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油菜(Brassica napus L.)种子脱水耐性获得过程中肌醇半乳糖苷合成酶活性与可溶性糖含量的变化

植物生理学报 2011年第12期47卷 1173-1180页

作者：李煦汪晓峰北京林业大学林木育种国家工程实验室林木花卉遗传育种教育部重点实验室北京100083

在这个研究中测量不同发育时期的油菜种子中可溶性糖含量与肌醇半乳糖苷合成酶(galactinol synthase,GOLS)活性,将二者的变化趋势与种子脱水耐性获得的过程相比较并对结果进行相关性分析。结果显示油菜种子脱水耐性获得过程中,葡萄糖和... 详细信息

在这个研究中测量不同发育时期的油菜种子中可溶性糖含量与肌醇半乳糖苷合成酶(galactinol synthase,GOLS)活性,将二者的变化趋势与种子脱水耐性获得的过程相比较并对结果进行相关性分析。结果显示油菜种子脱水耐性获得过程中,葡萄糖和果糖含量均随着发育期的延长而下降,蔗糖则保持较高水平;肌醇含量下降而肌醇半乳糖苷含量上升;棉子糖系列寡糖(raffinose familyolig osaccharides,RFO)含量随着种子发育而上升,特别是水苏糖,在成熟种子中可以达到相当高的浓度。油菜种子发育中期,细胞内GOLS活性开始上升,至贮藏物积累完成时达到最大。GOLS活性变化与种子肌醇半乳糖苷积累速度、RFO含量及种子的脱水耐性呈一定的正相关关系。我们认为GOLS促使RFO积累,从而对种子脱水耐性的获得产生重要影响。

关键词：脱水耐性棉子糖系列寡糖肌醇半乳糖苷合成酶甘蓝型油菜

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果实裂果影响因子研究进展

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华中农业大学学报 2010年第6期29卷 798-804页

作者：马雯彦庞晓明续九如李颖岳北京林业大学林木育种国家工程实验室/林木花卉遗传育种教育部重点实验室北京100083

裂果是一类生理性病害,果实开裂后既影响外观,又容易受到病菌的侵染出现浆烂果,果实商品价值严重降低并造成重大经济损失。笔者从果实的表型特征、遗传因素、生理特性、矿质元素、环境、植物生长调节剂、栽培措施等方面对裂果的影响因... 详细信息

裂果是一类生理性病害,果实开裂后既影响外观,又容易受到病菌的侵染出现浆烂果,果实商品价值严重降低并造成重大经济损失。笔者从果实的表型特征、遗传因素、生理特性、矿质元素、环境、植物生长调节剂、栽培措施等方面对裂果的影响因子进行了分析,并就今后研究的方向进行了讨论。

关键词：裂果角质膜水分导度膨压

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杨树热激转录因子HsfAld的克隆、表达及单核苷酸多态性分析

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林业科学 2011年第7期47卷 82-90页

作者：赵杏郭琦陈清清李百炼张德强北京林业大学林木育种国家工程实验室林木花卉遗传育种教育部重点实验室北京100083

利用RT-PCR方法,首次由小叶杨受热激胁迫后构建的cDNA文库中扩增获得一热激转录因子HsfAldcDNA克隆,测序结果表明克隆的PsHsfAld cDNA片段总长为2 036 bp,基因内部含有完整的开放阅读框架,大小为1 449 bp,可编码长度为482个氨基酸残基... 详细信息

利用RT-PCR方法,首次由小叶杨受热激胁迫后构建的cDNA文库中扩增获得一热激转录因子HsfAldcDNA克隆,测序结果表明克隆的PsHsfAld cDNA片段总长为2 036 bp,基因内部含有完整的开放阅读框架,大小为1 449 bp,可编码长度为482个氨基酸残基的蛋白质,所推导的蛋白质氨基酸序列在HSF DBD结构功能域与拟南芥AtHsfAld和水稻OsHsfAl蛋白的相似性分别为86.3%和87.4%.组织特异性Realtime-PCR结果显示,Ps HsfAld主要在杨树叶片和根部组织中高丰度表达.非生物胁迫、激素及糖诱导表达表明,PsHsfAld不仅受高温、干旱与盐诱导表达,还受到激素中GA3与ABA,及葡萄糖与蔗糖信号的上调表达.组合利用MEGA4.0和DnaSP4.50.7软件对小叶杨36株基因型个体的PsHsfAld序列进行比对和分析,共检测到207个单核苷酸多态性(SNP)位点,SNP频率为1/16 bp,多样性指数π为0.007 72.在编码区域,共检测到69个SNP位点,其中37个为同义突变,31个为错义突变,1个为无义突变；非同义突变与同义突变的比率0.132＜1,推测在小叶杨物种演化过程中,纯化选择是该基因内同义SNP位点主要的进化驱动力.

关键词：小叶杨 HsfAld基因热胁迫诱导表达单核苷酸多样性

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毛白杨labA-like1基因的克隆与表达特性及其表达载体的构建

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北京林业大学学报 2011年第4期33卷 55-62页

作者：刘军梅李昊崔东清叶梅霞张志毅安新民北京林业大学林木育种国家工程实验室、林木花卉遗传育种教育部重点实验室、国家林业局树木花卉育种与生物工程重点开放实验室北京市100083

利用滤纸吸附噬菌体--PCR法,从毛白杨花芽cDNA文库中分离克隆了PtlabA-like1基因cDNA全长序列。在ConservedDomainsDatabase(CDD)中对该基因氨基酸保守结构域进行分析,发现其包含一个LabA-likesuperfamily结构域,故将其命名为PtlabA-like1。经BLAST分析,在毛果杨基因组数据库中检索到含有该保守结构域的其他9个家族成员。运用BioEdit和MEGA3.1软件,绘制了该基因家族表达蛋白的系统进化树。通过RT-PCR分析,揭示了该基因及其他家族成员在毛白杨中的组织差异表达模式:PtlabA-like1、PtlabA-like6呈现相似的组织表达模式,在茎、幼叶、成熟叶和雌雄花芽组织中均表达,但PtlabA-like1表达丰度较高;PtlabA-like8只在根部表达,且表达丰度较低;其他成员在根、茎、成熟叶、幼叶和雌雄花芽组织中均有表达,但是不同成员的表达丰度存在一定的差异。为进一步研究该基因的功能,构建了该基因的正义表达载体。

关键词：毛白杨 labA—like 克隆表达

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植物端粒与端粒酶研究进展

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北京林业大学学报 2010年第5期32卷 163-167页

作者：刘頔宋涵李凤兰陆海北京林业大学林木育种国家工程实验室林木花卉遗传育种教育部重点实验室国家林业局树木花卉育种与生物工程重点开放实验室

端粒是位于真核生物染色体末端的DNA序列,而端粒酶具有修复延伸端粒的功能,端粒和端粒酶对于维持真核生物染色体的完整性至关重要。在参阅了大量文献资料的基础上,结合课题组的研究工作,对国内外关于端粒、端粒酶的研究进展情况予以汇总... 详细信息

端粒是位于真核生物染色体末端的DNA序列,而端粒酶具有修复延伸端粒的功能,端粒和端粒酶对于维持真核生物染色体的完整性至关重要。在参阅了大量文献资料的基础上,结合课题组的研究工作,对国内外关于端粒、端粒酶的研究进展情况予以汇总,特别突出端粒、端粒酶在植物生长发育中的调控作用,为人类更好地了解和开展有关端粒和端粒酶的研究工作提供借鉴。

关键词：端粒端粒酶植物

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外源突变基因AGM3过表达对烟草开花的抑制和花器官发育的影响

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中国生物工程杂志 2011年第6期31卷 49-57页

作者：曹冠琳安新民龙萃薄文浩张志毅北京林业大学林木育种国家工程实验室林木花卉遗传育种教育部重点实验室北京100083

为了解AGM3基因在异源植物中对开花及花器官发育的影响,采用农杆菌介导法将dominant negative mutation(DNM)结构基因35S-AGM3-E9导入烟草(Nicotianatabacum),经PCR和Southern检测获得了一批阳性转化植株。荧光定量分析结果显示,AGM3在... 详细信息

为了解AGM3基因在异源植物中对开花及花器官发育的影响,采用农杆菌介导法将dominant negative mutation(DNM)结构基因35S-AGM3-E9导入烟草(Nicotianatabacum),经PCR和Southern检测获得了一批阳性转化植株。荧光定量分析结果显示,AGM3在各个转基因株系中均有表达,且不同株系间表达量差异极显著。调查结果分析表明:与野生型植株相比,46.7%的转基因株系未成花,33.3%的转基因株系开花时间平均推迟29.7天,20%的转基因株系开花时期与野生型相同。对花器官形态的观察发现,转基因烟草出现花萼数目减少、花冠产生深裂、花瓣和雄蕊形状改变、雄蕊数目增多或减少等变异。这些研究结果表明35S-AGM3-E9有效地抑制了花的发育,为利用转基因手段获得不育材料的研究奠定了基础。

关键词： AGM3 Dominant negative mutation抑制开花花器官发育烟草

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甘蓝型油菜水苏糖合成酶基因克隆及表达分析

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西北植物学报 2012年第3期32卷 439-446页

作者：丁可汪晓峰北京林业大学林木育种国家工程实验室林木花卉遗传育种教育部重点实验室北京100083

以甘蓝型油菜品种‘德油5号’为试材,采用RT-PCR和RACE方法首次从油菜中获得水苏糖合成酶基因cDNA全长序列,命名为BnSTS,GenBank登录号为HQ285880.1。该cDNA全长3 210bp,包含一个长为2 619bp的开放阅读框,编码873个氨基酸。通过构建原... 详细信息

以甘蓝型油菜品种‘德油5号’为试材,采用RT-PCR和RACE方法首次从油菜中获得水苏糖合成酶基因cDNA全长序列,命名为BnSTS,GenBank登录号为HQ285880.1。该cDNA全长3 210bp,包含一个长为2 619bp的开放阅读框,编码873个氨基酸。通过构建原核表达载体,成功表达出预期蛋白。同源性比对结果显示,该基因编码蛋白与拟南芥STS相似性最高为82.08%。荧光定量PCR结果显示,基因表达水平与油菜种子发育过程中水苏糖含量变化具有相关性,与种子脱水耐性的获得具有时间一致性。该基因可能在种子脱水耐性形成机制中具有一定的作用。

关键词：甘蓝型油菜水苏糖合成酶基因克隆表达分析

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适宜多基因型青杨杂种叶片再生体系建立

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核农学报 2014年第6期28卷 978-984页

作者：李媛黄振王沛琦李赟康向阳北京林业大学林木育种国家工程实验室/林木花卉遗传育种教育部重点实验室北京100083

以青杨杂种全同胞家系内30个基因型的叶片为外植体,研究培养基、基因型及基因型×培养基互作效应对青杨杂种叶片分化的影响,筛选适合多基因型青杨叶片分化的广谱型培养基,为对青杨从群体水平进行遗传转化和多倍体诱导奠定技术基础... 详细信息

以青杨杂种全同胞家系内30个基因型的叶片为外植体,研究培养基、基因型及基因型×培养基互作效应对青杨杂种叶片分化的影响,筛选适合多基因型青杨叶片分化的广谱型培养基,为对青杨从群体水平进行遗传转化和多倍体诱导奠定技术基础。研究结果表明:(1)基因型、培养基、基因型×培养基互作效应对青杨杂种叶片分化的影响极显著。(2)筛选出适合多基因型叶片分化的广谱型培养基为MS+6-BA0.4 mg·L-1+NAA 0.05 mg·L-1,可满足56.7%的青杨杂种基因型叶片分化,分化率可达70%以上。研究认为:在对群体再生生产中,应充分利用基因型×培养基互作效应,通过广谱型培养基实现大多数基因型青杨杂种叶片分化体系建立,并通过特殊培养基解决特殊基因型的青杨杂种叶片分化体系建立问题。

关键词：青杨杂种多基因型叶片分化培养基

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植物基因组拷贝数变异研究现状

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分子植物育种 2015年第8期13卷 1895-1910页

作者：杨海娇张德强北京林业大学林木花卉遗传育种教育部重点实验室林木育种国家工程实验室北京100083

拷贝数变异(copy number variations,CNVs)是基因组重排引起大于1 kb DNA片段的获得或丢失而造成的结构变异。其最初在人类基因组中发现,与许多复杂性疾病相关,常被用于人类疾病的预防与临床诊断。CNVs也于植物基因组中广泛存在,如拟南... 详细信息

拷贝数变异(copy number variations,CNVs)是基因组重排引起大于1 kb DNA片段的获得或丢失而造成的结构变异。其最初在人类基因组中发现,与许多复杂性疾病相关,常被用于人类疾病的预防与临床诊断。CNVs也于植物基因组中广泛存在,如拟南芥、水稻、玉米、大豆、小麦、黄瓜等,目前研究表明:CNVs呈不均匀方式分布在染色体上,且与染色体长度无相关性;位于CNVs区域内的基因,或与CNVs重叠的基因多与细胞死亡、防御反应、生物和非生物逆境胁迫响应等特异生物功能密切相关;CNVs自身的缺失或获得可以改变基因剂量和基因表达,可引起植株高度、开花时间与种子休眠等重要表型性状的变异。在此基础上,本文对CNVs在群体遗传变异、全基因组关联分析以及未来可能在林木遗传研究中的应用进行了展望。

关键词：拷贝数变异全基因组表型

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高温诱导银白杨花粉染色体加倍研究

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核农学报 2010年第6期24卷 1158-1165页

作者：张磊王君索玉静康向阳北京林业大学林木育种国家工程实验室/林木花卉遗传育种教育部重点实验室北京100083

以银白杨为试验材料,在掌握小孢子母细胞减数分裂规律的基础上采用高温处理诱导花粉染色体加倍,对不同处理温度和处理持续时间在不同减数分裂时期的诱导效果进行了研究。结果表明:温室水培条件下,银白杨完成小孢子母细胞减数分裂大约需3... 详细信息

以银白杨为试验材料,在掌握小孢子母细胞减数分裂规律的基础上采用高温处理诱导花粉染色体加倍,对不同处理温度和处理持续时间在不同减数分裂时期的诱导效果进行了研究。结果表明:温室水培条件下,银白杨完成小孢子母细胞减数分裂大约需3～4d,不同时期和花药颜色变化有相关性;高温诱导银白杨2n花粉的最佳时期是中期Ⅰ,处理条件为36℃持续4h,最高2n花粉百分率39.6%,平均2n花粉百分率32.75%。高温处理后导致银白杨散粉延迟,相对于同一环境条件下的正常花芽散粉晚大约2～3d,且花粉量很少。

关键词：银白杨减数分裂高温花粉染色体加倍 2n花粉

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