱导PC12细胞产生的氧化和凋亡作用,并对其机制进行深入研究。方法:通过H_2O_2诱导PC12细胞,建立神经氧化损伤模型,通过MTT法测定PC12细胞存活率,丙二醛(MDA)、活性氧(ROS)和超氧化物歧化酶(SOD)检测氧化作用,Hoechst 33342法染色观察川牛膝多糖组分对PC12细胞遭受H_2O_2损伤凋亡状态特征。结果:浓度为100μmol·L^(-1) H_2O_2时,PC12细胞产生明显损伤,为最佳造模浓度;川牛膝多糖组分能够减少H_2O_2诱导PC12的损伤程度,减少MDA含量、降低ROS的活性、提高SOD的活性,并减轻细胞凋亡作用。结论:川牛膝多糖能够减少H_2O_2对PC12细胞的氧化作用,增强细胞保护作用。

关键词：川牛膝多糖 PC12细胞氧化应激凋亡

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莫诺苷对TNF-α诱导MC3T3-E1细胞炎症的保护作用及机制研究

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中草药 2018年第16期49卷 3776-3780页

作者：杨炳友刘艳林晓影韩伟姜海冰韩华吕邵娃匡海学黑龙江中医药大学北药基础与应用研究教育部重点实验室黑龙江哈尔滨150040

目的研究莫诺苷对肿瘤坏死因子-α(TNF-α)诱导成骨细胞MC3T3-E1炎症的保护作用,探讨Caspase、MAPK和NF-κB通路调控机制。方法 TNF-α(50 ng/m L)诱导MC3T3-E1细胞,制备细胞炎症模型;MTT法检测莫诺苷对MC3T3-E1细胞增殖的影响,并检测... 详细信息

目的研究莫诺苷对肿瘤坏死因子-α(TNF-α)诱导成骨细胞MC3T3-E1炎症的保护作用,探讨Caspase、MAPK和NF-κB通路调控机制。方法 TNF-α(50 ng/m L)诱导MC3T3-E1细胞,制备细胞炎症模型;MTT法检测莫诺苷对MC3T3-E1细胞增殖的影响,并检测不同浓度的莫诺苷对TNF-α诱导MC3T3-E1细胞活力的影响;ELISA法检测细胞上清液中炎性因子白细胞介素-1β(IL-1β)、IL-6的水平;Western blotting法检测Caspase-3、Caspase-9、p-ERK、p-JNK、p-p38、p-IκBα、IκBα和NF-κB等相关蛋白的表达。结果莫诺苷能够促进正常MC3T3-E1细胞增殖,TNF-α诱导MC3T3-E1细胞增殖受到抑制,而莫诺苷对TNF-α诱导MC3T3-E1细胞具有保护作用;莫诺苷可以抑制TNF-α诱导MC3T3-E1细胞IL-1β和IL-6的释放;降低Caspase-3、Caspase-9、p-ERK、p-JNK、p-p38、p-IκBα蛋白的表达,升高IκBα蛋白表达,对NF-κB p65无明显影响。结论莫诺苷对TNF-α诱导MC3T3-E1炎症细胞有保护作用,其机制为抑制炎性因子的释放、抑制MAPK和NF-κB通路的激活、抑制凋亡蛋白Caspase的表达,从而抑制MC3T3-E1细胞的凋亡。

关键词：接骨木莫诺苷肿瘤坏死因子-α MC3T3-E1 炎症 Caspase

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五加生化胶囊对药物流产出血模型大鼠的影响及机制研究

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现代生物医学进展 2019年第4期19卷 636-641页

作者：张智博刘斌姚远王瑶李铁男王发善张宁黑龙江中医药大学黑龙江哈尔滨150040 黑龙江中医药大学北药基础与应用研究省部共建教育部重点实验室黑龙江哈尔滨150040

目的:观察五加生化胶囊对药物(米非司酮配伍米索前列醇)致流产出血大鼠模型的保护作用,并探讨其作用机制。方法:建立大鼠药物流产出血模型,分为正常组(K)、受孕对照组(KY)、模型组(M)和给药(G)组,观测大鼠子宫出血时间、出血量、子宫指... 详细信息

目的:观察五加生化胶囊对药物(米非司酮配伍米索前列醇)致流产出血大鼠模型的保护作用,并探讨其作用机制。方法:建立大鼠药物流产出血模型,分为正常组(K)、受孕对照组(KY)、模型组(M)和给药(G)组,观测大鼠子宫出血时间、出血量、子宫指数、子宫形态和血液流变学改变,采用放射免疫法、ELISA法、免疫组织化学法和IPP6.0图像分析系统对比观察了大鼠血清雌二醇(E2)、血浆层粘连蛋白(LM)和纤维连接蛋白(FN)含量变化,以及子宫组织中FN、LM和雌、孕激素受体(ER、PR)表达的变化。结果:与M组比较,G组药物流产出血大鼠子宫血量由0.40±0.15**mL减少到0.22±0.16#m L,出血时间由124.4±22.0**h减少到71.3±10.4##h,血清E2含量在第14天由22.47±6.37▲pg/mL到39.57±5.19##▲▲pg/mL,子宫ERα表达OD值由0.036±0.025**升高到0.208±0.072##和PR的表达OD值由0.043±0.023*升高到0.095±0.035#,血浆和子宫组织LM和FN水平降低,血液流变性得以改善。结论:五加生化胶囊具有减少药物流产出血大鼠子宫出血量和出血时间的作用,其作用机制主要为降低了血浆和子宫组织FN的含量,起到使残留的蜕膜组织顺利排出的目的,减少了残留蜕膜对子宫的刺激;提高血清中E2含量和子宫组织中ERα和PR的表达,同时改善了血液流变性,使受损子宫组织局部血液循环得到改善加速了受损子宫的恢复速度。

关键词：五加生化胶囊药物流产出血雌二醇雌激素受体米非司酮

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RP-HPLC-UV法测定清心莲子饮中人参皂苷Re、Rg1、Rb1的含量

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化学工程师 2019年第12期33卷 21-24页

作者：苟鑫宇季宏与刘玉婷逄弓一郎卓小玉田明黑龙江中医药大学教育部北药基础与应用研究重点实验室中药药剂学实验室

目的采用RP-HPLC-UV色谱法同时测定清心莲子饮中人参皂苷Re、Rg1、Rb1的含量影响。方法采用色谱柱:依利特C18柱(Sinochrom ODS-BP,4.6mm×200mm,5μm),流动相采用A为乙腈,B为水,梯度洗脱,流速为1.0mL·min^-1,进样量为10μL,检... 详细信息

目的采用RP-HPLC-UV色谱法同时测定清心莲子饮中人参皂苷Re、Rg1、Rb1的含量影响。方法采用色谱柱:依利特C18柱(Sinochrom ODS-BP,4.6mm×200mm,5μm),流动相采用A为乙腈,B为水,梯度洗脱,流速为1.0mL·min^-1,进样量为10μL,检测波长为203nm,柱温25℃,理论塔板数大于6000。结果在100min内,人参皂苷Re、Rg1、Rb1分离度良好,进样的含量与色谱峰面积具有良好的线性关系,人参皂苷Re、Rg1、Rb1的线性方程分别为:y=0.5752x-0.0961(r=0.9994)、y=1.3157x-0.2006(r=0.9998)、y=0.6637x+0.2091(r=0.9997),人参皂苷Re、Rg1、Rb1的平均加样回收率分别是:101.08%(RSD=1.77%)、99.40%(RSD=2.55%)、100.11%(RSD=2.83%)。结论本文建立的含量测定方法快捷稳定可靠,加样回收率高,适用于清心莲子饮中人参皂苷Re、Rg1、Rb1的含量测定,为清心莲子饮的质量评价提供了理论支持和实验依据。

关键词：清心莲子饮人参皂苷 RP-HPLC-UV

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