检索结果-内蒙古大学图书馆

免疫学杂志 2007年第2期23卷 131-134页

作者：谢力肖文珺管洁于虹赵瑞景周育森军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071 河北医科大学免疫学教研室石家庄050017

目的研究SARS冠状病毒(SARS-CoV)靶细胞受体结合区所构建之DNA疫苗的免疫效果,为进一步的SARS-CoV免疫机理研究及疫苗研制奠定基础。方法选取SARS-CoVS基因包含靶细胞受体结合区和S1亚单位C端2个基因片段作为目的基因,构建真核表达质粒p... 详细信息

目的研究SARS冠状病毒(SARS-CoV)靶细胞受体结合区所构建之DNA疫苗的免疫效果,为进一步的SARS-CoV免疫机理研究及疫苗研制奠定基础。方法选取SARS-CoVS基因包含靶细胞受体结合区和S1亚单位C端2个基因片段作为目的基因,构建真核表达质粒pVAX-RBD(receptor binding domain)、pVAX-S1C作为DNA疫苗免疫BALB/c小鼠,检测其特异性体液免疫及细胞免疫情况。结果体液免疫方面,以SARS全病毒裂解产物和原核表达的RBD蛋白作为诊断抗原,用ELISA均可检测到高滴度的小鼠血清抗体IgG的产生。而且,血清中和试验显示pVAX-RBD质粒激发了小鼠保护性中和抗体的产生。通过流式细胞分析和酶联免疫斑点实验(ELISPOT)检测,pVAX-RBD和pVAX-S1C两组质粒均诱导免疫小鼠产生了特异性细胞免疫反应。结论证明SARS-CoVS蛋白受体结合区上中和表位的存在;体液免疫在抗SARS-CoV感染方面起到重要作用。

关键词： SARS冠状病毒 s蛋白受体结合区中和抗体 DNA疫苗

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A型肉毒毒素多表位串联体的设计、表达、纯化及鉴定

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军事医学科学院院刊 2007年第3期31卷 213-217页

作者：贾杨王俊虹高姗康琳王景林军事医学科学院微生物流行病研究所病原与生物安全国家重点实验室北京100071 武警医学院天津300162

目的:设计、表达两个A型肉毒毒素多表位串联体。方法:从文献报道的A型肉毒毒素(botulinum neuro-toxin type A,BoNT/A)的表位及生物信息学方法预测得到的B细胞表位中遴选表位,并加入适当的辅助性元件,设计多表位串联体A、B。对其基因进... 详细信息

目的:设计、表达两个A型肉毒毒素多表位串联体。方法:从文献报道的A型肉毒毒素(botulinum neuro-toxin type A,BoNT/A)的表位及生物信息学方法预测得到的B细胞表位中遴选表位,并加入适当的辅助性元件,设计多表位串联体A、B。对其基因进行优化后,经重叠PCR方法合成串联体A、B的全长基因。分别插入原核表达载体pQE-30,再转化***15[pREP4]感受态细胞中进行诱导表达,以金属螯合亲和层析法纯化重组蛋白,并进行鉴定。结果与结论:成功设计并构建了两个多表位串联体A、B,并在***中以包涵体形式获得高效表达。Ni-NTA法纯化后分别获得纯度大于92.2%、99%的重组串联体A、B蛋白,并经透析复性法复性。Western印迹和间接ELISA显示纯化、复性后的重组蛋白与抗天然BoNT/A马血清有特异性结合反应。

关键词：肉毒毒素A 多表位串联体重叠PCR

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保加利亚乳杆菌高密度培养的初步研究

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食品与发酵工业 2007年第10期33卷 46-49页

作者：王奎明王昌禄陈铁涛张虎成杨秀旭曹晓梅陈薇天津科技大学食品工程与生物技术学院天津市食品营养与安全重点实验室天津300457 军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071

对培养保加利亚乳杆菌的基础培养基进行优选,确定为基础MRS培养基。然后优化培养条件:发酵时间为12h,起始pH为6.4,发酵温度为37℃。培养基:MRS培养基+7.5%番茄汁+12%麦芽汁+5%海带汁+ 2%乳清。通过正交试验证明,保加利亚乳杆菌菌体浓度... 详细信息

对培养保加利亚乳杆菌的基础培养基进行优选,确定为基础MRS培养基。然后优化培养条件:发酵时间为12h,起始pH为6.4,发酵温度为37℃。培养基:MRS培养基+7.5%番茄汁+12%麦芽汁+5%海带汁+ 2%乳清。通过正交试验证明,保加利亚乳杆菌菌体浓度可达到1.0×10^(12) cfu/mL。

关键词：保加利亚乳杆菌发酵剂高密度培养

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F1-V重组亚单位疫苗对鼠疫耶尔森氏菌141强毒株皮下攻毒保护性的研究

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中国科学（C辑） 2007年第3期37卷 320-324页

作者：王栋贾暖李鹏邢丽王希良军事医学科学院微生物流行病研究所免疫室病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071 第二军医大学药学院药物分析教研室上海200433

在此实验中，设计了一种包含2种成分的重组融合蛋白作为疫苗成分来防护鼠疫耶尔森氏菌（Yersinia）可能产生的生物威胁．重组F1-V蛋白与铝佐剂结合，分别以10，20，50μg剂量免疫BALB／C小鼠，周期为2个月．检测小鼠血清抗体水平和T辅... 详细信息

在此实验中，设计了一种包含2种成分的重组融合蛋白作为疫苗成分来防护鼠疫耶尔森氏菌（Yersinia）可能产生的生物威胁．重组F1-V蛋白与铝佐剂结合，分别以10，20，50μg剂量免疫BALB／C小鼠，周期为2个月．检测小鼠血清抗体水平和T辅助细胞的亚型．免疫后小鼠以25～600LD50剂量的鼠疫耶尔森氏菌141强毒株进行皮下攻毒实验．结果证明，F1—V重组蛋白在小鼠体内诱导产生足够保护的免疫应答．血清IgG水平是产生最终保护力的一个重要因素．20μg的免疫剂量可以诱导血清抗体效价高达51200，使小鼠对400LD50的鼠疫耶尔森氏菌产生100％的保护．F1—V重组蛋白引发的抗体亚型主要为IgG1类，说明抗体反应趋向Th2型反应．流式细胞分析表明，铝佐剂主要帮助F1—V重组融合蛋白诱导强烈的体液免疫而不是CTL细胞免疫应答．表明F1—V重组亚单位疫苗株有希望成为一种新型的鼠疫疫苗候选株．

关键词：耶尔森氏菌(Yersinia) F1-V融合蛋白攻毒亚单位疫苗

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中国贝蠓名表及其二新种描述(双翅目:蠓科)

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四川动物 2007年第3期26卷 487-489页

作者：虞以新陈家龙陈汝达梁志华潘耀南北京流行病微生物研究所病原生物安全国家重点实验室北京100071 香港特特别行政区食物环境卫生署

本文列出了我国已知贝蠓的名表,并描述了发现于香港的贝蠓属2新种:大潭贝蠓新种Bezzia datana Yu,Chen and Liang ***.和鹿颈贝蠓Bezzia lujingi Yu,Chen and Pan ***.

关键词：贝蠓新种

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用反向遗传技术产生冷适应致弱的重组A型人流感病毒的研究

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免疫学杂志 2007年第3期23卷 335-338页

作者：杨鹏辉颜艳罗德炎邢丽刘秀梵王希良军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071 扬州大学农业部畜禽传染病学重点开放实验室江苏扬州225009

目的以鸡胚高度适应株A/PR/8/34株为重组流感病毒骨架,利用反向遗传技术拯救冷适应致弱的重组A型人流感病毒。方法对冷适应、温度敏感、减毒的A/Ann Arbor/6/60(H2N2)流感病毒株的PB2基因片段,进行了全基因序列合成,同时人工引入PB2265(... 详细信息

目的以鸡胚高度适应株A/PR/8/34株为重组流感病毒骨架,利用反向遗传技术拯救冷适应致弱的重组A型人流感病毒。方法对冷适应、温度敏感、减毒的A/Ann Arbor/6/60(H2N2)流感病毒株的PB2基因片段,进行了全基因序列合成,同时人工引入PB2265(N265S)氨基酸的突变。PB2基因片段通过与改造后的转录/表达载体pAD3000连接,构建PB2基因的拯救载体。该重组质粒与PR8进行“7+1”组合的病毒拯救,共转染COS-1细胞。结果经测序获得序列准确的拯救质粒pMDV-A-PB2,利用反向遗传技术成功拯救出了具有血凝性(1×25)的冷适应的重组A型流感病毒。结论利用反向遗传技术成功拯救冷适应致弱的重组A型人流感病毒,该系统为深入研究甲型人流感病毒的基因功能和新型疫苗研发奠定了基础。

关键词：流感病毒反向遗传技术 cDNA 重组病毒

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以减毒沙门菌为载体布鲁氏菌DNA疫苗的构建及免疫原性分析

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免疫学杂志 2007年第5期23卷 486-490页

作者：周丽丽姚碧涛罗德炎焦新安刘秀梵王希良军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071 扬州大学农业部畜禽传染病学重点开放实验室江苏扬州225009

目的构建携带布鲁氏菌BLS-L7/L12融合基因的重组减毒沙门菌并进行免疫原性分析,为口服布鲁氏菌DNA疫苗研究奠定基础。方法将BLS-7/L12融合基因克隆到真核表达载体asd+-pVAX1,依次将重组质粒转化减毒沙门菌X3730、X4550得到重组沙门菌X45... 详细信息

目的构建携带布鲁氏菌BLS-L7/L12融合基因的重组减毒沙门菌并进行免疫原性分析,为口服布鲁氏菌DNA疫苗研究奠定基础。方法将BLS-7/L12融合基因克隆到真核表达载体asd+-pVAX1,依次将重组质粒转化减毒沙门菌X3730、X4550得到重组沙门菌X4550(asd+-pVAX1-BLS-L7/L12)。以1×109CFU/只的剂量口服免疫Balb/C小鼠,3次免疫后进行免疫效果的评价。结果构建的重组减毒沙门菌质粒转染COS-7细胞经免疫组化和Western-blot试验证明BLS-L7/L12融合蛋白在细胞中得到了瞬时表达,ELISA检测到免疫小鼠血清和肠黏液中有特异性抗体IgG和sIgA产生。通过淋巴细胞增殖实验、细胞因子和CD分子测定表明DNA疫苗以诱发Th1型免疫为主。结论所构建的以重组沙门菌为载体口服布鲁氏菌DNA疫苗具有诱导特异性细胞免疫和体液免疫应答的能力,且以细胞免疫应答为主。可作为潜在的布鲁氏菌新型疫苗。

关键词：布鲁氏菌 BLS-L7/L12 DNA疫苗伤寒沙门菌平衡致死系统

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香港铗蠓三新种(双翅目,蠓科)

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动物分类学报 2007年第2期32卷 486-489页

作者：虞以新梁美谊陈家龙何臻敏苏柏荣军事医学科学院微生物流行病研究所病原生物安全国家重点实验室北京100071 香港特区食物环境卫生署

记述了香港地区铗蠓属Forcipomyia18种,描述了袁氏铗蠓Forcipomyia yuani Yu,Su et Chen,***.,南生铗蠓Forcipomyia nanshengwei Yu,Liang et Su,***.和逢吉铗蠓Forcipomyia fengjiensis Yu,Chen et He,***.3新种。新种模式标本保存在... 详细信息

关键词：双翅目蠓科铗蠓属新种

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我国霍乱弧菌的脂肪酸分型研究

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中国生物工程杂志 2007年第6期27卷 15-21页

作者：王瑞白刘海洪邱海燕宋亚军杨瑞馥阚飙中国疾病预防控制中心传染病预防控制所传染病预防控制国家重点实验室北京102206 军事医学科学院微生物流行病学研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071

目的:对脂肪酸分型方法在霍乱弧菌菌株鉴定、菌株相似性分析等方面的应用价值进行评价。方法:选取了分离自我国的两个主要致病血清群的194株霍乱弧菌菌株(1961年以来的ElTor型和1992年以来的O139群),提取脂肪酸,应用MIDI公司的脂肪酸分... 详细信息

目的:对脂肪酸分型方法在霍乱弧菌菌株鉴定、菌株相似性分析等方面的应用价值进行评价。方法:选取了分离自我国的两个主要致病血清群的194株霍乱弧菌菌株(1961年以来的ElTor型和1992年以来的O139群),提取脂肪酸,应用MIDI公司的脂肪酸分型系统,进行数据分析。结果:检测的所有菌株都含有的脂肪酸成分有13种。霍乱弧菌的判断符合率为88.6%。二维聚类分析没有成明显可区分的群,O139群霍乱弧菌的脂肪酸组成与O1群的相似,产毒与非产毒霍乱弧菌的脂肪酸成分没有显著差异。结论脂肪酸分型对弧菌种的快速鉴定有应用价值,对霍乱弧菌的现场分离鉴定有辅助意义,在小样本暴发资料的研究中能够反映菌株之间的亲缘关系,但其对霍乱弧菌种属内的各种特征性菌群不具有鉴别能力。

关键词：霍乱弧菌脂肪酸分型

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乳酸菌食品级基因表达系统

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安徽农业科学 2007年第33期35卷 10619-10621页

作者：王奎明王昌禄陈铁涛张虎成陈薇天津科技大学食品工程与生物技术学院天津市食品营养与安全重点实验室天津300457 军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071

乳酸菌是一类重要工业菌株,随着其遗传学和分子生物学研究取得长足进展,乳酸菌食品级表达系统作为高效表达系统日益受到重视。该表达系统和其他细菌表达系统相比有很多优点。介绍了糖诱导表达系统、噬菌体ф31爆发式诱导的表达系统、乳... 详细信息

乳酸菌是一类重要工业菌株,随着其遗传学和分子生物学研究取得长足进展,乳酸菌食品级表达系统作为高效表达系统日益受到重视。该表达系统和其他细菌表达系统相比有很多优点。介绍了糖诱导表达系统、噬菌体ф31爆发式诱导的表达系统、乳链球菌素调控表达系统、温控表达系统等的研究进展以及这些系统的应用前景。

关键词：乳酸菌食品级表达系统

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