检索结果-内蒙古大学图书馆

中国药科大学学报 2016年第1期47卷 19-29页

作者：武维新严佳谭喜莹李博苏梦翔严方狄斌中国药科大学药物分析教研室南京210009 中国药科大学药物质量与安全预警教育部重点实验室南京210009 江苏省中医院临床药学研究室南京210029

蛋白质磷酸化是生物体内重要的翻译后修饰,几乎参与调节着细胞增殖、信号转导、新陈代谢、肿瘤发生等过程在内的所有生命活动。对磷酸化蛋白质组的全面分析可以帮助人们深入了解磷酸化蛋白在生命过程中的作用,协助发现生物标志物,辅助... 详细信息

蛋白质磷酸化是生物体内重要的翻译后修饰,几乎参与调节着细胞增殖、信号转导、新陈代谢、肿瘤发生等过程在内的所有生命活动。对磷酸化蛋白质组的全面分析可以帮助人们深入了解磷酸化蛋白在生命过程中的作用,协助发现生物标志物,辅助疾病的诊疗。然而,磷酸化蛋白丰度低、信号被非磷酸化肽段所掩盖等问题限制了磷酸化蛋白质组学的发展。因此,亟需开发高效的富集策略,如设计新型纳米材料,合并多种分析方法等,以提高检测灵敏度、富集特异性,增大富集容量。本文回顾了近年来磷酸化蛋白质组学研究策略中的富集策略进展及其在疾病研究中的应用。

关键词：磷酸化蛋白质组学富集策略新材料疾病研究

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Fas途径参与大黄酸诱导HK-2细胞凋亡

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中国药科大学学报 2015年第4期46卷 469-475页

作者：孙浩杨加培毛勇王丹丹于锋中国药科大学临床药学教研室药物质量与安全预警教育部重点实验室南京211198

探讨大黄酸对人肾小管上皮细胞系HK-2的毒性作用及毒性作用机制。以Hg Cl2为阳性对照,通过MTT法检测细胞活力,LDH释放实验检测细胞毒性,AnnexinⅤ-FITC/PI双染法检测细胞凋亡率,Real-Time q PCR检测Fas,Fas L,FADD,caspase-3,caspase-8... 详细信息

探讨大黄酸对人肾小管上皮细胞系HK-2的毒性作用及毒性作用机制。以Hg Cl2为阳性对照,通过MTT法检测细胞活力,LDH释放实验检测细胞毒性,AnnexinⅤ-FITC/PI双染法检测细胞凋亡率,Real-Time q PCR检测Fas,Fas L,FADD,caspase-3,caspase-8的mRNA表达,Western blot检测Fas,Fas L,胞浆Cyt-c,caspase-3,caspase-8,caspase-9蛋白表达。实验结果显示:大黄酸可剂量依赖性地抑制HK-2细胞活力,增加LDH释放和细胞凋亡率,使Fas,Fas L,FADD,caspase-3,caspase-8的mRNA表达显著性上调,Fas,Fas L,胞浆Cyt-c蛋白表达量显著升高,caspase-8原型表达显著降低,caspase-3,caspase-8裂解片段表达显著增加,caspae-9表达无变化。结果证明:大黄酸体外对HK-2细胞具有毒性作用,其毒性作用机制可能是通过Fas途径诱导HK-2细胞凋亡。

关键词：大黄酸 HK-2细胞细胞毒性 Fas 凋亡

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大黄酸通过MAPK信号转导通路诱导HK-2细胞凋亡

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中国实验方剂学杂志 2015年第15期21卷 147-151页

作者：杨加培孙浩王丹丹毛勇于锋中国药科大学临床药学教研室药物质量与安全预警教育部重点实验室南京211198

目的:研究大黄酸诱导人肾小管上皮细胞系HK-2细胞凋亡作用及其凋亡机制。方法:将密度为4×104个/m L的HK-2细胞悬液接种于96孔板,培养24 h后分别加入不同浓度大黄酸(0,25,50,100μmol·L-1)作用12,24,48 h,MTT法检测大黄酸对HK-... 详细信息

目的:研究大黄酸诱导人肾小管上皮细胞系HK-2细胞凋亡作用及其凋亡机制。方法:将密度为4×104个/m L的HK-2细胞悬液接种于96孔板,培养24 h后分别加入不同浓度大黄酸(0,25,50,100μmol·L-1)作用12,24,48 h,MTT法检测大黄酸对HK-2细胞活性的抑制作用;利用Hoechst 33258染色法和流式细胞术检测大黄酸诱导HK-2细胞凋亡情况;实时荧光定量PCR(RT-q PCR)检测细胞原癌基因c-jun,活化转录调控因子2(ATF-2),半胱天冬氨酸酶3(Caspase-3)基因表达水平;Western blotting检测细胞磷酸化c-jun氨基末端激酶(p-JNK),c-jun氨基末端激酶(JNK),磷酸化p38丝裂原活化蛋白激酶(p-p38 MAPK),p38丝裂原活化蛋白激酶(p38 MAPK)和活化型半胱天冬氨酸酶3(Cleaved Caspase-3)蛋白的变化,并利用JNK抑制剂SP600125,p38抑制剂SB203580进一步验证JNK和p38所介导的丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号转导通路在HK-2细胞凋亡中的作用。结果:大黄酸能够呈剂量依赖性和时间依赖性抑制HK-2细胞活性。大黄酸作用下HK-2细胞凋亡率明显增加。大黄酸作用于HK-2细胞c-jun,ATF-2及Caspase-3基因的mRNA均明显上调;p-p38,p-JNK及Cleaved Caspase-3蛋白表达显著性增加,JNK和p38总蛋白表达无明显变化。JNK特异性抑制剂SP600125与p38特异性抑制剂SB203580均能显著降低大黄酸诱导的HK-2细胞的凋亡率。结论:大黄酸能够诱导HK-2细胞凋亡,其作用机制可能是通过影响MAPK信号转导通路实现的。

关键词：大黄酸 HK-2细胞细胞凋亡丝裂原活化蛋白激酶信号转导通路 c-jun氨基末端激酶 p38丝裂原活化蛋白激酶

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虎杖指标性成分在高脂大鼠体内药代动力学及组织分布研究

虎杖指标性成分在高脂大鼠体内药代动力学及组织分布研究

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中国化学会第十二届全国分析化学年会

作者：付金凤王敏田媛张尊建宋瑞中国药科大学药物质量与安全预警教育部重点实验室中国药科大学药物质量与安全预警教育部重点实验室中国药科大学药学院药分教研室

实验选取虎杖苷、白藜芦醇、大黄素-1-O-葡萄糖苷、大黄素-8-O-葡萄糖苷及大黄素五种指标性成分,建立了生物样本中上述成分的HPLC-MS/MS 同时定量分析方法,并进行了系统的方法学验证,进而将此方法应用于虎杖在高脂大鼠中的药代动力学及...

实验选取虎杖苷、白藜芦醇、大黄素-1-O-葡萄糖苷、大黄素-8-O-葡萄糖苷及大黄素五种指标性成分,建立了生物样本中上述成分的HPLC-MS/MS 同时定量分析方法,并进行了系统的方法学验证,进而将此方法应用于虎杖在高脂大鼠中的药代动力学及组织分布研究.

关键词：

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评价大鼠离体肝灌流模型稳定性的方法

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中国药科大学学报 2014年第4期45卷 475-479页

作者：丁露杨加培孙浩周旺于锋中国药科大学临床药学教研室药物质量与安全预警教育部重点实验室南京211198

以自建的大鼠原位循环肝灌流模型为研究模型，建立一套实用的模型稳定性评价方法。首先进行一般稳定性评价，包括肉眼观察肝脏形态，监测门脉压、灌流液pH，定时检测灌流液K^＋浓度、丙氨酸转氨酶（ALT）、天冬氨酸氨基转移酶（AST）水... 详细信息

以自建的大鼠原位循环肝灌流模型为研究模型，建立一套实用的模型稳定性评价方法。首先进行一般稳定性评价，包括肉眼观察肝脏形态，监测门脉压、灌流液pH，定时检测灌流液K^＋浓度、丙氨酸转氨酶（ALT）、天冬氨酸氨基转移酶（AST）水平，肝组织病理检查等；要求在整个灌流过程中肝脏色泽均匀，无斑块状改变，以门静脉压始终无骤变，稳定在8—14mmHg范围内，变化不超过0．5mmHg／30min，pH始终处于7．4～7．2。变化不超过0．1／30min，K^＋浓度无突然升高现象，灌流液中ALT、AST水平随时间无显著性变化，肝组织病理检查不出现除空泡性变以外的病变为标准，确定模型可维持稳定的时间。在满足一般稳定性的基础上，根据不同的研究目的对模型进行功能稳定性评估，要求研究所用的指标能在空白灌流组和阳性药灌流组之间体现显著性差异；本研究以药物肝损伤研究为例，以灌流液ALT、AST、LDH（乳酸脱氢酶）水平为指标，并进行肝组织病理检查，结果两组出现极显著性差异，故判定用所建立的灌流模型进行肝损伤研究可真实反映受试药的肝损伤情况，一般不会出现假阴性和假阳性结果。

关键词：肝灌流模型稳定性评价异烟肼肝损伤

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大黄素对K562/ADM细胞阿霉素耐药的抑制作用

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中国药科大学学报 2014年第4期45卷 462-468页

作者：朱雅琪严方狄斌严佳李佳常李运曼中国药科大学药物质量与安全预警教育部重点实验室南京210009 中国药科大学药学医学基础实验中心南京210098 中国药科大学生理学教研室南京210009

探讨大黄素抑制人慢性粒细胞白血病细胞耐阿霉素变异株K562/ADM的药效学及作用机制。以维拉帕米为阳性药,阿霉素为工具药,采用MTT法测定大黄素与阿霉素合用对细胞增殖的抑制作用;使用流式细胞仪考察了大黄素对于阿霉素诱导K562/ADM细胞... 详细信息

探讨大黄素抑制人慢性粒细胞白血病细胞耐阿霉素变异株K562/ADM的药效学及作用机制。以维拉帕米为阳性药,阿霉素为工具药,采用MTT法测定大黄素与阿霉素合用对细胞增殖的抑制作用;使用流式细胞仪考察了大黄素对于阿霉素诱导K562/ADM细胞周期阻滞和凋亡的促进作用;并采用Western blot法检测了大黄素对P-gp、Bcr-Abl和STAT5蛋白表达的影响;进一步通过P-gp单克隆藻红蛋白键合UIC2抗体结合实验探讨了大黄素是否是P-gp的底物。实验结果显示,大黄素与阿霉素合用可显著抑制K562/ADM的增殖,并呈量效关系;可促进阿霉素诱导的K562/ADM细胞G2/M期周期阻滞和细胞凋亡;不同剂量的大黄素可有效抑制P-gp、Bcr-Abl、STAT5蛋白表达及磷酸化;UIC2抗体结合实验结果则表明大黄素可能不是P-gp的底物。因此,大黄素能够在体外有效抑制K562/ADM阿霉素耐药,其机制可能不是通过底物竞争性抑制作用,而是与大黄素直接降低P-gp、Bcr-Abl及STAT5蛋白表达和磷酸化有关。

关键词：大黄素 K562 ADM 耐药抑制 P-gp Bcr-Abl STAT5

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新型联萘酚杂化介孔硅胶的制备及其性能研究

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中国药科大学学报 2014年第5期45卷 557-562页

作者：杨漾钱洁李莉狄斌中国药科大学药物分析教研室南京210009 新疆医科大学药学院乌鲁木齐830011 中国药科大学药物质量与安全预警教育部重点实验室南京210009

利用3-异氰基丙基三乙氧基硅烷（ICPTES）与联萘二酚合成联萘酚单硅酯,首次在酸性条件下利用联萘酚单硅酯与1,2-三乙氧基硅基乙烷（BTSE）作为共同硅源,以阳离子表面活性剂十六烷基三甲基溴化铵（CTAB）和聚环氧乙烷-聚环氧丙烷-聚环氧... 详细信息

利用3-异氰基丙基三乙氧基硅烷（ICPTES）与联萘二酚合成联萘酚单硅酯,首次在酸性条件下利用联萘酚单硅酯与1,2-三乙氧基硅基乙烷（BTSE）作为共同硅源,以阳离子表面活性剂十六烷基三甲基溴化铵（CTAB）和聚环氧乙烷-聚环氧丙烷-聚环氧乙烷三嵌段共聚物P123为共模板剂,合成出粒径3-5μm,平均孔径约5 nm的新型联萘酚杂化介孔硅胶。应用于联萘类衍生物的分离研究,结果显示该固定相机械强度较好,在15 min内对5种联萘类衍生物能够达到基线分离,并且对联萘类衍生物的分离性能优于商品化硅胶柱。

关键词：联萘酚介孔硅胶制备色谱分离

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熵权法在药品不良反应信号筛选及综合风险评价中的应用

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药学进展 2014年第6期38卷 446-449页

作者：韦梦玲廖俊于锋王丹丹杨加培中国药科大学临床药学教研室江苏南京211198 中国药科大学信息管理与信息系统教研室江苏南京211198 中国药科大学药物质量与安全预警教育部重点实验室江苏南京211198

目的:在运用经典方法对药品不良反应信号进行检测后,对信号进行再筛选并评价药品的综合风险。方法:以江苏省药品不良反应监测网络数据库为资料来源,SQLserver为后台数据库,Matlab为算法主要实现工具,运用熵权法结合专家评分,对BCPNN方... 详细信息

目的:在运用经典方法对药品不良反应信号进行检测后,对信号进行再筛选并评价药品的综合风险。方法:以江苏省药品不良反应监测网络数据库为资料来源,SQLserver为后台数据库,Matlab为算法主要实现工具,运用熵权法结合专家评分,对BCPNN方法检测出的信号进行再调整和评级。结果:运用综合权重进行调整后,发现不同药品不良反应信号的强弱发生了一定的变化。其中,氟喹诺酮类药品中的加替沙星导致低血糖、呼吸困难等药品不良反应的风险较信号评级之前有所增加,需要专家在评审时更为留意。结论:将熵权法运用在药品不良反应信号的监测中,可使信号更接近客观筛选和主观判断的平衡值,部分罕发但严重的药品不良反应信号得到发现和重视,并能方便地研究药物引起的多种药品不良反应的综合风险。

关键词：药品不良反应信号熵权法药品不良反应症候群比例失衡法

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探针药物法评价柴胡生品及醋炙品对细胞色素P450酶的影响(英文)

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中国天然药物 2013年第3期11卷 302-308页

作者：成颖黄寅田媛许磊刘国强张尊建中国药科大学药物质量与安全预警教育部重点实验室南京210009 中国人民解放军第四军医大学药学院药剂学教研室西安710032 中国药科大学天然药物活性物质与功能国家重点实验室南京210009

目的:研究柴胡生品及醋炙品对细胞色素P450酶的影响。方法:采用多探针技术,应用高效液相色谱三重四级杆串联质谱(HPLC-MS/MS)测定连续给予7天柴胡生品或醋炙品前后大鼠血浆中相应的探针药物咪达唑仑、奥美拉唑、甲苯磺丁脲、氯唑沙宗、... 详细信息

目的:研究柴胡生品及醋炙品对细胞色素P450酶的影响。方法:采用多探针技术,应用高效液相色谱三重四级杆串联质谱(HPLC-MS/MS)测定连续给予7天柴胡生品或醋炙品前后大鼠血浆中相应的探针药物咪达唑仑、奥美拉唑、甲苯磺丁脲、氯唑沙宗、右美沙芬和咖啡因的浓度及其药代动力学参数。结果:连续7天给予柴胡生品或醋炙品后,咪达唑仑、氯唑沙宗和右美沙芬的血药浓度均显著下降,AUC和T1/2显著减小(P<0.05),清除率增大,而咖啡因的血药浓度无明显变化;连续7天给予柴胡生品后,奥美拉唑的消除明显加快,而连续7天给予柴胡醋炙品正常剂量后,奥美拉唑的代谢无明显变化;连续7天给予柴胡生品高剂量后,甲苯磺丁脲的代谢加快。结论:柴胡生品及醋炙品对CYP2E1、CYP2D6和CYP3A4均产生诱导作用,对CYP1A2不产生诱导作用;柴胡生品及醋炙品对CYP2C9和CYP2C19的影响存在差异,这种差异可能是柴胡经炮制后作用发生变化的原因。

关键词：柴胡醋炙探针药物高效液相色谱-质谱法 CYP450

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固相萃取-高效液相色谱法测定大黄汤中没食子酸、儿茶素和表儿茶素的含量(英文)

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中国天然药物 2012年第4期10卷 275-278页

作者：宋瑞成颖田媛张尊建中国药科大学药物分析教研室南京210009 中国药科大学药物质量与安全预警教育部重点实验室南京210009 中国人民解放军第四军医大学药学系药剂学教研室西安710032

目的:建立大黄汤中没食子酸、儿茶素和表儿茶素的含量测定方法。方法:大黄汤经C18固相萃取小柱预处理后, 采用高效液相色谱法, 以梯度洗脱同时测定大黄汤中没食子酸、儿茶素和表儿茶素的含量, 选用安捷伦 Zorbax SB-C18柱(250 mm ×... 详细信息

目的:建立大黄汤中没食子酸、儿茶素和表儿茶素的含量测定方法。方法:大黄汤经C18固相萃取小柱预处理后, 采用高效液相色谱法, 以梯度洗脱同时测定大黄汤中没食子酸、儿茶素和表儿茶素的含量, 选用安捷伦 Zorbax SB-C18柱(250 mm × 4.6 mm, 5 μm); 检测波长 210 nm; 柱温30 ℃; 流速1mL·min·1。结果:没食子酸、儿茶素、表儿茶素的定量限分别为1.86、2.32 和2.00 μg·mL·1, 没食子酸、儿茶素、表儿茶素分别在 4.66·233、5.80·290、2.00·100 μg·mL·1 时与峰面积线性关系良好,回收率为87.9%·103.0%, 日内及日间精密度的 RSD 分别小于0.12%、2.23%。结论:该方法简单、准确,可用于大黄药材及其制剂质量评价。

关键词：没食子酸儿茶素表儿茶素大黄汤 HPLC测定

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