检索结果-内蒙古大学图书馆

现代生物医学进展 2012年第34期12卷 6624-6627页

作者：郭文东郑倩倩朱亚勤中国医科大学基础医学院细胞生物学教研室教育部医学细胞生物学重点实验室细胞病理生物学研究室辽宁沈阳110001

目的:构建重组原核表达载体pGEX-5x-1-p65,诱导GST-p65融合蛋白的表达并观察其包涵体的显微结构。方法:应用PCR技术扩增得到p65全长序列,并亚克隆至带有GST标签的pGEX-5x-1载体中。经酶切、测序鉴定后,在原核细胞中诱导表达GST-p65融合... 详细信息

目的:构建重组原核表达载体pGEX-5x-1-p65,诱导GST-p65融合蛋白的表达并观察其包涵体的显微结构。方法:应用PCR技术扩增得到p65全长序列,并亚克隆至带有GST标签的pGEX-5x-1载体中。经酶切、测序鉴定后,在原核细胞中诱导表达GST-p65融合蛋白并将诱导后的菌体制作透射电镜标本,观察菌体内部显微结构。结果:成功构建表达载体pGEX-5x-1-p65,原核细胞中诱导表达、凝胶电泳后未见可溶性融合蛋白的高效表达。透射电镜观察到在承载有重组载体的菌体内部出现大量高电子密度的包涵体。结论:成功构建了原核表达载体pGEX-5x-1-p65,电子显微镜观察并证实在原核细胞内p65蛋白诱导表达形成包涵体。

关键词： p65 透射电镜包涵体

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激发兴趣,优化医学生物化学教学效果

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基础医学教育 2012年第9期14卷 659-660页

作者：张宇雯高旭哈尔滨医科大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室哈尔滨150081

生物化学是医学院校的重要基础课。在生物化学教学过程中采用讲好绪论课、讲课举例、故事教学、优化多媒体课件内容、组织课堂讨论等多种方法和策略,激发学生的学习兴趣,提高内在的学习动力,有效调动学习积极性和主动性,从而提高教学效... 详细信息

生物化学是医学院校的重要基础课。在生物化学教学过程中采用讲好绪论课、讲课举例、故事教学、优化多媒体课件内容、组织课堂讨论等多种方法和策略,激发学生的学习兴趣,提高内在的学习动力,有效调动学习积极性和主动性,从而提高教学效果,达到教学目的。

关键词：医学生物化学教学方法学习兴趣教学效果

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hLKB1基因重组质粒构建及蛋白表达和定位

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解剖科学进展 2012年第4期18卷 320-322页

作者：解晓晨郭启强池志宏中国医科大学基础医学院病理生理教研室辽宁沈阳110001 中国医科大学基础医学院细胞生物学教研室辽宁沈阳110001

目的构建hLKB1真核表达载体,证实融合蛋白在胃癌细胞内的表达及定位。方法提取胃正常黏膜上皮细胞GES-1的总mRNA并进行反转录。以反转录的cDNA为模板PCR扩增hLKB1全长编码基因,克隆至pCDNA3.1/flag的真核表达载体中。将构建的重组质粒... 详细信息

目的构建hLKB1真核表达载体,证实融合蛋白在胃癌细胞内的表达及定位。方法提取胃正常黏膜上皮细胞GES-1的总mRNA并进行反转录。以反转录的cDNA为模板PCR扩增hLKB1全长编码基因,克隆至pCDNA3.1/flag的真核表达载体中。将构建的重组质粒测序并转染到胃癌SGC-7901细胞中,分别利用Western blot和激光共聚焦扫描显微技术检测其表达和在胃癌细胞中的定位。结果 hLKB1全长基因序列克隆到真核表达载体中,酶切鉴定片段为1300bp。Western blot检测到真核转染的Flag-hLKB1在胃癌SGC-7901细胞表达,条带约为50kD,免疫荧光显示蛋白广泛定位于细胞质和细胞核内。结论成功构建了hLKB1基因真核表达载体,并验证其在胃癌细胞表达。

关键词： LKB1基因融合蛋白蛋白质印迹免疫荧光胃癌SGC-7901

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Akt重组腺病毒载体的构建及其对肝癌细胞生存的影响

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第二军医大学学报 2012年第3期33卷 332-335页

作者：陈可和韩泽龙李建军潘金飞刘安玲广西壮族自治区人民医院临床肿瘤中心肝胆腺体外科南宁530021 南方医科大学基础医学院细胞生物学教研室广州510515 解放军总政治部机关门诊部保健科北京100120

目的构建携带Akt基因的重组腺病毒载体,初步研究其对肝癌细胞生存的影响。方法分别将Akt-wt及Akt-dn基因亚克隆至穿梭质粒pacAd5 CMVK-NpA,采用RAPAd○RCMV腺病毒表达系统构建重组腺病毒并用PCR鉴定,以蛋白质印迹检测Akt及其下游GSK3β... 详细信息

目的构建携带Akt基因的重组腺病毒载体,初步研究其对肝癌细胞生存的影响。方法分别将Akt-wt及Akt-dn基因亚克隆至穿梭质粒pacAd5 CMVK-NpA,采用RAPAd○RCMV腺病毒表达系统构建重组腺病毒并用PCR鉴定,以蛋白质印迹检测Akt及其下游GSK3β、p-GSK3β的表达,后将Akt重组腺病毒感染肝癌SK-HEP-1细胞,检测血清饥饿24h后细胞存活情况。结果酶切pacAd5 CMV-Akt-wt和pacAd5 CMV-Akt-dn均获得大小为6 kb和1.44 kb(Akt)的两个片段。PCR扩增得到1.44 kb左右的条带。蛋白质印迹结果显示两组中p-GSK3β表达有明显差别,肝癌SK-HEP-1细胞存活率在感染pacAd5 CMV-Akt-dn组较感染Akt-wt腺病毒组明显降低。结论成功构建了Akt-wt及Akt-dn基因重组腺病毒载体,并初步发现其有促进肝癌细胞死亡作用,为体内外进一步研究Akt基因及其相关信号通路在肝癌发生发展中的作用奠定了基础。

关键词： Akt 腺病毒 SK-HEP-1细胞肝细胞癌

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双歧杆菌表达重组人GrB-VRB融合蛋白诱导KDR阳性细胞凋亡

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南方医科大学学报 2012年第7期32卷 1059-1063页

作者：陈蕾曾位森郑航南方医科大学南方医院肿瘤科广东广州510515 南方医科大学基础医学院细胞生物学教研室广东广州510515

目的在双歧杆菌中表达重组人颗粒酶B-血管内皮生长因子结合肽（GrB-VRB）融合蛋白并研究其对血管内皮生长因子受体I（IKDR）阳性细胞的作用。方法采用电穿孔法将重组表达载体转入双歧杆菌，以ELISA和免疫印迹鉴定表达产物，以细胞增... 详细信息

目的在双歧杆菌中表达重组人颗粒酶B-血管内皮生长因子结合肽（GrB-VRB）融合蛋白并研究其对血管内皮生长因子受体I（IKDR）阳性细胞的作用。方法采用电穿孔法将重组表达载体转入双歧杆菌，以ELISA和免疫印迹鉴定表达产物，以细胞增殖试验和TUNEL法分析其对KDR阳性细胞的影响。结果工程化化双歧杆菌培养物的上清和菌体中均有重组产物，重组人GrB-VRB能有效抑制KDR阳性如人脐静脉血管内皮细胞株HUVEC、小鼠结肠癌细胞株CT-26细胞增殖、细胞死亡，这种死亡的机制是细胞凋亡；但对KDR阴性细胞则无这些作用。结论工程化双歧杆菌能分泌性表达重组GrB-VRB融合蛋白，其在VRB的靶向作用下，GrB可有效地诱导KDR阳性细胞凋亡。

关键词：颗粒酶B 血管内皮生长因子受体结合肽双歧杆菌细胞凋亡

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hLMO3基因全长及截短序列原核表达载体的构建及蛋白诱导表达

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解剖科学进展 2012年第1期18卷 8-11页

作者：刘彤顾卉李洋李丰中国医科大学基础医学院细胞生物教研室教育部医学细胞生物学重点实验室沈阳110001 中国医科大学附属盛京医院中心实验室沈阳110001

目的构建hLMO3原核全长及5个截短表达载体并鉴定融合蛋白的表达。方法提取工具细胞HEK293的mRNA,反转录为cDNA,PCR扩增hLMO3全长及截短编码基因,亚克隆至GST融合表达载体pGEX-5X-2中。在*** BL21中诱导GST-hLMO3全长及截短融合蛋白表达... 详细信息

目的构建hLMO3原核全长及5个截短表达载体并鉴定融合蛋白的表达。方法提取工具细胞HEK293的mRNA,反转录为cDNA,PCR扩增hLMO3全长及截短编码基因,亚克隆至GST融合表达载体pGEX-5X-2中。在*** BL21中诱导GST-hLMO3全长及截短融合蛋白表达,并经免疫印迹鉴定结果。结果 hLMO3全长及5个截短基因序列克隆到了原核表达载体pGEX-5X-2中,并经测序鉴定正确。Westernblot在*** Bl21中检测到了相应融合蛋白的表达。结论成功构建hLMO3全长及5个截短基因序列原核表达载体,在*** BL21中诱导表达出GST-LMO3全长及截短融合蛋白。

关键词： hLMO3 工具细胞HEK293 原核表达截短蛋白

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大鼠不同节段远端结肠黏膜对多巴胺的不同反应

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胃肠病学和肝病学杂志 2012年第10期21卷 944-947页

作者：张桂红赵文超朱进霞钟耀华陈小章郑州大学医学院生理学教研室河南郑州450001 首都医科大学基础医学院生理学教研室香港中文大学上皮细胞生物学研究中心

目的比较多巴胺在大鼠不同节段远端结肠黏膜上引起的离子转运变化。方法剥离健康成年SD大鼠不同节段远端结肠黏膜,运用短路电流技术研究多巴胺对黏膜离子转运的影响。结果黏膜基膜侧应用小剂量多巴胺(<1 mmol/L)可使短路电流曲线下降... 详细信息

目的比较多巴胺在大鼠不同节段远端结肠黏膜上引起的离子转运变化。方法剥离健康成年SD大鼠不同节段远端结肠黏膜,运用短路电流技术研究多巴胺对黏膜离子转运的影响。结果黏膜基膜侧应用小剂量多巴胺(<1 mmol/L)可使短路电流曲线下降,越靠近肛门的黏膜上皮细胞对多巴胺的反应越大,而远离肛门的远端结肠黏膜基膜侧应用大剂量(1 mmol/L)多巴胺使短路电流曲线上升。结论大鼠不同节段远端结肠黏膜对不同浓度的多巴胺反应不同。

关键词：多巴胺结肠黏膜短路电流

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哈尔滨老年门诊感染患者抗菌药物使用现状分析

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中国药业 2012年第1期21卷 47-48页

作者：杨伟东付英梅任征黄颖谷佳睿张凤民哈尔滨医科大学基础医学院微生物学教研室黑龙江哈尔滨150086 哈尔滨医科大学附属第二医院黑龙江哈尔滨150086 黑龙江省感染与免疫重点实验室黑龙江哈尔滨150086

目的分析哈尔滨地区老年门诊感染患者的抗菌药物使用情况,为其合理使用、减少滥用提供依据。方法随机抽取某三甲医院2009年4个季度门诊老年患者处方4 225份,对其中感染性疾病患者处方中抗菌药物使用情况进行回顾性分析。结果本地区老年... 详细信息

目的分析哈尔滨地区老年门诊感染患者的抗菌药物使用情况,为其合理使用、减少滥用提供依据。方法随机抽取某三甲医院2009年4个季度门诊老年患者处方4 225份,对其中感染性疾病患者处方中抗菌药物使用情况进行回顾性分析。结果本地区老年门诊的抗菌药物使用率为4.00%,涉及感染处方193份(包括病毒感染处方24份),以喹诺酮类、头孢菌素类抗菌药物为主;但病毒感染性呼吸疾病患者的抗菌药物使用率为38.80%。结论抗菌药物使用基本合理,但病毒感染性呼吸疾病的抗菌药物使用率过高,需进一步加强管理。

关键词：老年门诊抗菌药物细菌病毒

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维药罗勒提取物中总黄酮含量及其抗氧化活性研究

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新疆医科大学学报 2012年第6期35卷 736-739页

作者：米娜瓦尔·哈帕尔艾尼瓦尔·吾买尔阿孜古丽·吐尔逊阿布力子·阿布杜拉娜迪热·热依木依巴代提·吐乎提新疆医科大学基础医学院药理学教研室新疆医科大学第一附属医院细胞生物学室新疆医科大学新疆维吾尔自治区地方病分子生物学重点实验室乌鲁木齐830011 新疆医科大学第二附属医院内科乌鲁木齐830063

目的探讨维药罗勒乙酸乙酯提取物和正丁醇提取物中总黄酮的含量及其体外抗氧化活性。方法采用紫外分光光度法,在357nm波长处测定维药罗勒乙酸乙酯提取物和正丁醇提取物中总黄酮的含量,并进行比较;检测2种提取物对1,1-二苯基-2-三硝基苯... 详细信息

目的探讨维药罗勒乙酸乙酯提取物和正丁醇提取物中总黄酮的含量及其体外抗氧化活性。方法采用紫外分光光度法,在357nm波长处测定维药罗勒乙酸乙酯提取物和正丁醇提取物中总黄酮的含量,并进行比较;检测2种提取物对1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH·)的清除作用,评价其体外抗氧化活性。结果维药罗勒乙酸乙酯提取物中总黄酮含量为21.023 3μg/mL(RSD 0.19%,n=5),正丁醇提取物中总黄酮含量为4.782 9μg/mL(RSD 0.58%,n=5)。0.5mg/mL乙酸乙酯提取物和正丁醇提取物在体外对DPPH.的清除率分别为88.8%和72.2%。结论维药罗勒有效提取物中所含的黄酮可能是其发挥抗炎作用的有效化学成分之一,且其体外抗氧化活性也在一定程度上体现其体外抗炎活性。

关键词：维药罗勒总黄酮紫外分光光度法 DPPH· 抗氧化

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一先天性厚甲家系角蛋白基因突变鉴定

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国际皮肤性病学杂志 2012年第5期38卷 289-290页

作者：曹丽华张金芝张士发王述森罗阳中国医科大学基础医学院医学基因组学教研室教育部医学细胞生物学重点实验室沈阳110001 哈尔滨市红十字中心医院皮肤科沈阳军区总医院皮肤科

目的探讨一个先天性厚甲家系角蛋白基因突变。方法用PCR及Sanger测序技术对先天性厚甲家系先症者KRT17基因所有外显子和KRT6B基因编码螺旋起始和终止区域序列进行突变鉴定，针对发现的可疑位点，Sanger测序检测家系其他成员该位点的... 详细信息

目的探讨一个先天性厚甲家系角蛋白基因突变。方法用PCR及Sanger测序技术对先天性厚甲家系先症者KRT17基因所有外显子和KRT6B基因编码螺旋起始和终止区域序列进行突变鉴定，针对发现的可疑位点，Sanger测序检测家系其他成员该位点的变异情况。结果基因检测结果表明，家系患者KRT17基因错义突变c.263T 〉 C，该突变导致角蛋白17（K17）第88位氨基酸由蛋氨酸变成苏氨酸（p.M88T），KRT6B基因未见异常。结论 KRT17基因c.263 T 〉 C（p.M88T）突变是该先天性厚甲家系致病基因突变。

关键词：角蛋白基因突变先天性厚甲家系鉴定基因错义突变测序技术检测结果角蛋白17

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