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中国微量元素科学研究会第十六届全国微量元素学术会议暨首届全国药学研究生论文交流会

作者：周丹赖伟勇张俊清付煜荣海南医学院药学院海南海口 571199 海南医学院药学院海南海口 571199 海南医学院海南省热带药用植物研究与开发重点实验室海南海口 571199

目的建立益智微量元素的测定方法，并对不同生长期和不同产地益智样品中微量元素 As、Hg、Pb、Cd、Cu、Zn、Mn 和 Fe 的含量进行初步的比较研究。方法采用原子吸收光谱法测定益智样品中 Cu、Zn、Mn 和 Fe 的含量，采用原子荧光光谱法... 详细信息

目的建立益智微量元素的测定方法，并对不同生长期和不同产地益智样品中微量元素 As、Hg、Pb、Cd、Cu、Zn、Mn 和 Fe 的含量进行初步的比较研究。方法采用原子吸收光谱法测定益智样品中 Cu、Zn、Mn 和 Fe 的含量，采用原子荧光光谱法测定益智样品中 As、Hg、Pb、Cd的含量。

关键词：益智微量元素不同生长期不同产地

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大鼠尿液中两个高良姜素代谢产物的化学成分及其降脂活性研究

大鼠尿液中两个高良姜素代谢产物的化学成分及其降脂活性研究

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2016首届中国中药资源大会暨CSNR中药及天然药物资源研究专业委员会第十二届学术年会

作者：张旭光张俊清海南省热带药用植物研究开发重点实验室海南医学院药学院海南海口571199

目的：研究高良姜素两个代谢产物的降脂活性.两个代谢产物分别命名为高良姜素-3-O-β-D-葡萄糖醛酸(GG-1),高良姜素-7-O-β-D-葡萄糖醛酸(GG-2).方法：口服给药雌性SD大鼠高良姜素.利用Sephadex LH-20凝胶柱和半制备高效液相色谱(HPLC)... 详细信息

目的：研究高良姜素两个代谢产物的降脂活性.两个代谢产物分别命名为高良姜素-3-O-β-D-葡萄糖醛酸(GG-1),高良姜素-7-O-β-D-葡萄糖醛酸(GG-2).方法：口服给药雌性SD大鼠高良姜素.利用Sephadex LH-20凝胶柱和半制备高效液相色谱(HPLC),从大鼠尿液中分离纯化两个高良姜素代谢产物,并通过分析光谱数据确定了两个代谢物的化学结构.在HepG2细胞中,评价两个代谢物的降脂活性,并通过实时定量聚合酶链反应(qPCR)探究脂肪生成基因的下调或上调作用.结果：结果表明两个高良姜素代谢产物具有降脂活性.qPCR数据显示,这些活性与脂肪生成基因的下调密切相关,如SREBP-1a,SREBP-lc和SREBP-2转录因子,以及他们的下游基因如FAS,ACC和HMGR的下调相关.结论：这些结果表明了两个代谢产物均具有较好的降脂作用,且优于高良姜素.这些降脂活性与主要基因或蛋白的下调密切相关,并能调节胆固醇和甘油三酯的生物合成.

关键词：高良姜素高良姜素-3-O-β-D-葡萄糖醛酸化代谢产物高良姜素-7-O-β-D-葡萄糖醛酸化代谢产物降血脂脂肪生成基因代谢物

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益智中圆柚酮治疗肾损伤的药效学研究

益智中圆柚酮治疗肾损伤的药效学研究

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2016首届中国中药资源大会暨CSNR中药及天然药物资源研究专业委员会第十二届学术年会

作者：李永辉张俊清海南省热带药用植物研究开发重点实验室海口571199 海南医学院药学院海口571199

目的：对圆柚酮治疗慢性肾脏疾病的药效进行评价，阐述益智补肾缩尿的物质基础。方法：采用腺嘌呤诱导的CKD大鼠模型，对益智中圆柚酮的肾损伤保护作用进行研究，分别测定24小时尿量、尿蛋白(UP24h)、血尿素氮(BUN)、血肌酐(Scr)、硫酸... 详细信息

目的：对圆柚酮治疗慢性肾脏疾病的药效进行评价，阐述益智补肾缩尿的物质基础。方法：采用腺嘌呤诱导的CKD大鼠模型，对益智中圆柚酮的肾损伤保护作用进行研究，分别测定24小时尿量、尿蛋白(UP24h)、血尿素氮(BUN)、血肌酐(Scr)、硫酸吲哚醇(IS)的含量以及对肾脏病理切片进行观察，以确定圆柚酮对CKD的治疗作用。结果：与模型组比较，圆柚酮各剂量组大鼠肾组织病理切片形态均有不同程度的改善，其中圆柚酮高剂量组＞圆柚酮中剂量组＞黄葵胶囊组＞圆柚酮低剂量组，且高剂量组大鼠血清中BUN和IS及尿蛋白含量中低剂量组降低更明显;与高剂量组相比，中剂量组血清中Scr降低较明显。结论：圆柚酮对CKD呈现明显的量效关系，高剂量组药效强于低剂量组。

关键词：圆柚酮慢性肾脏疾病药效学病理切片

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高良姜叶中的化学成分

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中国实验方剂学杂志 2015年第3期21卷 37-40页

作者：谭银丰李海龙李友宾李永辉赖伟勇王勇陈峰康胜利海南医学院海南省药用植物研究与开发重点实验室药学院海口571101

目的:研究高良姜叶中的化学成分。方法:高良姜叶经低温烘干粉碎,粉末样品中加入甲醇(1∶50),超声提取3次,合并提取液。样品经适当稀释后,注入液相色谱-质谱联用仪(LC-MS/MS),在电喷雾离子源正离子模式下(ESI+),采用多反应监测模式(MRM)... 详细信息

目的:研究高良姜叶中的化学成分。方法:高良姜叶经低温烘干粉碎,粉末样品中加入甲醇(1∶50),超声提取3次,合并提取液。样品经适当稀释后,注入液相色谱-质谱联用仪(LC-MS/MS),在电喷雾离子源正离子模式下(ESI+),采用多反应监测模式(MRM)对可能的化合物进行针对性分析。结果:在高良姜叶的甲醇提取液中共鉴定出分属于两类成分的16个化合物,其中黄酮类物质白杨素、乔松素、杨芽黄素、芹菜素、高良姜素、高良姜素-3-O-甲醚、金合欢素、山柰酚、山柰素、槲皮素、异鼠李素、芦丁。二芳基庚烷类成分包括益智酮甲、益智醇、六氢姜黄素和hannokinol。结论:本研究利用液相色谱-质谱联用技术确定了高良姜叶中的16种化学成分,尚有多种二芳基庚烷类成分需要分离鉴定。

关键词：高良姜叶化学成分黄酮二芳基庚烷类液相色谱-质谱联用

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融合表达载体pET32a/Trx-EK-MrVIB的构建及在大肠杆菌中表达

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基因组学与应用生物学 2015年第2期34卷 326-331页

作者：高炳淼刘云海彭超魏娜张俊清海南医学院药学院海南省热带药用植物研究开发重点实验室海口571199 深圳华大基因研究院深圳518083

人工设计合成芋螺毒素基因Mr VIB来构建表达载体p ET32a/Trx-EK-Mr VIB,将其转化大肠杆菌BL21(DE3)plys S进行诱导表达。菌体经超声破碎后利用Ni-NTA琼脂糖柱进行亲和层析纯化融合蛋白,SDS-PAGE电泳分析融合蛋白表达。结果表明融合表达... 详细信息

人工设计合成芋螺毒素基因Mr VIB来构建表达载体p ET32a/Trx-EK-Mr VIB,将其转化大肠杆菌BL21(DE3)plys S进行诱导表达。菌体经超声破碎后利用Ni-NTA琼脂糖柱进行亲和层析纯化融合蛋白,SDS-PAGE电泳分析融合蛋白表达。结果表明融合表达载体p ET32a/Trx-EK-Mr VIB经PCR扩增和测序鉴定具有正确的开放阅读框。SDS-PAGE电泳显示融合蛋白在大肠杆菌中获得高效可溶性表达,经一步亲和层析获得纯度大于90%的融合芋螺毒素达73.6 mg/L。本文成功构建了融合表达载体p ET32a/Trx-EK-Mr VIB,融合芋螺毒素Trx-EK-Mr VIB在大肠杆菌中获得高效可溶性表达。

关键词：芋螺毒素大肠杆菌基因工程融合表达亲和层析

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两种方法提取的柠檬草挥发油化学成分分析

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食品工业 2015年第4期36卷 280-283页

作者：王勇胡雄飞孔杜林海南医学院药学院海口571199 海南省热带药用植物研究开发重点实验室海口571199

采用超临界CO2萃取法(SFE)和水蒸气蒸馏法(SD)提取柠檬草挥发油,用气相色谱-质谱联用技术对其化学成分进行分离鉴定,并采用峰面积归一化法计算各组分相对百分含量,分析比较了2种不同提取方法提取的柠檬草挥发油化学成分的差异。从柠檬... 详细信息

采用超临界CO2萃取法(SFE)和水蒸气蒸馏法(SD)提取柠檬草挥发油,用气相色谱-质谱联用技术对其化学成分进行分离鉴定,并采用峰面积归一化法计算各组分相对百分含量,分析比较了2种不同提取方法提取的柠檬草挥发油化学成分的差异。从柠檬草超临界CO2流体萃取物中初步鉴定了40个成分,主要成分为亚油酸(28.82%)、香叶醛(13.52%)、棕榈酸(12.71%)、橙花醛(10.83%)、硬脂酸(3.23%)、柠檬醇(2.65%)、乙酸香叶酯(2.03%);从柠檬草水蒸气蒸馏法提取的挥发油中鉴定了35个成分,主要成分为香叶醛(32.86%)、橙花醛(28.22%)、乙酸香叶酯(7.93%)、橙花醇(4.47%)、橙花叔醇(4.13%)、苯乙酸橙花酯(2.44%);两者共有成分21个。两种方法提取的柠檬草挥发油组分及其成分含量存在较大差异,超临界CO2流体萃取法提取的挥发油能更真实、全面地反映柠檬草中的化学成分。

关键词：柠檬草挥发油气相色谱-质谱法(GC-MS) 超临界萃取法水蒸气蒸馏法

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南药益智AFLP-PCR体系的建立与优化

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生物技术 2015年第3期25卷 251-255页

作者：高炳淼潘坤田建平唐天乐魏娜张俊清海南医学院药学院海南海口571199 海南省热带药用植物研究开发重点实验室海南海口571199 海南医学院热带医学与检验医学院海南海口571199

[目的]建立适合南药益智的扩增片段长度多态性(AFLP)扩增体系来研究不同地理居群益智遗传多样性。[方法]利用植物基因组试剂盒法提取高质量的益智基因组DNA,采用单因素和正交试验对AFLP过程中的酶切和PCR相关影响因素进行优化,并对适合... 详细信息

[目的]建立适合南药益智的扩增片段长度多态性(AFLP)扩增体系来研究不同地理居群益智遗传多样性。[方法]利用植物基因组试剂盒法提取高质量的益智基因组DNA,采用单因素和正交试验对AFLP过程中的酶切和PCR相关影响因素进行优化,并对适合益智AFLP分析的引物组合进行筛选。[结果]实验结果表明最佳酶切反应体系:模板DNA 0.6μg,酶量20 U,酶切时间2 h;最佳AFLP-PCR选择性扩增反应体系(总体积为25μL):10×PCR Buffer(不含Mg2+)2.5μL,d NTPs 2μL,Mg2+(25mmol/L)1.5μL,引物(10 pmol/μL)各2.0μL,Taq酶(5 U/ml)0.5μL,模板稀释25倍2μL。利用建立的最佳扩增体系从64对引物中筛选获得8对选择性引物适合益智AFLP分析。[结论]建立了稳定的AFLP-PCR体系,为研究益智遗传多样性的AFLP分析奠定了基础。

关键词：益智 AFLP-PCR 体系优化引物筛选

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GC-MS分析海南白沙产裸花紫珠叶挥发油的化学成分

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中国实验方剂学杂志 2015年第2期21卷 94-98页

作者：王勇孔杜林董琳李永辉杨卫丽海南医学院药学院海口571199 海南省热带药用植物研究开发重点实验室海口571199 海口市黎族医药重点实验室海口571199

目的:研究海南白沙产裸花紫珠叶挥发油中的化学成分。方法:采用水蒸气蒸馏法从裸花紫珠叶中提取挥发油,并通过气相色谱-质谱联用技术对其化学成分进行测定,结合计算机检索技术对分离的化合物进行鉴定,同时采用峰面积归一化法确定各成分... 详细信息

目的:研究海南白沙产裸花紫珠叶挥发油中的化学成分。方法:采用水蒸气蒸馏法从裸花紫珠叶中提取挥发油,并通过气相色谱-质谱联用技术对其化学成分进行测定,结合计算机检索技术对分离的化合物进行鉴定,同时采用峰面积归一化法确定各成分的相对百分含量。结果:从海南白沙产裸花紫珠挥发油中共分离出76个组分,鉴定了其中的70种成分,所鉴定的成分占总挥发油成分的98.69%,其中相对百分含量较高的成分有β-蒎烯(20.70%),α-蒎烯(9.41%),石竹烯氧化物(6.90%),石竹烯(6.65%),邻伞花烃(6.62%),反式-4-侧柏醇(5.85%)和桃金娘烯醇(5.61%)等。结论:海南白沙产裸花紫珠挥发油的化学成分主要为单萜及其含氧衍生物。

关键词：裸花紫珠挥发油气相色谱-质谱海南

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多成分综合评分法优化高良姜乙醇提取工艺研究

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中成药 2015年第11期37卷 2402-2407页

作者：程守前李永辉陈峰魏娜王勇谭银丰李海龙张小坡张俊清李友宾南京中医药大学药学院江苏南京210023 海南医学院海南省热带药用植物研究开发重点实验室海南海口571199

目的优化高良姜的乙醇提取工艺。方法建立高效液相色谱法,同时测定高良姜中5-羟基-7-(4-羟基-3-甲氧基苯基)-1-苯基-3-庚酮、高良姜素、山柰素、7-(4-羟基-3-甲氧基苯基)-1-苯基-4-烯-3-庚酮和1,7-二苯基-5-羟基-3-庚酮5种成分,采用L9(... 详细信息

目的优化高良姜的乙醇提取工艺。方法建立高效液相色谱法,同时测定高良姜中5-羟基-7-(4-羟基-3-甲氧基苯基)-1-苯基-3-庚酮、高良姜素、山柰素、7-(4-羟基-3-甲氧基苯基)-1-苯基-4-烯-3-庚酮和1,7-二苯基-5-羟基-3-庚酮5种成分,采用L9(34)正交试验法,以上述5种成分含有量的综合评分为指标,考察乙醇体积分数、提取时间、提取次数和料液比4个影响因素,优选高良姜的醇提工艺。结果提取次数对高良姜的提取工艺有显著性影响,优选出的提取工艺为加10倍量80%乙醇,提取3次,每次1 h;高良姜中5种成分的转移率分别为5-羟基-7-(4-羟基-3-甲氧基苯基)-1-苯基-3-庚酮91.7%、高良姜素92.3%、山柰素85.0%、7-(4-羟基-3-甲氧基苯基)-1-苯基-4-烯-3-庚酮94.8%、1,7-二苯基-5-羟基-3-庚酮93.9%。结论多成分综合评分法优选出的提取工艺能对高良姜药材进行较完全地提取,可用于在线监控。

关键词：高良姜正交设计综合评分法提取工艺

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番木瓜籽油的超临界萃取工艺及其脂肪酸组成分析

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广州化工 2015年第18期43卷 50-51,71页

作者：秦贞苗赖伟勇张俊清康胜利王勇海南医学院药学院海南省热带药用植物研究开发重点实验室海南海口571199

以番木瓜籽油的萃取得率为指标,采用正交试验,考察萃取压力、温度和时间对萃取得率的影响,对超临界CO2流体萃取番木瓜籽油的工艺条件进行优选,并采用气质联用对其脂肪酸组成进行分析。结果,番木瓜籽油超临界萃取的较佳条件为:萃取压力为... 详细信息

以番木瓜籽油的萃取得率为指标,采用正交试验,考察萃取压力、温度和时间对萃取得率的影响,对超临界CO2流体萃取番木瓜籽油的工艺条件进行优选,并采用气质联用对其脂肪酸组成进行分析。结果,番木瓜籽油超临界萃取的较佳条件为:萃取压力为25 MPa,萃取温度为55℃,萃取时间为120 min;在此条件下,番木瓜籽油的平均萃取得率为30.0%,油中的主要脂肪酸为油酸(50.37%)、棕榈酸(19.61%)、亚油酸(5.91%)和硬脂酸(5.28%)。

关键词：番木瓜籽油正交试验超临界流体萃取气相色谱-质谱分析

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