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孕期低剂量poly(I:C)暴露联合新生接种乙肝疫苗诱发小鼠持久性自闭样行为

解剖学研究 2019年第2期41卷 93-97页

作者：张红阳杨俊华袁丽芳祁方昉左泽杰姚志彬中山大学中山医学院人体解剖学教研室广东广州510080 广东药科大学生命科学与生物制药学院人体解剖学教研室广东广州510080

目的探讨低剂量聚肌苷酸胞甘酸[poly(I:C)]暴露联合新生期乙肝疫苗接种导致小鼠表现出持久性自闭症样行为的机制。方法将孕鼠随机分成4组,分别为对照(CON)组、poly(I:C)(PIC)组、乙肝疫苗(HBV)组和联合免疫干预(P/H)组。4周、8周和12周... 详细信息

目的探讨低剂量聚肌苷酸胞甘酸[poly(I:C)]暴露联合新生期乙肝疫苗接种导致小鼠表现出持久性自闭症样行为的机制。方法将孕鼠随机分成4组,分别为对照(CON)组、poly(I:C)(PIC)组、乙肝疫苗(HBV)组和联合免疫干预(P/H)组。4周、8周和12周龄时,检测小鼠自闭症样行为。12周龄时,检测小鼠脾脏Th2、Th17和TH2/17细胞的比例及外周血和海马组织中IL-4和IL-17a的含量。结果与CON组比较,HBV组8周龄时出现行为学损害,12周龄时行为学损害恢复;P/H组8周、12周龄时均出现行为学损害。此外,P/H组较CON组Th2型的细胞水平有升高(P<0.05);P/H组较PIC组Th2型细胞水平升高(P<0.05)。P/H组较HBV组中的Th17型细胞水平升高(P<0.05);P/H组较CON组Th2/17型细胞水平增加(P<0.05);P/H组较PIC组中Th2/17型细胞水平增加(P<0.05)。进一步证实,分别与CON组、HBV和PIC组比较,P/H组血清和海马组织的IL-4和IL-17a的含量升高(P<0.05)。结论孕期低剂量poly(I:C)暴露联合新生期乙肝疫苗接种通过升高脑内IL-17a水平导致小鼠持久性自闭症样行为。

关键词：自闭样行为聚肌苷酸胞甘酸乙肝疫苗孕期 Th2/17细胞

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整合素连接激酶对幽门螺杆菌所致细胞凋亡的影响

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中国病原生物学杂志 2018年第8期13卷 827-830页

作者：丁雲飞刘艺凝徐正荣倩玉吴玉龙季晓飞赵慧琳张莹李波清滨州医学院病原生物学教研室山东烟台264003 东营市胜利第一中学

目的探讨整合素连接激酶对幽门螺杆菌(Hp)致胃癌细胞MGC-803凋亡的影响。方法实验分为空白对照组(胃癌细胞MGC-803正常条件培养),激动剂作用组(MGC803细胞与0.4μmol/L的整合素连接激酶激动剂LPTP共培养),Hp作用组(MGC803细胞与Hp(MOI值... 详细信息

目的探讨整合素连接激酶对幽门螺杆菌(Hp)致胃癌细胞MGC-803凋亡的影响。方法实验分为空白对照组(胃癌细胞MGC-803正常条件培养),激动剂作用组(MGC803细胞与0.4μmol/L的整合素连接激酶激动剂LPTP共培养),Hp作用组(MGC803细胞与Hp(MOI值为100∶1)共培养)和激动剂加Hp作用组(MGC803细胞与0.4μmol/L的LPTP共培养1h,与Hp(MOI值为100∶1)共培养)。24h后流式细胞术检测细胞凋亡率,Western blot检测细胞凋亡相关蛋白PARP、Casepase-3的表达。结果激动剂作用组、Hp作用组、激动剂加Hp作用组细胞凋亡率分别为(23.45±1.484 92)%、(30.7±3.111 27)%、(16.15±1.202 08)%,与空白对照组(10.1±0.707 11)%比较,差异均有统计学意义(t值分别为-11.478,-9.131,-6.135,P<0.05);激动剂加Hp作用组与Hp作用组比较差异有统计学意义(t=6.169,P<0.05)。激动剂作用组、Hp作用组、激动剂加Hp作用组PARP蛋白相对表达量分别为0.89±0.57、1.245±0.21、0.87±0.057,与空白对照组0.6±0.06比较差异均有统计学意义(t值分别为-4.734,-13.492,-4.401,P<0.05);Casepase-3蛋白表达分别为0.78±0.35、1.32±0.04、0.87±0.45;与空白对照组0.47±0.07比较差异有统计学意义(t值分别为-5.635,-14.577,-8.037,P<0.05)。结论整合素连接激酶在Hp感染MGC-803细胞中起抗凋亡的作用。

关键词：幽门螺杆菌整合素连接激酶细胞凋亡 MGC-803细胞 LPTP

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幽门螺杆菌TaqMan MGB探针双重荧光定量PCR检测方法的建立

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中国病原生物学杂志 2018年第6期13卷 572-574,579页

作者：荣倩玉陈醒醒刘艺凝徐正丁雲飞吴玉龙季晓飞张莹李波清滨州医学院病原生物学教研室山东烟台264003 东营市胜利第一中学

目的建立用于幽门螺杆菌快速定量检测和分型的TaqMan MGB探针双重荧光定量PCR方法。方法采用Primer Premier 5软件分析设计引物和探针,采用双重荧光定量PCR扩增幽门螺杆菌CagA和VacA基因片段,建立循环数与拷贝数关系的标准曲线。检测临... 详细信息

目的建立用于幽门螺杆菌快速定量检测和分型的TaqMan MGB探针双重荧光定量PCR方法。方法采用Primer Premier 5软件分析设计引物和探针,采用双重荧光定量PCR扩增幽门螺杆菌CagA和VacA基因片段,建立循环数与拷贝数关系的标准曲线。检测临床标本中所含幽门螺杆菌的循环数,用该方法对临床胃黏膜标本进行检测并与标准曲线对比,计算所含幽门螺杆菌的拷贝数。结果建立的TaqMan MGB双重荧光定量PCR方法检测幽门螺杆菌质粒的线性范围是10~2~10~8拷贝/μl,CagA和VacA基因标准曲线的相关系数分别是0.977 8和0.990 4。29份临床胃黏膜标本的CagA和VacA基因循环数Ct值分别在29~35和30~35之间,幽门螺杆菌拷贝数分别在1.0×10^(1.39)~1.0×10^(3.87)和1.0×10^(3.06)~1.0×10^(3.91)之间,且临床标本中的幽门螺杆菌均为I型。结论建立的TaqMan MGB双重荧光定量PCR法具有敏感、精确、快速的特点,可用于幽门螺杆菌的快速定量检测与分型鉴定。

关键词：幽门螺杆菌 CagA VacA MGB双重荧光定量PCR技术

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七叶皂苷的制备及其对大鼠后肢水肿的疗效

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分子影像学杂志 2019年第1期42卷 46-51页

作者：薛晓畅李志兰张存王多宁王春娟党林涛王增禄第四军医大学药学系生物制药学教研室陕西西安710032 西安蓝绿卓生物科技有限公司陕西西安710000 西安医学院科研中心陕西西安710021

目的建立高纯度药用级别七叶皂苷的提取工艺并探讨其对组织水肿的治疗作用。方法利用醇提方法从梭罗果中获得七叶皂苷,随后使用软性填料的离子交换柱层析获得高纯度的七叶皂苷单体;使用单体制成喷雾剂对砸伤所致的组织水肿大鼠模型进行... 详细信息

目的建立高纯度药用级别七叶皂苷的提取工艺并探讨其对组织水肿的治疗作用。方法利用醇提方法从梭罗果中获得七叶皂苷,随后使用软性填料的离子交换柱层析获得高纯度的七叶皂苷单体;使用单体制成喷雾剂对砸伤所致的组织水肿大鼠模型进行治疗。结果从梭罗果中利用醇提获得粗纯的七叶皂苷提取液,活性炭脱色并浓缩后利用离子交换柱层析纯化获得纯度>90%的七叶皂苷单体。以该单体为主要成分制成的喷雾剂对于砸伤所致大鼠组织水肿模型具有良好的治疗效果,显著减轻了后肢的水肿程度(P<0.05),病灶变小,炎性细胞和纤维细胞浸润减少,其效果等同或优于阳性对照药物云南白药。结论传统的用于蛋白质纯化的软琼脂糖凝胶在中药单体的提纯中可发挥重要作用;七叶皂苷钠对于砸伤所致组织水肿有着良好的疗效。

关键词：七叶皂苷梭罗子组织水肿离子交换层析

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科研促进教学形式在培养医学生创新能力方面的研究

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继续医学教育 2018年第12期32卷 22-23页

作者：乔媛媛张玉梅李波清季晓飞耿丽滨州医学院病原生物学教研室山东烟台264003

高质量的教学工作能够激发学生的创造思维,而高水平的科研成果能够促进学科知识更新。为推动教研相互促进,良性循环,我们以病原生物学课程教学为例,通过科研进展进课堂,科研成果进讲座,以及学生参与课题、申请并完成大学生创新基金和参... 详细信息

高质量的教学工作能够激发学生的创造思维,而高水平的科研成果能够促进学科知识更新。为推动教研相互促进,良性循环,我们以病原生物学课程教学为例,通过科研进展进课堂,科研成果进讲座,以及学生参与课题、申请并完成大学生创新基金和参加具有一定研究性的综合性、设计性实验等多个方面,来推进教学内容的改革,医学生的发现问题和解决问题能力正逐步提高,其创新能力亦得以开发和培养。以科研促教学更新课程教学内容,可在基础医学课程中推广实施。

关键词：科研教学医学生创新能力

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Fascin-2基因与增龄性聋的研究进展

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滨州医学院学报 2018年第3期41卷 208-210,213页

作者：刘祥金昌洙韩锋产滨州医学院山东省医药卫生耳科遗传病重点实验室烟台264003 滨州医学院人体解剖学教研室滨州医学院生物化学与分子生物学教研室

年龄相关性听力损失（Age-related Hearing Loss,AHL）即增龄性聋又称老年性聋（Presbycusis）。AHL病因复杂,除受到生活环境与社会因素的影响外,遗传因素中尤其是基因缺陷在AHL发生发展中起着十分重要的作用。大约50%～60%的患者有遗... 详细信息

年龄相关性听力损失（Age-related Hearing Loss,AHL）即增龄性聋又称老年性聋（Presbycusis）。AHL病因复杂,除受到生活环境与社会因素的影响外,遗传因素中尤其是基因缺陷在AHL发生发展中起着十分重要的作用。大约50%～60%的患者有遗传缺陷,而且有增加的趋势^（[1]）。在研发有效治疗方法时,主要困难是缺少有关引起这类疾病的分子和细胞学行为的知识^（[2]）。因此,研究基因变异在AHL发生过程中的作用机制.

关键词： Fascin-2 增龄性聋AHL 毛细胞静纤毛交联蛋白

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硫化氢对创伤后应激障碍大鼠空间学习记忆能力及海马神经元放电的影响

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中国药理学通报 2017年第2期33卷 206-211页

作者：刘红霞于腊梅黄瑾张立霞岳真李庆忠滨州医学院基础医学院生理学教研室山东烟台264003 滨州医学院附属医院院办山东烟台264003 滨州医学院医药研究中心山东烟台264003 滨州医学院基础医学院生物化学教研室山东烟台264003 滨州医学院药理学教研室山东烟台264003

目的探讨创伤后应激障碍(posttraumatic stress disorder,PTSD)大鼠行为学改变及脑内胱硫醚-β-合成酶(cysta-thionine-β-synthase,CBS)/硫化氢(hydrogen sulfide,H_2S)水平的变化,并研究外源性补充H_2S对大鼠行为学影响的作用及机制。方法应用连续单一应激方案制备创伤后应激障碍动物模型,用Morris水迷宫检测大鼠空间学习记忆能力,Western blot技术和亚甲基蓝法检测海马脑区CBS/H_2S体系含量,用多管微电极在体细胞外电生理记录海马神经元放电情况。结果 (1)与正常对照组比较,PTSD组大鼠逃避潜伏期增加(P<0.01),在平台所在象限停留时间百分比和通过原平台位置次数明显减少(P<0.01);海马脑区的CBS/H_2S体系含量明显降低(P<0.01,P<0.05)。(2)与PTSD组比较,PTSD+硫氢化钠(sodium hydrosulfide,NaH S)组大鼠逃避潜伏期减小(P<0.01),在平台所在象限停留时间百分比和通过原平台位置次数明显增加(P<0.01)。(3)微量压力注射L-半胱氨酸(L-cysteine)使海马神经元自发放电频率明显升高(P﹤0.01)。结论PTSD大鼠通过抑制海马脑区CBS/H_2S体系导致空间学习记忆能力降低。H_2S改善PTSD大鼠空间学习记忆能力的机制可能与其增加海马神经元放电频率和兴奋性有关。海马脑区CBS/H_2S体系导致空间学习记忆能力降低。H_2S改善PTSD大鼠空间学习记忆能力的机制可能与其增加海马神经元放电频率和兴奋性有关。

关键词：硫化氢胱硫醚-β-合成酶硫氢化钠创伤后应激障碍海马在体细胞外电生理记录

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高校生物化学与分子生物学课“翻转课堂”模式的探索与实践

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教育现代化 2019年第41期 137-138页

作者：李尊岭孔丽君岳真滨州医学院生物化学教研室

将以学生为中心,注重学生自主学习能力提升的翻转课堂教学模式应用到高校生物化学与分子生物学课,通过课前教学方案设计、教师和学生角色转变准备、课堂教学实践、课后效果检验等环节开展教学探索与实践,以期提高教学质量,并为翻转课堂... 详细信息

将以学生为中心,注重学生自主学习能力提升的翻转课堂教学模式应用到高校生物化学与分子生物学课,通过课前教学方案设计、教师和学生角色转变准备、课堂教学实践、课后效果检验等环节开展教学探索与实践,以期提高教学质量,并为翻转课堂在其他课程的应用提供给有效参考。

关键词：生物化学翻转课堂教学模式

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DBA/2J小鼠耳蜗毛细胞静纤毛早期的形态结构变化

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解剖学杂志 2018年第2期41卷 135-138页

作者：刘祥金昌洙韩锋产滨州医学院山东省医药卫生耳科遗传病重点实验室烟台264003 滨州医学院人体解剖学教研室烟台264003 滨州医学院生物化学与分子生物学教研室烟台264003

目的:观察低周龄DBA/2J小鼠耳蜗毛细胞静纤毛形态结构的变化,探讨DBA/2J小鼠早期听力受损的原因。方法:检测DBA/2J小鼠2、4周龄和8周龄听觉脑干反应,扫描电镜下观察耳蜗底回毛细胞静纤毛的形态结构特征。结果:听觉脑干反应显示DBA/2J小... 详细信息

目的:观察低周龄DBA/2J小鼠耳蜗毛细胞静纤毛形态结构的变化,探讨DBA/2J小鼠早期听力受损的原因。方法:检测DBA/2J小鼠2、4周龄和8周龄听觉脑干反应,扫描电镜下观察耳蜗底回毛细胞静纤毛的形态结构特征。结果:听觉脑干反应显示DBA/2J小鼠在4周龄后表现为渐进性的听力受损。扫描电镜可见2周龄时高倍镜下纤毛束融合并伴有纤毛束软化,4周龄时纤毛束融合、软化和倒伏更为严重,8周龄低倍镜下纤毛束缺失数目较多,尚存纤毛融合倒伏更为严重。结论:DBA/2J小鼠耳蜗毛细胞静纤毛出现纤毛束融合、软化、弯曲、倒伏甚至缺失,可能是导致其早发性听力受损的主要原因。

关键词：年龄相关性听力损失耳蜗毛细胞静纤毛扫描电镜 DBA/2J小鼠

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烟台市市售海鱼异尖线虫幼虫感染现况调查

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中国寄生虫学与寄生虫病杂志 2017年第5期35卷 472-477页

作者：张雯倩任晓彤赵玉绮盖欣欣张玉梅柏雪莲滨州医学院临床医学院烟台264003 滨州医学院病原生物学教研室烟台264003

目的了解烟台市市售海鱼感染异尖线虫(Anisakis spp.)幼虫的情况。方法2016年1月至12月,在烟台市各海鲜市场随机采购不同种类的海鱼,解剖鱼体,查找、分离内脏和肌肉中的异尖线虫幼虫,光学显微镜下鉴定虫种,统计分析不同鱼种、不同脏器... 详细信息

目的了解烟台市市售海鱼感染异尖线虫(Anisakis spp.)幼虫的情况。方法2016年1月至12月,在烟台市各海鲜市场随机采购不同种类的海鱼,解剖鱼体,查找、分离内脏和肌肉中的异尖线虫幼虫,光学显微镜下鉴定虫种,统计分析不同鱼种、不同脏器和不同体质量下异尖线虫幼虫的感染情况。结果共解剖海鱼14种256尾,海鱼异尖线虫幼虫总感染率为66.4%(170/256),平均感染度为14.8条/尾。感染率较高的鱼种有鲐鱼(Pneumatophorus japonicus)、带鱼(Trichiurus lepturus)、辫子鱼(Platycephalus indicus)和黑鲪(Sebastodes fuscescens)等,感染率分别是100%(26/26)、92.3%(24/26)、92.0%(23/25)、85.7%(18/21),平均感染度分别为25.1、21.1、12.2和24.9条/尾;其他鱼种感染率由高到低依次是海鳗(Monopterus albus,80.0%,6.3条/尾)、真燕鳐(Prognichthys agooz,70.0%,3.3条/尾)、小黄鱼(Larimichthys polyactis,66.0%,11.7条/尾)、蓝点马鲛(Scomberomorus niphonius,52.0%,9.1条/尾)、高眼鲽(Cleisthenes herzensteini,50.0%,1.8条/尾)、鲱鱼(Clupea pallasi,44.4%,9.5条/尾)和黑背圆颌针鱼(Tylosurus melanotus,38.1%,2.0条/尾);银鲳(Pampus argenteus)、绿鳍马面鲀(Thamnaconus modestus)、海鲈鱼(Perca fluviatilis)未检出异尖线虫幼虫。异尖线虫幼虫多寄生于海鱼的肠系膜及肠壁、体腔和胃壁。不同鱼种的异尖线虫幼虫感染度与其体质量的相关性不同:体质量为0.25~0.35 kg的鲐鱼、0.16~0.20 kg的带鱼、0.16~0.25 kg的辫子鱼、0.05~0.10 kg的小黄鱼、0.17~0.26 kg的黑鲪、0.81~1.00 kg的蓝点马鲛的感染度较高,分别为46.5、27.2、18.0、12.0、42.7和68.0条/尾。在这6种鱼中,黑鲪和小黄鱼的感染度随体质量的增加而降低(r=-0.484,P<0.05;r=-0.633,P<0.01),蓝点马鲛的感染度随体质量的增加而增高(r=0.740,P<0.01),鲐鱼、带鱼、辫子鱼感染度与体质量无相关关系(r=-0.237、-0.080、-0.196,均P>0.05)。结论烟台市售海鱼中,鲐鱼、带鱼、辫子鱼和黑鲪的异尖线虫幼虫感染率较高(85%以上)。

关键词：海鱼异尖线虫感染烟台市

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