检索结果-内蒙古大学图书馆

暨南大学学报（自然科学与医学版） 2010年第2期31卷 178-181,185页

作者：吴昊查振刚熊高鑫姚平张嘉晴侯辉歌刘宁暨南大学附属第一医院骨科广东广州510630 暨南大学医学院生理学教研室广东广州510632 暨南大学医学院生物化学教研室广东广州510632

目的:探讨精确截骨在全膝关节置换术中的临床应用价值。方法:分析我院骨科行全膝关节置换术的病例40例,将其分为两组:常规截骨组(常规组)与精确截骨组(精确组)。在手术前后X线片上测量髋-膝-踝角(hip-knee-ankle angle,HKA);股骨外翻角(... 详细信息

目的:探讨精确截骨在全膝关节置换术中的临床应用价值。方法:分析我院骨科行全膝关节置换术的病例40例,将其分为两组:常规截骨组(常规组)与精确截骨组(精确组)。在手术前后X线片上测量髋-膝-踝角(hip-knee-ankle angle,HKA);股骨外翻角(knee physical valgus angle,KPV);胫骨内侧平台后倾角(posterior slopeangle,PSA)等。采用KSS评分标准计算两组的优良率,通过优良率比较两组的近期疗效,同时对相关数据进行统计学分析比较,评价两组近期疗效及其相关影响因素。结果:精确组20例,疗效优16例、良2例、可2例、差0例,优良率90%。常规组20例,疗效优12例、良4例、可4例、差0例,优良率80%。同时,精确组相对常规组有较好的术后关节活动恢复情况,下肢力线改善情况,两组间差异有显著性。结论:精确截骨较常规截骨的疗效更为肯定,并且近期功能恢复快、并发症少且下肢力线改善满意,是全膝关节置换术中可选择的理想方法。

关键词：精确截骨膝关节置换疗效评价

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大鼠CRMP1基因siRNA的筛选

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暨南大学学报（自然科学与医学版） 2010年第6期31卷 560-564页

作者：张忠其李斌陈万群张文斌龚晓兵郭国庆暨南大学医学院人体解剖学教研室暨南大学医学院生物化学教研室广东广州510632 暨南大学附属第一医院外科暨南大学附属第一医院消化内科人工肝室广东广州510630

目的:筛选有效抑制大鼠CRMP1基因表达的siRNA序列。方法:化学合成3对针对大鼠CRMP1基因的特异性siRNA,用脂质转染胺(lipofectamine)LTX转染大鼠海马神经元,通过流式细胞仪检测转染效率,使用RT-PCR与实时PCR检测CRMP1基因mRNA的表达,从... 详细信息

目的:筛选有效抑制大鼠CRMP1基因表达的siRNA序列。方法:化学合成3对针对大鼠CRMP1基因的特异性siRNA,用脂质转染胺(lipofectamine)LTX转染大鼠海马神经元,通过流式细胞仪检测转染效率,使用RT-PCR与实时PCR检测CRMP1基因mRNA的表达,从而筛选抑制效率最高的siRNA。结果:流式细胞仪检测转染效率为52.5%。通过RT-PCR的初步检测和实时PCR的定量检测结果显示,与对照组相比,所设计的3对siRNA均能不同程度抑制CRMP1基因mRNA的表达,其中CRMP1-249 siRNA抑制效果最佳,抑制率达84.3%。结论:成功筛选出1对能有效抑制大鼠CRMP1基因表达的siRNA序列。

关键词：小干扰RNA 坍塌反应调节蛋白1 实时荧光定量PCR 大鼠

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Rho激酶对大鼠海马神经元骨架相关蛋白mRNA表达的影响

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暨南大学学报（自然科学与医学版） 2010年第4期31卷 341-345页

作者：张忠其莫宏波李斌张文斌龚晓兵郭国庆暨南大学医学院解剖学教研室广东广州510632 暨南大学医学院生物化学教研室广东广州510632 暨南大学第一附属医院外科广东广州510630 暨南大学第一附属医院消化内科人工肝室广东广州510630

目的:探讨Rho激酶对大鼠海马神经元突起生长和骨架相关蛋白mRNA表达的影响。方法:用Rho激酶的抑制剂Y-27632和激动剂溶血磷脂酸(LPA)干预海马神经元,观察突起的生长并用RT-PCR检测大鼠海马神经元神经丝结合蛋白(Dbn1)、微丝肌动蛋白(F-a... 详细信息

目的:探讨Rho激酶对大鼠海马神经元突起生长和骨架相关蛋白mRNA表达的影响。方法:用Rho激酶的抑制剂Y-27632和激动剂溶血磷脂酸(LPA)干预海马神经元,观察突起的生长并用RT-PCR检测大鼠海马神经元神经丝结合蛋白(Dbn1)、微丝肌动蛋白(F-actin)、微管相关蛋白(Tau)、α-微管蛋白(α-tubulin)mRNA的表达。结果:用LPA干预2 h后突起从远端逐渐退缩,长度缩短,细小突起退缩明显;Y-27632干预2 h后细胞胞体和突起的远侧端新生出细小突起。RT-PCR实际扩增长度与设计长度相吻合。内参照β-actin电泳条带在不同分组灰度较均一,呈高表达。Dbn1呈较高水平表达,激动剂LPA组表达下降(P<0.05),抑制剂Y-27632组表达量增多(P<0.05);F-actin和Tau表达呈低水平,激动剂作用后均使表达量相应的减少(P<0.05),抑制剂组表达增多(P<0.05);α-tubulin表达量最高,激动剂组表达量出现明显下降(P<0.05),抑制剂组表达增加(P<0.05)。结论:激活Rho激酶下调Dbn、F-actin、Tau、α-tubulin mRNA的表达并诱导突起缩短,抑制则增加其表达并促进突起生长。

关键词： Rho激酶神经元突起生长大鼠海马

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子宫内膜异位症大鼠妊娠、哺乳期异位内膜的观察

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中国病理生理杂志 2010年第7期26卷 1423-1424页

作者：冉青珍何彦丽陈万群广州中医药大学第二临床医学院妇科广东广州510120 广州中医药大学病理教研室广东广州510120 广州中医药大学暨南大学医学院生物化学系广东广州510632

目的:对比观察子宫内膜异位症大鼠妊娠期、哺乳期在位与异位内膜的组织学差异。方法:雌性成熟SD大鼠,自体移植法造子宫内膜异位症模型,造模成功后以雌雄比例2:1与雄鼠同笼饲养,雌鼠阴道细胞涂片发现精子当天定为"孕鼠",于孕12... 详细信息

目的:对比观察子宫内膜异位症大鼠妊娠期、哺乳期在位与异位内膜的组织学差异。方法:雌性成熟SD大鼠,自体移植法造子宫内膜异位症模型,造模成功后以雌雄比例2:1与雄鼠同笼饲养,雌鼠阴道细胞涂片发现精子当天定为"孕鼠",于孕12d处死孕鼠7只,取其在位、异位内膜甲醛固定,石蜡包埋、切片。另7只待其自然分娩后哺乳20d后处死,取其在位及异位内膜,同法切片。结果:模型组大鼠妊娠期在位子宫内膜符合妊娠期改变,可见A-S现象及蜕膜组织,而所有妊娠期大鼠异位内膜仅见不同程度分泌现象。模型组大鼠哺乳期在位内膜呈增生期改变,而异位内膜发育较其在位子宫内膜迟,并呈现坏死趋势。结论:由于生长环境不同,异位内膜对各种内分泌激素的反应与在位子宫内膜相比存在敏感差异。妊娠、哺乳对子宫内膜异位症可起到良好的治疗作用。

关键词：子宫内膜异位症大鼠妊娠泌乳

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脐血间充质干细胞在大鼠损伤肝脏迁徙途径的实验

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暨南大学学报（自然科学与医学版） 2010年第4期31卷 357-363页

作者：师玲玲王立生刘赴平王德文宇丽余卫幺俊卿许惠芯余霖陈少彬暨南大学第二临床医学院消化内科广东深圳518020 东莞市中心血站广东东莞523930 暨南大学医学院生物化学教研室广东广州510632 广州市第十二人民医院血液内科广东广州510620

目的：建立慢病毒载体转染增强型绿色荧光蛋白基因至人脐血间充质干细胞的实验体系,观察绿色荧光蛋白标记的人脐血间充质干细胞在急性肝坏死大鼠模型肝脏局部的迁徙途径。方法：采集新鲜人脐血,梯度离心及低血清培养基体外分离、培养人... 详细信息

目的：建立慢病毒载体转染增强型绿色荧光蛋白基因至人脐血间充质干细胞的实验体系,观察绿色荧光蛋白标记的人脐血间充质干细胞在急性肝坏死大鼠模型肝脏局部的迁徙途径。方法：采集新鲜人脐血,梯度离心及低血清培养基体外分离、培养人脐血间充质干细胞,以慢病毒为载体转染绿色荧光蛋白基因至人脐血间充质干细胞。CC l4橄榄油溶液腹腔注射建立急性肝坏死大鼠模型,将2.0~5.0×106绿色荧光蛋白标记的人脐血间充质干细胞肝脏局部移植给模型鼠,24、48、72 h、1周、2周和4周分别处死模型鼠,冰冻切片,荧光显微镜下观察移植细胞在肝脏局部的迁徙途径。结果：转染细胞荧光显微镜下呈现均一绿色荧光影像。细胞移植24 h内可见荧光信号由进针孔迁徙至汇管区,移植治疗48 h时移植细胞定居于汇管区,48 h后荧光信号向坏死病灶区域迁徙,1周后在肝脏坏死局部区域可见稳定的荧光信号。结论：本实验构建的绿色荧光蛋白转染人脐血间充质干细胞示踪体系稳定表达绿色荧光蛋白。经动物实验证明人脐血间充质干细胞肝脏局部移植给肝坏死大鼠模型后在肝脏局部经历了＂进针孔至汇管区＂,＂汇管区至病灶区＂的二次迁徙模式。

关键词：人脐血间充质干细胞绿色荧光蛋白细胞移植肝损伤示踪

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IPP5对高糖高胰岛素诱导的心肌细胞肥大的影响

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广西医科大学学报 2010年第5期27卷 672-675页

作者：胡姗韦晓春张绍峰李曼丽王佳祺曾秋妹曾麒燕广西医科大学第一临床医学院广西医科大学第一附属医院临床医学实验中心广西医科大学生物化学与分子生物学教研室南宁530021

目的:探讨体外培养中I型磷酸酶的新型抑制亚基(IPP5)对高糖高胰岛素诱导的心肌细胞的肥大是否具有抑制作用。方法:新生SD乳鼠心肌细胞在含有10%胎牛血清的杜尔伯科改良伊格尔培养基(DMEM)中培养72h后,分别将IPP5野生型和短片段活化突变... 详细信息

目的:探讨体外培养中I型磷酸酶的新型抑制亚基(IPP5)对高糖高胰岛素诱导的心肌细胞的肥大是否具有抑制作用。方法:新生SD乳鼠心肌细胞在含有10%胎牛血清的杜尔伯科改良伊格尔培养基(DMEM)中培养72h后,分别将IPP5野生型和短片段活化突变型基因通过脂质体介导转染入心肌细胞,48h后,加入高糖高胰岛素作用48h。利用图像分析软件分析心肌细胞表面积,并检测心肌细胞总蛋白含量、肌酸激酶(CK)和乳酸脱氢酶(LH)漏出量及心肌损伤标志物心肌肌钙蛋白I(TnI)的变化。结果:高糖高胰岛素可增加心肌细胞表面积,IPP5突变活化型基因可部分抑制心肌细胞肥大;转染IPP5突变活化型基因组的心肌细胞总蛋白含量较转染空载体对照组高,而CK和LH漏出量及TnI的含量却比转染空载体对照组明显减少。此外,转染IPP5突变活化型基因组的心肌细胞形态轮廓清楚,细胞质颗粒少,而转染空载体对照组的心肌细胞轮廓不清,细胞质颗粒粗大且多。结论:IPP5突变活化型对高糖高胰岛素诱导的心肌细胞肥大、损伤具有一定的抑制保护作用。

关键词：高糖高胰岛素诱导心肌细胞肥大 PROTEIN PHOSPHATASE NOVEL 转染空载体总蛋白含量细胞质颗粒细胞表面积突变活化对照组抑制作用基因组化型心肌损伤标志物心肌肌钙蛋白乳鼠心肌细胞培养

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siRNA腺病毒载体预防兔酒精性股骨头坏死的动物实验研究

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中国骨与关节外科 2010年第1期3卷 62-67页

作者：王少华王义生李月白郑州大学第一附属医院骨科河南省高等学校临床医学重点学科开放实验室郑州450052 郑州市骨科医院郑州450052 郑州大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室郑州450001

目的观察靶向PPARγ基因siRNA腺病毒载体预防兔酒精性股骨头坏死(ONFH)的作用效果。方法新西兰种家兔60只,随机分为5组,每组12只。正常对照组(N):采用灌胃法,给予10%葡萄糖溶液10ml/(kg·d);单纯马血清致敏组(H):马血清致敏后,给予... 详细信息

目的观察靶向PPARγ基因siRNA腺病毒载体预防兔酒精性股骨头坏死(ONFH)的作用效果。方法新西兰种家兔60只,随机分为5组,每组12只。正常对照组(N):采用灌胃法,给予10%葡萄糖溶液10ml/(kg·d);单纯马血清致敏组(H):马血清致敏后,给予同量10%葡萄糖灌胃,作为对照;马血清致敏+酒精组(M):马血清致敏后,采用灌胃法,给予烈性白酒(含酒精46%,V/V)10ml/(kg·d),作为模型组;酒精+空载体组(CO):马血清致敏后灌酒,将空载体组病毒滴液注入动物一侧股骨头内;马血清致敏+酒精+重组腺病毒组(S):实验组,马血清致敏后灌酒,将siRNA腺病毒滴液注入动物一侧股骨头内。在灌酒后第4、8周末分批处死动物,观察其股骨头病理学变化。RT-PCR检测股骨头组织中PPARγmRNA和Osteocalcin mRNA的表达。结果M、CO组中,PPARγmRNA高表达,Osteocalcin mRNA低表达,空骨陷窝百分比及最大脂肪细胞平均直径明显增大、骨小梁面积分数降低,与N、H组相比差异均有统计学意义;S组中,PPARγmRNA低表达,Osteocalcin mRNA高表达,空骨陷窝百分比、最大脂肪细胞平均直径、骨小梁面积分数均与H、N组接近,差异均无统计学意义。结论靶向PPARγ基因siRNA腺病毒载体能够有效阻断酒精诱导的家兔股骨头内骨髓基质细胞内PPARγmRNA表达及成脂分化,预防酒精性ONFH的发生。

关键词：过氧化物酶体增殖子活化受体-γ siRNA腺病毒载体预防酒精股骨头坏死

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siRNA阻断PPARγ基因表达预防酒精性股骨头坏死的实验研究

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河南医学研究 2010年第2期19卷 138-143页

作者：王义生王少华王兴张林锋李月白殷力张驰郑州大学第一附属医院骨科河南郑州河南省高等学校临床医学重点学科开放实验室河南郑州450052 郑州市骨科医院河南郑州450052 郑州大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室河南郑州450001

目的:观察靶向PPARγ基因siRNA腺病毒载体阻断酒精诱导兔骨髓基质细胞(MSCs)的成脂分化预防酒精性股骨头坏死(ONFH)的作用效果。方法:采用RNA干扰技术,构建重组PPARγ的siRNA腺病毒表达载体;将腺病毒载体感染家兔体外MSCs以及活体股骨头... 详细信息

目的:观察靶向PPARγ基因siRNA腺病毒载体阻断酒精诱导兔骨髓基质细胞(MSCs)的成脂分化预防酒精性股骨头坏死(ONFH)的作用效果。方法:采用RNA干扰技术,构建重组PPARγ的siRNA腺病毒表达载体;将腺病毒载体感染家兔体外MSCs以及活体股骨头内MSCs,检测MSCs内PPARγmRNA及蛋白表达、甘油三酯、ALP活性和培养液骨钙素含量,并计数脂肪细胞;观察股骨头病理学变化。结果:干扰组体外MSCs内PPARγmRNA表达值、脂肪细胞数、甘油三酯、ALP活性值与骨钙素含量均接近正常,与模型组、感染空载体组、感染无关siRNA组间差异有统计学意义(P<0.05),与对照组间差异无统计学意义(P>0.05)。活体实验干扰组股骨头内PPARγmRNA和蛋白均呈低表达、空骨陷窝计数、脂肪细胞及最大脂肪细胞平均直径未见明显增加,与正常对照组间差异无统计学意义(P>0.05)。结论:靶向PPARγ基因siR-NA腺病毒载体能够有效阻断酒精诱导的家兔体外MSCs及活体股骨头MSCs内PPARγ基因表达,阻止其成脂分化,预防酒精性ONFH的发生。

关键词： RNA干扰过氧化物酶体增殖子活化受体-γ 股骨头坏死酒精腺病毒载体

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人溶菌酶N端与Exendin-4嵌合蛋白的基因克隆及原核表达

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暨南大学学报（自然科学与医学版） 2009年第6期30卷 595-600页

作者：王明刘宇婷潘霞明曾可静朱元昌周羽竝刘誉暨南大学医学院生物化学教研室广东广州510632 暨南大学医学院临床医学系广东广州510632

目的:克隆嵌合多肽人溶菌酶N端-Exendin-4基因并进行原核表达和纯化。方法:通过重组PCR技术将人溶菌酶N端74个氨基酸的基因序列与Exendin-4多肽基因序列相连接,其间引入一段由凝血酶和二肽基肽酶识别位点组成的连接序列。以嵌合基因hLYZ... 详细信息

目的:克隆嵌合多肽人溶菌酶N端-Exendin-4基因并进行原核表达和纯化。方法:通过重组PCR技术将人溶菌酶N端74个氨基酸的基因序列与Exendin-4多肽基因序列相连接,其间引入一段由凝血酶和二肽基肽酶识别位点组成的连接序列。以嵌合基因hLYZ(N74)-Ex4与质粒pET-32a(+)构建原核表达体,转化大肠杆菌BL21(DE3)并诱导表达。表达蛋白经Ni-NTA亲和层析纯化、Western blotting鉴定;透析复性后,以肠激酶切割并回收目的多肽。结果:重组质粒pET-32a/hLYZ(N74)-Ex4构建正确,目的蛋白主要以包涵体形式存在,37℃诱导4h、IPTG浓度为0.6 mmol/L时表达量最高,约占菌体蛋白总量的30%。Western blotting检测显示重组蛋白为单一清晰条带。重组蛋白经肠激酶切割后,回收得到高纯度的嵌合多肽。结论:成功构建hLYZ(N74)-Ex4嵌合基因的原核表达质粒,高效原核表达并获得高纯度目的蛋白。

关键词： Exendin 4 人溶菌酶嵌合多肽原核表达糖尿病

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重组人内皮抑素提取方法的优化及其对膀胱癌的抑制作用

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中华医学杂志 2009年第46期89卷 3285-3288页

作者：任明华倪少滨陈起引徐万海王长林付宜鸣焦治兴麻立赵忠山刘兴汉哈尔滨医科大学第一临床医学院泌尿外科黑龙江哈尔滨150001 哈尔滨医科大学第四临床医学院泌尿外科哈尔滨医科大学生物化学与分子生物学教研室

目的摸索重组人内皮抑素（rhES）蛋白的最佳表达条件。探索内皮抑素（ES）对膀胱癌实体肿瘤及细胞系的抑制作用。方法分别从不同异丙基-β-D硫代半乳糖苷（IPTG）浓度、加IPTG时机、表达时间等几个方面对rhES的蛋白表达条件进行摸索和... 详细信息

目的摸索重组人内皮抑素（rhES）蛋白的最佳表达条件。探索内皮抑素（ES）对膀胱癌实体肿瘤及细胞系的抑制作用。方法分别从不同异丙基-β-D硫代半乳糖苷（IPTG）浓度、加IPTG时机、表达时间等几个方面对rhES的蛋白表达条件进行摸索和优化。活性检测：（1）动物实验：观察内皮抑素对裸鼠皮下移植瘤的生长情况的影响。（2）细胞实验：MTT法、肿瘤细胞生长曲线观察内皮抑素对T-24膀胱癌细胞系的作用。结果rhES在大肠杆菌中的表达量占总菌体蛋白的58.65％，纯化后的蛋白纯度为96.22％。动物实验：rhES的抑瘤率为66.8％。细胞实验：MTT实验中rhES的半数抑制浓度IC50=22μg／ml；肿瘤细胞生长曲线表明第7天时rhES组的细胞数比对照组减少了58.75％。结论本实验所优化的最佳表达条件可获得高表达、高活性的rhEs蛋白，Es不但对裸鼠接种的膀胱癌有抑制作用，对膀胱癌细胞系也有抑制作用。

关键词：内皮抑素类膀胱肿瘤蛋白表达抗肿瘤

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